SN-T 2012-2007 进出口食醋中苯甲酸、山梨酸的检测方法 液相色谱法

书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖／犜２０１２—２００７进出口食醋中苯甲酸、山梨酸的检测方法液相色谱法犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犫犲狀狕狅犻犮犪犮犻犱犪狀犱狊狅狉犫犻犮犪犮犻犱犻狀狏犻狀犲犵犪狉犳狅狉犲狓狆狅狉狋犪狀犱犻犿狆狅狉狋—犔犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔２００７１２２４发布２００８０７０１实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布书书书前　　言　　本标准的附录Ａ为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准由中华人民共和国山西出入境检验检疫局负责起草。本标准主要起草人：宋欢、连庚寅、薛平、杜利君、宋洁、苑莉。本标准系首次发布的检验检疫行业标准。Ⅰ犛犖／犜２０１２—２００７进出口食醋中苯甲酸、山梨酸的检测方法液相色谱法１　范围本标准规定了进出口食醋中苯甲酸、山梨酸的液相色谱检测方法。本标准适用于食醋中苯甲酸、山梨酸的检测。２　检测方法２．１　方法提要试样在酸性条件下蒸馏，馏出液采用液相色谱紫外检测器直接测定，外标法定量。２．２　试剂和材料除有特殊说明以外，所用试剂均为分析纯，水为去离子水。２．２．１　甲醇：高效液相色谱级。２．２．２　乙腈：高效液相色谱级。２．２．３　柠檬酸（Ｃ６Ｈ８Ｏ７·Ｈ２Ｏ）。２．２．４　柠檬酸三钠（Ｎａ３Ｃ６Ｈ５Ｏ７·２Ｈ２Ｏ）。２．２．５　柠檬酸缓冲溶液，５ｍｍｏｌ／Ｌ：称取柠檬酸０．７ｇ和柠檬酸三钠０．６ｇ加水溶解定容至１０００ｍＬ。２．２．６　酒石酸。２．２．７　酒石酸溶液，１５％：取１５ｇ酒石酸用水定容到１００ｍＬ。２．２．８　消泡剂：硅酮树脂。２．２．９　碳酸氢钠。２．２．１０　２０ｇ／Ｌ碳酸氢钠溶液：称取２ｇ碳酸氢钠，加水至１００ｍＬ，振摇溶解。２．２．１１　氯化钠。２．２．１２　苯甲酸标准品：纯度大于等于９９％。２．２．１３　山梨酸标准品：纯度大于等于９９％。２．２．１４　苯甲酸标准储备溶液：准确称取０．１０００ｇ苯甲酸，加入５ｍＬ碳酸氢钠溶液，加热溶解，用水定容至１００ｍＬ，储备液浓度为１ｍｇ／ｍＬ。２．２．１５　山梨酸标准储备溶液：准确称取０．１０００ｇ山梨酸，加入５ｍＬ碳酸氢钠溶液，加热溶解，用水定容至１００ｍＬ，储备液浓度为１ｍｇ／ｍＬ。２．２．１６　苯甲酸、山梨酸标准混合液：准确移取苯甲酸、山梨酸标准储备液各１０．０ｍＬ，移入１００ｍＬ容量瓶中，用水定容。此溶液苯甲酸、山梨酸的浓度均为０．１ｍｇ／ｍＬ。２．３　仪器和设备２．３．１　高效液相色谱仪：配紫外检测器。２．３．２　蒸馏装置。２．４　测定步骤２．４．１　试样的处理准确量取５０．０ｍＬ试样，加入４０ｇ氯化钠，５ｍＬ１５％酒石酸溶液，１滴消泡剂，加水至约２００ｍＬ，混匀后，进行蒸馏（蒸馏速度约为２．５ｍＬ／ｍｉｎ），收集约９０ｍＬ馏出液，用水定容至１００ｍＬ。用０．４５μｍ的过滤膜过滤后，待液相色谱测定。１犛犖／犜２０１２—２００７２．４．２　测定２．４．２．１　液相色谱条件ａ）　色谱柱：Ｃ１８柱（１５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ，或相当者）；ｂ）　流动相：甲醇乙腈５ｍｍｏｌ／Ｌ柠檬酸缓冲溶液（１０∶２０∶７０体积比）；ｃ）　流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ；ｄ）　检测波长：２３０ｎｍ；ｅ）　柱温：３０℃；ｆ）　进样量：２５μＬ。２．４．２．２　液相色谱测定根据样液中苯甲酸和山梨酸的含量，选定浓度相近的标准混合工作液，保证样品溶液中苯甲酸、山梨酸的响应值在线性范围内，标准工作液与样液等体积参差进样进行测定。在上述色谱条件下，苯甲酸和山梨酸的参考保留时间分别约为５．１３ｍｉｎ和６．４１ｍｉｎ。苯甲酸、山梨酸标准溶液色谱图参见附录Ａ．１。　２．４．３　空白试验除不加试样外，均按上述步骤进行。２．５　结果计算和表述用色谱数据处理软件外标法或按式（１）计算，计算结果需扣除空白值：犡＝犃×犮×犞１犃Ｓ×犞…………………………（１）　　式中：犡———试样中苯甲酸或山梨酸含量，单位为毫克每升（ｍｇ／Ｌ）；犃———样液中苯甲酸或山梨酸的峰面积；犮———标准工作液中苯甲酸或山梨酸的浓度，单位为微克每毫升（μｇ／ｍＬ）；犞１———样液最终定容体积，单位为毫升（ｍＬ）；犃Ｓ———标准工作液中苯甲酸或山梨酸的峰面积；犞———试样的体积，单位为毫升（ｍＬ）。３　方法的测定低限和回收率３．１　测定低限本方法苯甲酸和山梨酸的测定低限均为０．１ｍｇ／Ｌ。３．２　回收率３．２．１　食醋中苯甲酸的添加浓度及其回收率：———添加浓度在０．１ｍｇ／Ｌ，回收率为８８％～１０４％；———添加浓度在５ｍｇ／Ｌ，回收率为８９．０％～９９．４％；———添加浓度在５０ｍｇ／Ｌ，回收率为９１．２％～１０１．６％。３．２．２　食醋中山梨酸的添加浓度及其回收率：———添加浓度在０．１ｍｇ／Ｌ，回收率为８３％～１０３％；———添加浓度在５ｍｇ／Ｌ，回收率为８７．８％～９７．０％；———添加浓度在５０ｍｇ／Ｌ，回收率为８９．５％～９８．２％。２犛犖／犜２０１２—２００７附　录　犃（资料性附录）标准品液相色谱图　　１———苯甲酸；２———山梨酸。图犃．１　苯甲酸、山梨酸标准品液相色谱图３犛犖／犜２０１２—２００７犉狅狉犲狑狅狉犱犃狀狀犲狓犃狅犳狋犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犻狊犪狀犻狀犳狅狉犿犪狋犻狏犲犪狀狀犲狓．犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狑犪狊狆狉狅狆狅狊犲犱犫狔犪狀犱犻狊狌狀犱犲狉狋犺犲犮犺犪狉犵犲犱狅犳犆犲狉狋犻犳犻犮犪狋犻狅狀犪狀犱犃犮犮狉犲犱犻狋犪狋犻狅狀犃犱犿犻狀犻狊狋狉犪狋犻狅狀狅犳狋犺犲犘犲狅狆犾犲’狊犚犲狆狌犫犾犻犮狅犳犆犺犻狀犪．犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狑犪狊犱狉犪犳狋犲犱犫狔犛犺犪狀狓犻犈狀狋狉狔犈狓犻狋犐狀狊狆犲犮狋犻狅狀犪狀犱犙狌犪狉犪狀狋犻狀犲犅狌狉犲犪狌狅犳狋犺犲犘犲狅狆犾犲’狊犚犲狆狌犫犾犻犮狅犳犆犺犻狀犪．犜犺犲狊狋犪狀犱犪狉犱狑犪狊犿犪犻狀犾狔犱狉犪犳狋犲犱犫狔犎狌犪狀犛狀狅犵，犌犲狀犵犢犻狀犔犻犪狀，犘犻狀犵犡狌犲，犔犻犑狌狀犇狌，犑犻犲犛狅狀犵，犔犻犢狌犪狀．犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犻狊犪狆狉狅犳犲狊狊犻狅狀犪犾狊狋犪狀犱犪狉犱犳狅狉犲狀狋狉狔犲狓犻狋犻狀狊狆犲犮狋犻狅狀犪狀犱狇狌犪狉犪狀狋犻狀犲狆狉狅犿狌犾犵犪狋犲犱犳狅狉狋犺犲犳犻狉狊狋狋犻犿犲．４犛犖／犜２０１２—２００７犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犫犲狀狕狅犻犮犪犮犻犱犪狀犱狊狅狉犫犻犮犪犮犻犱犻狀狏犻狀犲犵犪狉犳狅狉犲狓狆狅狉狋犪狀犱犻犿狆狅狉狋—犔犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔１　犛犮狅狆犲犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狊狆犲犮犻犳犻犻犲狊狋犺犲犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犫犲狀狕狅犻犮犪犮犻犱犪狀犱狊狅狉犫犻犮犪犮犻犱犫狔犺犻犵犺狆犲狉犳狅狉犿犪狀犮犲犾犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔犻狀狏犻狀犲犵犪狉犳狅狉犲狓狆狅狉狋犪狀犱犻犿狆狅狉狋．犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犻狊犪狆狆犾犻犮犪犫犾犲狋狅狋犺犲犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犫犲狀狕狅犻犮犪犮犻犱犪狀犱狊狅狉犫犻犮犪犮犻犱犻狀狏犻狀犲犵犪狉．２　犕犲狋犺狅犱狅犳犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀２．１　犃犫狊狋狉犪犮狋狅犳犿犲狋犺狅犱犅犲狀狕狅犻犮犪犮犻犱犪狀犱狊狅狉犫犻犮犪犮犻犱狑犲狉犲犲狓狋犪犮狋犲犱犫狔犱犻狊狋犻犾犾犲犱犻狀犪犮犻犱狊狅犾狌狋犻狅狀犪狀犱犱犲狋犲狉犿犻狀犲犱犫狔犺犻犵犺狆犲狉犳狅狉犿犪狀犮犲犾犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔，狌狊犻狀犵犲狓狋犲狉狀犪犾狊狋犪狀犱犪狉犱犿犲狋犺狅犱．２．２　犚犲犪犵犲狀狋狊犪狀犱犿犪狋犲狉犻犪犐狊犝狀犾犲狊狊狅狋犺犲狉狑犻狊犲狊狆犲犮犻犳犻犲，犪犾犾狋犺犲狉犲犪犵犲狀狋狊狌狊犲犱狊犺狅狌犾犱犫犲犪狀犪犾狔狋犻犮犪犾犵狉犪犱犲犪狀犱“狑犪狋犲狉”犻狊犱犲犻狅狀犻狕犲犱狑犪狋犲狉．２．２．１　犕犲狋犺犪狀狅犾：犎犘犔犆犵狉犪犱犲．２．２．２　犃犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲：犎犘犔犆犵狉犪犱犲．２．２．３　犆犻狋狉犻犮犪犮犻犱（犆６犎８犗７·犎２犗）．２．２．４　犛狅犱犻狌犿犮犻狋狉犪狋犲（犖犪３犆６犎５犗７·２犎２犗）．２．２．５　犆犻狋狉犻犮犪犮犻犱犫狌犳犳犲狉，５犿犿狅犾／犔：犠犲犻犵犺０．７犵犮犻狋狉犻犮犪犮犻犱犪狀犱０．６犵狊狅犱犻狌犿犮犻狋狉犪狋犲，犱犻狊狊狅犾狏犲狑犻狋犺狑犪狋犲狉犻狀１０００犿犔狏狅犾狌犿犲狋狉犻犮犳犾犪狊犽．２．２．６　犜犪狉狋犪狉犻犮犪犮犻犱．２．２．７　犜犪狉狋犪狉犻犮犪犮犻犱狊狅犾狌狋犻狅狀，１５％：犇犻狊狊狅犾狏犲１５犵狋犪狉狋犪狉犻犮犪犮犻犱狑犻狋犺狑犪狋犲狉犻狀１００犿犔狏狅犾狌犿犲狋狉犻犮犳犾犪狊犽．５犛犖／犜２０１２—２００７２．２．８　犃狀狋犻犳狅犪犿犻狀犵犪犵犲狀狋：狊犻犾犻犮狅狀犲．２．２．９　犛狅犱犻狌犿犺狔犱狉狅犵犲狀犮犪狉犫狅狀犪狋犲．２．２．１０　犛狅犱犻狌犿犺狔犱狉狅犵犲狀犮犪狉犫狅狀犪狋犲狊狅犾狌狋犻狅狀，２０犵／犔：犇犻狊狊狅犾狏犲２犵狊狅犱犻狌犿犺狔犱狉狅犵犲狀犮犪狉犫狅狀犪狋犲狑犻狋犺狑犪狋犲狉犻狀１００犿犔狏狅犾狌犿犲狋狉犻犮犳犾犪狊犽．２．２．１１　犛狅犱犻狌犿犮犺犾狅狉犻犱犲．２．２．１２　犅犲狀狕狅犻犮犪犮犻犱∶犘狌狉犻狋狔≥９９％．２．２．１３　犛狅狉犫犻犮犪犮犻犱∶犘狌狉犻狋狔≥９９％．２．２．１４　犛狋狅犮犽狊狋犪狀犱犪狉犱狊狅犾狌狋犻狅狀狅犳犫犲狀狕狅犻犮犪犮犻犱：犃犮犮狌狉犪狋犲犾狔狑犲犻犵犺０．１０００犵犫犲狀狕狅犻犮犪犮犻犱，犪犱犱５犿犔犛狅犱犻狌犿犺狔犱狉狅犵犲狀犮犪狉犫狅狀犪狋犲狊狅犾狌狋犻狅狀犪狀犱犱犻狊狊狅犾狏犲犫狔犺犲犪狋犻狀犵，狋犺犲狀犱犻狊狊狅犾狏犲狑犻狋犺狑犪狋犲狉犪狀犱狇狌犪狀狋犻狋犪狋犻狏犲犾狔狅狀１００犿犔狏狅犾狌犿犲狋狉犻犮犳犾犪狊犽，狋犺犲犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀犻狊１犿犵／犿犔．２．２．１５　犛狋狅犮犽狊狋犪狀犱犪狉犱狊狅犾狌狋犻狅狀狅犳狊狅狉犫犻犮犪犮犻犱：犃犮犮狌狉犪狋犲犾狔狑犲犻犵犺０．１０００犵狊狅狉犫犻犮犪犮犻犱，犪犱犱５犿犔犛狅犱犻狌犿犺狔犱狉狅犵犲狀犮犪狉犫狅狀犪狋犲狊狅犾狌狋犻狅狀犪狀犱犱犻狊狊狅犾狏犲犫狔犺犲犪狋犻狀犵，狋犺犲狀犱犻狊狊狅犾狏犲狑犻狋犺狑犪狋犲狉犪狀犱狇狌犪狀狋犻狋犪狋犻狏犲犾狔狅狀１００犿犔狏狅犾狌犿犲狋狉犻犮犳犾犪狊犽，狋犺犲犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀犻狊１犿犵／犿犔．２．２．１６　犕犻狓犲犱狊狋犪狀犱犪狉犱狑狅狉犽犻狀犵狊狅犾狌狋犻狅狀狅犳犫犲狀狕狅犻犮犪犮犻犱犪狀犱狊狅狉犫犻犮犪犮犻犱：犜狉犪狀狊犳犲狉犃犮犮狌狉犪狋犲犾狔１０．０犿犔狊狋狅犮犽狊狋犪狀犱犪狉犱狊狅犾狌狋犻狅狀狅犳犫犲狀狕狅犻犮犪犮犻犱犪狀犱狊狅狉犫犻犮犪犮犻犱犻狀１００犿犔狏狅犾狌犿犲狋狉犻犮犳犾犪狊犽，犱犻犾狌狋犲狋犺犲犮狅狀狋犲狀狋狋狅狏狅犾狌犿犲狑犻狋犺狑犪狋犲狉犻狀犱犻狏犻犱狌犪犾犾狔．犜犺犲犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀狅犳狊狅犾狌狋犻狅狀犪狉犲０．１犿犵／犿犔．２．３　犃狆狆犪狉犪狋狌狊犪狀犱犲狇狌犻狆犿犲狀狋２．３．１　犎犻犵犺狆犲狉犳狅狉犿犪狀犮犲犾犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔狑犻狋犺犝犞犱犲狋犲犮狋犻狅狀．２．３．２　犇犻狊狋犻犾犾犻狀犵犪狆狆犪狉犪狋狌狊．２．４　犘狉狅犮犲犱狌狉犲２．４．１　犘狉犲狆犪狉犪狋犻狅狀狅犳狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲犃犮犮狌狉犪狋犲犾狔狋狉犪狀狊犳犲狉５０．０犿犔狅犳狋犺犲狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲犻狀犱犻狊狋犻犾犾犻狀犵犳犾犪狊犽，犪犱犱４０犵犖犪犆犾，５犿犔１５％狋犪狉狋犪狉犻犮犪犮犻犱狊狅犾狌狋犻狅狀，１犱犪狀狋犻犳狅犪犿犻狀犵犪犵犲狀狋，狋犺犲狀犪犱犱狑犪狋犲狉犪犫狅狌狋狋狅２００犿犔犪狀犱犿犻狓，犳犻狀犪犾犾狔犱犻狊狋犻犾犾（犪犫狅狌狋２．５犿犔／犿犻狀）．犆狅犾犾犲犮狋犪犫狅狌狋９０犿犔犱犻狊狋犻犾犾犻狀犵狊狅犾狌狋犻狅狀，狋狉犪狀狊犳犲狉犻狀１００犿犔狏狅犾狌犿犲狋狉犻犮犳犾犪狊犽，犪狀犱犪犱犱狑犪狋犲狉狋狅犿犪狉犽．犜犺犲狊狅犾狌狋犻狅狀狑犪狊犳犻犾狋犲狉犲犱狋犺狅狌犵犺０．４５μ犿犿犲犿犫狉犪狀犲犪狀犱犱犲狋犲狉犿犻狀犲犱犫狔犺犻犵犺狆犲狉犳狅狉犿犪狀犮犲犾犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔．６犛犖／犜