SNT 2505-2010 水稻干尖线虫检疫鉴定方法

书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖／犜２５０５—２０１０水稻干尖线虫检疫鉴定方法犙狌犪狉犪狀狋犻狀犲犻犱犲狀狋犻犳犻犮犪狋犻狅狀狅犳狉犻犮犲狑犺犻狋犲狋犻狆狀犲犿犪狋狅犱犲，犃狆犺犲犾犲狀犮犺狅犻犱犲狊犫犲狊狊犲狔犻犮犺狉犻狊狋犻犲２０１００３０２发布２０１００９１６实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布食品伙伴网书书书前　　言　　本标准的附录Ｂ为规范性附录，附录Ａ为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国山东出入境检验检疫局、中华人民共和国江苏出入境检验检疫局、中华人民共和国新疆出入境检验检疫局和中华人民共和国广东出入境检验检疫局。本标准主要起草人：葛建军、邵秀玲、粟寒、王翀、赵立荣。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。Ⅰ犛犖／犜２５０５—２０１０食品伙伴网水稻干尖线虫检疫鉴定方法１　范围本标准规定了进出境植物检疫中水稻干尖线虫的检疫鉴定方法。本标准适用于进出境植物及植物产品、植物栽培介质等传带的水稻干尖线虫的检疫鉴定。２　符号下列符号用于本标准。狀———测计的线虫样本数目；犔———虫体体长（μｍ或ｍｍ）；犪———体长／最大体宽；犫———体长／虫体前端至食道与肠连接处的距离；犮———体长／尾长；犛ｔ———口针长度（μｍ）；犛ｐ———交合刺长度（μｍ）；犜———泄殖腔开口至精巢末端的距离×１００／体长；犞———虫体前端至阴门的距离×１００／体长。３　原理学名：犃狆犺犲犾犲狀犮犺狅犻犱犲狊犫犲狊狊犲狔犻Ｃｈｒｉｓｔｉｅ，１９４２异名：犃狆犺犲犾犲狀犮犺狅犻犱犲狊狅狉狔狕犪犲Ｙｏｋｏｏ，１９４８犃狊狋犲狉狅犪狆犺犲犾犲狀犮犺狅犻犱犲狊犫犲狊狊犲狔犻（Ｃｈｒｉｓｔｉｅ，１９４２）Ｄｒｏｚｄｏｖｓｋｉ，１９６７英文通俗名称：Ｒｉｃｅｗｈｉｔｅｔｉｐｎｅｍａｔｏｄｅ，Ｓｐｒｉｎｇｄｗａｒｆｎｅｍａｔｏｄｅ，Ｓｔｒａｗｂｅｒｒｙｂｕｄｎｅｍａｔｏｄｅ，Ｗｈｉｔｅｔｉｐｎｅｍａｔｏｄｅ分类地位：线形动物门（Ｎｅｍａｔｏｄａ）、侧尾腺纲（Ｓｅｃｅｒｎｅｎｔｅａ）、滑刃目（Ａｐｈｅｌｅｎｃｈｉｄａ）、滑刃线虫科（Ａｐｈｅｌｅｎｃｈｏｉｄｉｄａｅ）、滑刃线虫属（犃狆犺犲犾犲狀犮犺狅犻犱犲狊）。水稻干尖线虫的寄主范围、传播途径（参见附录Ａ）和形态学特征是其检疫鉴定方法的依据。４　仪器、用具及药品４．１　仪器与用具４．１．１　生物显微镜。４．１．２　体视显微镜具透射光源。４．１．３　冰箱。４．１．４　加热板（８０℃以下）。４．１．５　打孔器。４．１．６　载玻片。４．１．７　盖玻片。４．１．８　标准套筛（６０目～５００目等）。４．１．９　烧杯（５００ｍＬ、１０００ｍＬ等）。４．１．１０　漏斗。１犛犖／犜２５０５—２０１０食品伙伴网４．１．１１　漏斗架。４．１．１２　乳胶管。４．１．１３　止水夹。４．１．１４　凹玻片。４．１．１５　指形管。４．１．１６　剪刀。４．１．１７　挑针。４．１．１８　浅盘（上盘、下盘）。４．１．１９　玻璃纤维丝。４．１．２０　酒精灯。４．１．２１　培养皿。４．１．２２　试管。４．１．２３　纱布。４．１．２４　干燥器。４．１．２５　记号笔。４．２　药品４．２．１　指甲油。４．２．２　４％甲醛。４．２．３　乳酚油（苯酚２０ｍＬ、乳酸２０ｍＬ、甘油４０ｍＬ和蒸馏水２０ｍＬ混合而成）。４．２．４　石蜡。４．２．５　冰乙酸。５　外观症状的检查检查受检植物是否是水稻干尖线虫的寄主；检查是否有水稻干尖线虫的危害症状，如植物叶片是否畸形、扭曲、皱缩，褪绿叶片粗糙、叶柄变红、节间短、腋芽坏死等症状，收集上述可疑植物材料及所夹带的介质土，一并带回实验室检验。６　实验室检验对于抽取的样品，若是叶片或叶芽等，可以在含水的培养皿中直接进行组织解剖，查看是否有线虫；水稻种子或其他样品可用浅盘分离法或漏斗法分离线虫。将分离获得的水样在体视显微镜下检查，挑取或吸取疑似线虫若干条，制成临时玻片后在显微镜下镜检，观察线虫的形态学结构。７　水稻干尖线虫的形态学鉴定特征７．１　形态特征图见附录Ｂ。７．２　形态特征描述雌虫：虫体细长，热力杀死后稍直或弯曲；环纹纤细，不清晰，中部环纹约０．９μｍ宽；口针较细弱，长１０μｍ～１３μｍ，基部略膨大；唇区圆，稍缢缩；侧区约体宽的四分之一，刻线４条；中食道球卵圆形，瓣门清晰；排泄孔常接近神经环的前缘；阴门横裂，阴门唇稍突起；受精囊长卵圆形，内常聚集有精子；卵巢前伸，相对较短，不延伸至食道腺处，卵母细胞２列～４列；后阴子宫囊窄，内无精子，长为肛门处体宽的２．５倍～３．５倍，但短于肛阴距的三分之一。尾圆锥形，长为肛门处体宽的３．５倍～５倍，末端有一个尾尖突，上有３个～４个小尖突。２犛犖／犜２５０５—２０１０食品伙伴网雄虫：热杀死后虫体后部向腹面弯成近１８０°；前体部特征与雌虫相似；尾圆锥形，末端有一尾尖突，上有２个～４个小尖突。交合刺呈玫瑰刺状，喙部中等发达，但无顶部，背弓长１８μｍ～２１μｍ。７．３　测计值７．３．１　雌虫狀＝１０：犔＝０．６６ｍｍ～０．７５ｍｍ；犪＝３２～３４；犫＝１０．２～１１．４；犮＝１７～２１；犞＝６７～８０（Ｃｈｒｉｓｔｉｅ，１９４２）。狀＝２０：犔＝０．５７～０．８４（０．６８）ｍｍ；犪＝３９～５３（４７．７）；犫＝９．２～１３．１（１１．４６）；犮＝１３．８～２０．４（１７．７）；犞＝３９．１１９．９６８．７～７３．６（７１．２）４．１６．２；犛ｔ＝１０．０１２．５（１１．９）μｍ（Ｆｏｒｔｕｎｅｒ，１９７０，来自水稻）。犔＝０．７ｍｍ；犪＝５０；犫＝１０；犮＝１９；犞＝３３７０６；犛ｔ＝１０μｍ（新模标本，来自美国草莓）。犔＝０．６２～０．８８ｍｍ；犪＝３８～５８；犫＝９～１２；犮＝１５～２０；犞＝４３３３６６～７２４８（Ａｌｌｅｎ，１９５２）。７．３．２　雄虫狀＝１０；犔＝０．５４ｍｍ～０．６２ｍｍ；犪＝３６～３９；犫＝８．６～８．８；犮＝１５～１７（Ｃｈｒｉｓｔｉｅ，１９４２）。狀＝２０：犔＝０．５３～０．６１（０．５７）ｍｍ；犪＝４０．７～４６．９（４４．４）；犫＝８．８７～１０．７（９．５２）；犮＝１６～２０（１７．９７）；犜＝２８～５２（４０．５９）；犛ｔ＝１０．０～１２．５（１１．４）μｍ；犛ｐ＝１８～２１（１９．２４）μｍ（Ｆｏｒｔｕｎｅｒ，１９７０，来自水稻）。犔＝０．４４ｍｍ～０．７２ｍｍ；犪＝３６～４７；犫＝９～１１；犮＝１４～１９；犜＝５０～６５（新模标本，来自美国草莓）。犔＝０．５７３～０．８６４（０．７３２）ｍｍ；犪＝４０～６３（５１）；体宽１２～１７（１４）μｍ（Ｆｒａｎｋｌｉｎ，１９５０）。７．４　与近似种的区别除稻干尖线虫外，滑刃线虫属的菊花滑刃线虫（犃．狉犻狋狕犲犿犪犫狅犱狊犻）、草莓滑刃线虫（犃．犳狉犪犵犪狉犻犪犲）和毁芽滑刃线虫（犃．犫犾犪狊狋狅狆犺狋犺狅狉狌狊）也可危害多种植物的叶片或腋芽，易与水稻干尖线虫混淆，其主要形态特征区别见表１。表１　四种滑刃线虫的主要形态学区别滑刃线虫种侧区刻线雌虫体长／μｍ后阴子宫囊雌虫尾部交合刺水稻干尖线虫４条６６０～７５０不超过肛阴距的三分之一圆锥形，末端有１尾尖突，上有３个～４个小尖突喙部中等发达，无顶部，背弓长１８μｍ～２１μｍ菊花滑刃线虫４条７７０～１２００超过肛阴距的二分之一长圆锥形，末端有尾尖突，其上有２个～４个小尖突顶部和喙部不明显，背弓长２０μｍ～２２μｍ草莓滑刃线虫２条４５０～８００超过肛阴距的二分之一长圆锥形，末端为一简单的钝尖，无任何修饰顶部和喙部中等发达，背弓长１４μｍ～１７μｍ毁芽滑刃线虫４条６８０～９００肛阴距的二分之一圆锥形，末端为一简单的锐尖大，顶部和喙部明显，背弓长２８μｍ～３２μｍ８　结果判定以雌虫和雄虫的形态学特征作为该线虫的鉴定依据，符合第７章形态特征和测计值的可鉴定为水稻干尖线虫。９　样品的保存９．１　样品保存样品经登记，经手人签字，妥善保存。如发现水稻干尖线虫，该样品材料要保存在５℃～１０℃及干３犛犖／犜２５０５—２０１０食品伙伴网燥、防鼠防虫处，并标明样品编号、鉴定日期、截获人、寄主名称、运输工具名称等，样品需至少保存３个月，以备复验、谈判和仲裁。９．２　线虫标本的保存若鉴定为水稻干尖线虫，则将剩余的线虫杀死、固定后制成永久玻片保存；也可以固定后放入含４％甲醛液的指形管等长期保存。４犛犖／犜２５０５—２０１０食品伙伴网附　录　犃（资料性附录）水稻干尖线虫的寄主范围、分布、传播途径和危害症状犃．１　水稻干尖线虫的寄主主要寄主是水稻和草莓，也可危害大白菜、菊花、洋葱、大豆、甘蔗、甜玉米、甘薯、山药、麻、印度橡树、木槿属、晚香玉、非洲紫苣苔、黍属、狼尾草属、狗尾草属、鼠尾粟属等农作物和园林观赏植物。犃．２　水稻干尖线虫的传播途径在水稻生产地区，罹病水稻种子是水稻干尖线虫的初侵然源，在田间，农事操作及灌溉水是主要的传播途径。水稻干尖线虫易随水稻种子、混杂的谷壳、其他寄主植物种苗等繁殖材料作远距离传播。５犛犖／犜２５０５—２０１０食品伙伴网附　录　犅（规范性附录）水稻干尖线虫主要形态鉴定特征图　　Ａ———雌虫虫体；Ｂ———雌虫头端；Ｃ———雌虫顶面观；Ｄ———侧区；Ｅ———雌虫中食道球和排泄孔与神经环位置的变化；Ｆ———雌虫中食道球和排泄孔与神经环位置的变化；Ｇ———雄虫前体部；Ｈ———雌虫尾尖突；Ｉ———雄虫尾部；Ｊ———雄虫尾部；Ｋ———雄虫尾部；Ｌ———后阴子宫囊；Ｍ———后阴子宫囊；Ｎ———后阴子宫囊。图犅．１　水稻干尖线虫主要形态鉴定特征图（仿犛犻犱犱犻狇犻，１９７２）６犛犖／犜２５０５—２０１０食品伙伴网书书书０１０２—５０５２犜／犖犛中华人民共和国出入境检验检疫行　业　标　准水稻干尖线虫检疫鉴定方法ＳＮ／Ｔ２５０５—２０１０中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街１６号邮政编码：１０００４５网址ｗｗｗ．ｓｐｃ．ｎｅｔ．ｃｎ电话：６８５２３９４６　６８５１７５４８中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷开本８８０×１２３０１／１６　印张０．７５　字数１１千字２０１０年５月第一版　２０１０年５月第一次印刷印数１—１６００书号：１５５０６６·２２０８１９　定价１６．００元食品伙伴网