SN T 0123-2010 进出口动物源食品中有机磷农药残留量检测方法 气相色谱-质谱法

书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖／犜０１２３—２０１０代替ＳＮ０１２３—１９９２，ＳＮ０２１４—１９９３进出口动物源食品中有机磷农药残留量检测方法　气相色谱质谱法犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狅狉犵犪狀狅狆犺狅狊狆犺狅狉狌狊犿狌犾狋犻狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀犳狅狅犱狊狋狌犳犳狊狅犳犪狀犻犿犪犾狅狉犻犵犻狀犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋—犌犆犕犛犿犲狋犺狅犱２０１０１１０１发布２０１１０５０１实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布书书书前　　言　　本部分按照ＧＢ／Ｔ１．１—２００９给出的规则起草。本部分代替ＳＮ０１２３—１９９２《出口肉及肉制品中敌敌畏、二嗪磷、倍硫磷、马拉硫磷残留量检验方法》、ＳＮ０２１４—１９９３《出口肉及肉制品中敌敌畏、二嗪磷、皮蝇磷、毒死蜱、杀螟硫磷、对硫磷、乙硫磷、蝇毒磷残留量检验方法》。本部分与ＳＮ０１２３—１９９２、ＳＮ０２１４—１９９３相比，主要技术变化如下：———使用范围；———指标包括原２项相关标准的内容；———采用气相色谱质谱法；———增加阳性确证内容；———整合前处理条件。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分起草单位：中华人民共和国吉林出入境检验检疫局。本部分主要起草人：李爱军、王明泰、牟峻、卢利军、周晓、王莹。本部分所代替标准的历次版本发布情况为：———ＺＢＢ２２０１６—１９８８、ＳＮ０１２３—１９９２；———ＳＮ０２１４—１９９３。Ⅰ犛犖／犜０１２３—２０１０进出口动物源食品中有机磷农药残留量检测方法　气相色谱质谱法１　范围本标准规定了进出口动物源食品中９种有机磷农药残留量（敌敌畏、二嗪磷、皮蝇磷、杀螟硫磷、马拉硫磷、毒死蜱、倍硫磷、对硫磷、乙硫磷）的气相色谱质谱检测方法。本标准适用于清蒸猪肉罐头、猪肉、鸡肉、牛肉、鱼肉中有机磷农药残留量的测定和确证。２　规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。ＧＢ／Ｔ６６８２　分析实验室用水规格和试验方法３　方法提要试样用水丙酮溶液均质提取，二氯甲烷液液分配，凝胶色谱柱净化，再经石墨化炭黑固相萃取柱净化，气相色谱质谱检测，外标法定量。４　试剂和材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为ＧＢ／Ｔ６６８２规定的一级水。４．１　丙酮：残留级。４．２　二氯甲烷：残留级。４．３　环己烷：残留级。４．４　乙酸乙酯：残留级。４．５　正己烷：残留级。４．６　氯化钠。４．７　无水硫酸钠：６５０℃灼烧４ｈ，储于密封容器中备用。４．８　氯化钠水溶液（５％）：称取５．０ｇ氯化钠，用水溶解，并定容至１００ｍＬ。４．９　乙酸乙酯正己烷（１＋１，体积比）：量取１００ｍＬ乙酸乙酯和１００ｍＬ正己烷，混匀。４．１０　环己烷乙酸乙酯：（１＋１，体积比）：量取１００ｍＬ环己烷和１００ｍＬ正己烷，混匀。４．１１　１０种有机磷农药标准品：纯度均≥９５％。４．１２　标准储备溶液：分别准确称取适量的每种农药标准品（见附录Ａ），用丙酮分别配制成浓度为１００μｇ／ｍＬ～１０００μｇ／ｍＬ的标准储备溶液。４．１３　混合标准工作溶液：根据需要再用丙酮逐级稀释成适用浓度的系列混合标准工作溶液。４．１４　氟罗里硅土固相萃取柱：Ｆｌｏｒｉｓｉｌ，５００ｍｇ，６ｍＬ，或相当者。４．１５　石墨化炭黑固相萃取柱：ＥＮＶＩＣａｒｂ，２５０ｍｇ，６ｍＬ，或相当者，使用前用６ｍＬ乙酸乙酯正己烷预淋洗。１犛犖／犜０１２３—２０１０４．１６　有机相微孔滤膜：０．４５μｍ。４．１７　石墨化炭黑：６０目～８０目。５　仪器与设备５．１　气相色谱质谱仪：配有电子轰击源（ＥＩ）。５．２　电子天平：感量：０．０００１ｇ。５．３　凝胶色谱仪：配有单元泵、馏分收集器。５．４　均质器。５．５　旋转蒸发器。５．６　具塞锥型瓶：２５０ｍＬ。５．７　分液漏斗：２５０ｍＬ。５．８　浓缩瓶：２５０ｍＬ。５．９　离心机：４０００ｒ／ｍｉｎ以上。６　试样制备与保存６．１　试样制备取代表性样品约１ｋｇ，取可食部分，经捣碎机充分捣碎均匀，装入洁净容器，密封，标明标记。６．２　试样保存试样于－１８℃保存。在抽样及制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。７　测定步骤７．１　提取称取解冻后的试样２０ｇ（精确到０．０１ｇ）于２５０ｍＬ具塞锥形瓶中，加入２０ｍＬ水和１００ｍＬ丙酮（４．１），均质提取３ｍｉｎ。将提取液过滤，残渣再用５０ｍＬ丙酮重复提取一次，合并滤液于２５０ｍＬ浓缩瓶中，于４０℃水浴中浓缩至约２０ｍＬ。将浓缩提取液转移至２５０ｍＬ分液漏斗中，加入１５０ｍＬ氯化钠水溶液（４．８）和５０ｍＬ二氯甲烷（４．２），振摇３ｍｉｎ，静置分层，收集二氯甲烷相。水相再用５０ｍＬ二氯甲烷重复提取两次，合并二氯甲烷相。经无水硫酸钠脱水，收集于２５０ｍＬ浓缩瓶中，于４０℃水浴中浓缩至近干。加入１０ｍＬ环己烷乙酸乙酯（４．１０）溶解残渣，用０．４５μｍ滤膜过滤，待凝胶色谱（ＧＰＣ）净化。７．２　净化７．２．１　凝胶色谱（犌犘犆）净化７．２．１．１　凝胶色谱条件凝胶色谱条件如下：ａ）　凝胶净化柱：ＢｉｏＢｅａｄｓＳＸ３，７００ｍｍ×２５ｍｍ（内径），或相当者；ｂ）　流动相：乙酸乙酯环己烷（１＋１，体积比）；２犛犖／犜０１２３—２０１０ｃ）　流速：４．７ｍＬ／ｍｉｎ；ｄ）　样品定量环：１０ｍＬ；ｅ）　预淋洗时间：１０ｍｉｎ；ｆ）　凝胶色谱平衡时间：５ｍｉｎ；ｇ）　收集时间：２３ｍｉｎ～３１ｍｉｎ。７．２．１．２　凝胶色谱净化步骤将１０ｍＬ待净化液按７．２．１．１规定的条件进行净化，收集２３ｍｉｎ～３１ｍｉｎ区间的组分，于４０℃下浓缩至近干，并用２ｍＬ乙酸乙酯正己烷溶解残渣，待固相萃取净化。７．２．２　固相萃取（犛犘犈）净化将石墨化炭黑固相萃取柱（对于色素较深试样，在石墨化炭黑固相萃取柱上加１．５ｃｍ高的石墨化炭黑（４．１７））用６ｍＬ乙酸乙酯正己烷预淋洗，弃去淋洗液；将２ｍＬ待净化液倾入上述连接柱中，并用３ｍＬ乙酸乙酯正己烷分３次洗涤浓缩瓶，将洗涤液倾入石墨化炭黑固相萃取柱中，再用１２ｍＬ乙酸乙酯正己烷洗脱，收集上述洗脱液至浓缩瓶中，于４０℃水浴中旋转蒸发至近干，用乙酸乙酯溶解并定容至１．０ｍＬ，供气相色谱质谱测定和确证。７．３　测定７．３．１　气相色谱质谱条件气相色谱质谱条件如下：ａ）　色谱柱：３０ｍ×０．２５ｍｍ（内径），膜厚０．２５μｍ，ＤＢ５ＭＳ石英毛细管柱，或相当者；ｂ）色谱柱温度：５０℃（２ｍｉｎ）３０℃／ｍｉｎ１８０℃（１０ｍｉｎ）３０℃／ｍｉｎ２７０℃（１０ｍｉｎ）；ｃ）进样口温度：２８０℃；ｄ）色谱质谱接口温度：２７０℃；ｅ）载气：氦气，纯度≥９９．９９９％，流速１．２ｍＬ／ｍｉｎ；ｆ）进样量：１μＬ；ｇ）进样方式：无分流进样，１．５ｍｉｎ后开阀；ｈ）电离方式：ＥＩ；ｉ）电离能量：７０ｅＶ；ｊ）测定方式：选择离子监测方式；ｋ）选择监测离子（ｍ／ｚ）：见表１和参见附录Ｂ；ｌ）溶剂延迟：５ｍｉｎ；ｍ）离子源温度：１５０℃；ｎ）四级杆温度：２００℃。表１　选择离子监测方式的质谱参数表通道时间／ｍｉｎ选择离子／ａｍｕ１５．００　１０９，１２５，１３７，１４５，１７９，１８５，１９９，２２０，２７０，２８５，３０４２１７．００　１０９，１２７，１５８，１６９，２１４，２３５，２４５，２４７，２５８，２６０，２６１，２６３，２８５，２８６，３１４３１９．００　１５３，１２５，３８４，２２６，２１０，３３４３犛犖／犜０１２３—２０１０７．３．２　气相色谱质谱检测及确证根据样液中被测物含量情况，选定浓度相近的标准工作溶液，对标准工作溶液与样液等体积参插进样测定，标准工作溶液和待测样液中每种有机磷农药的响应值均应在仪器检测的线性范围内。如果样液与标准工作溶液的选择离子色谱图中，在相同保留时间有色谱峰出现，则根据附录Ｂ中每种有机磷农药选择离子的种类及其丰度比进行确证。在上述气相色谱质谱条件下，９种有机磷农药标准物的参考保留时间和气相色谱质谱选择离子色谱图参见附录Ｂ和附录Ｃ中图Ｃ．１。７．４　结果计算和表述试样中每种有机磷农药残留量按式（１）计算：犡犻＝犃犻×犮犻×犞犃犻ｓ×犿…………………………（１）式中：犡犻———试样中每种有机磷农药残留量，单位为毫克每千克（ｍｇ／ｋｇ）；犃犻———样液中每种有机磷农药的峰面积（或峰高）；犮犻———标准工作液中每种有机磷农药的浓度，单位为微克每毫升（μｇ／ｍＬ）；犞———样液最终定容体积，单位为毫升（ｍＬ）；犃犻ｓ———标准工作液中每种有机磷农药的峰面积（或峰高）；犿———最终样液代表的试样质量，单位为克（ｇ）。８　测定低限、回收率８．１　测定低限本方法对进出口动物源食品中９种有机磷农药残留量的测定低限参见附录Ｂ。８．２　回收率８．２．１　清蒸猪肉罐头中１０种有机磷农药在０．０２ｍｇ／ｋｇ～１．００ｍｇ／ｋｇ时，回收率为７０．０％～９４．９％。８．２．２　猪肉中９种有机磷农药在０．０２ｍｇ／ｋｇ～１．００ｍｇ／ｋｇ时，回收率为７１．２％～９７．１％。８．２．３　鸡肉中９种有机磷农药在０．０２ｍｇ／ｋｇ～１．００ｍｇ／ｋｇ时，回收率为７４．３％～９４．８％。８．２．４　牛肉中９种有机磷农药在０．０２ｍｇ／ｋｇ～１．００ｍｇ／ｋｇ时，回收率为７０．６％～９６．９％。８．２．５　鱼肉中９种有机磷农药在０．０２ｍｇ／ｋｇ～１．００ｍｇ／ｋｇ时，回收率为７６．３％～９３．３％。４犛犖／犜０１２３—２０１０附　录　犃（规范性附录）９种有机磷农药种类表表犃．１　９种有机磷农药种类表序号农药名称英文名称ＣＡＳ编号化学分子式１敌敌畏ｄｉｃｈｌｏｒｖｏｓ００００６２７３７Ｃ４Ｈ７Ｃｌ２Ｏ４Ｐ２二嗪磷ｄｉａｚｉｎｏｎ０００３３３４１５Ｃ１２Ｈ２１Ｎ２Ｏ３ＰＳ３皮蝇磷ｆｅｎｃｈｌｏｒｐｈｏｓ０００２９９８４３Ｃ８Ｈ８Ｃｌ３Ｏ３ＰＳ４杀螟硫磷ｆｅｎｉｔｒｏｔｈｉｏｎ０００１２２１４５Ｃ９Ｈ１２ＨＯ５ＰＳ５马拉硫磷ｍａｌａｔｈｉｏｎ０００１２１７５５Ｃ１０Ｈ１９Ｏ６ＰＳ２６毒死蜱ｃｈｌｏｒｐｙｒｉｆｏｓ００２９２１８８２Ｃ９Ｈ１１Ｃｌ３ＮＯ３ＰＳ７倍硫磷ｆｅｎｔｈｉｏｎ００００５５３８９Ｃ１０Ｈ１５Ｏ３ＰＳ２８对硫磷ｐａｒａｔｈｉｏｎ００００５６３８２Ｃ１０Ｈ１４ＮＯ５ＰＳ９乙硫磷ｅｔｈｉｏｎ０００５６３１２２Ｃ９Ｈ２２Ｏ４Ｐ２Ｓ４５犛犖／犜０１２３—２０１０附　录　犅（资料性附录）９种有机磷农药的保留时间、定量和定性选择离子及测定低限表表犅．１　９种有机磷农药的保留时间、定量和定性选择离子及测定低限表序号农药名称保留时间／ｍｉｎ特征碎片离子／ａｍｕ定量定性丰度比测定低限μｇ／ｇ１敌敌畏６．５７１０９１８５，１４５，２２０３７∶１００∶１２∶０７０．０２２二嗪磷１２．６４１７９１３７，１９９，３０４６２∶１００∶２９∶１１０．０２３皮蝇磷１６．４３２８５１２５，１０９，２７０１００∶３８∶５６∶６８０．０２４杀螟硫磷１７．１５２７７２６０，２４７，２１４１００∶１０∶０６∶５４０．０２５马拉硫磷１７．５３１７３１２７，１５８，２８５０７∶４０∶１００∶１００．０２６毒死蜱１７．６８１９７３１４，２５８，２８６６３∶６８∶３４∶１０００．０１７倍硫磷１７．８０２７８１６９，２６３，２４５１００∶１８∶０８∶０６０．０２８对硫磷１７．９０２９１１０９，２６１，２３５２５∶２２∶１６∶１０００．０２９乙硫磷２０．１６２３１１５３，１２５，３８４１６∶１０∶１００∶０６０．０２６犛犖／犜０１２３—２０１０附　录　犆（资料性附录）９种有机磷农药标准物质的气相色谱质谱图１———敌敌畏；２———二嗪磷；３———皮蝇磷；４———杀螟硫磷；５———马拉硫磷；６———毒死蜱；７———倍硫磷；８———对硫磷；９———乙硫