snt 2243-2008 流水式鱼类试验 静态鱼类试验

书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖／犜２２４３—２００８流水式鱼类试验　静态鱼类试验犉犾狅狑狋犺狉狅狌犵犺犳犻狊犺狋犲狊狋—犛狋犪狋犻犮犳犻狊犺狋犲狊狋２００８１１１８发布２００９０６０１实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布书书书前　　言　　本标准修改采用联合国经济合作与发展组织（ＯＥＣＤ）化学品测试方法Ｎｏ．３０５Ｄ《静态鱼类试验》（１９９６）。本标准与ＯＥＣＤ化学品测试方法Ｎｏ．３０５Ｄ相比，存在以下差异：———对ＯＥＣＤ化学品测试方法Ｎｏ．３０５Ｄ进行了编辑性修改；———增加了前言部分。本标准附录Ａ为资料性附录。本标准由国家质量监督检验检疫总局提出。本标准由国家认证认可监督管理委员会归口。本标准负责起草单位：中华人民共和国天津出入境检验检疫局。本标准参加起草单位：中化化工标准化研究所、江南大学和天津市检验检疫科学技术研究院。本标准主要起草人：冯智劼、李晶、李学洋、赵好力宝、赵琢、张园。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。Ⅰ犛犖／犜２２４３—２００８流水式鱼类试验　静态鱼类试验１　范围本标准规定了流水式鱼类试验中静态鱼类试验的术语定义、试验方法和数据处理及结果报告。本标准适用于鉴别化学品的生物富集特性，评估鱼类对受试物的富集能力，确定具有低、中等富集特性（ＢＣＦ＜１０３）的受试物的生物富集系数。２　规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。ＧＢ／Ｔ１３２６７　水质　物质对淡水鱼（斑马鱼）急性毒性测定方法３　术语定义下列术语和定义适用于本标准。３．１生物聚集试验物质在器官（特别在组织中）浓度的增加和物质在环境中的浓度有关。３．２生物富积系数（犅犆犉）在稳定状态下，试验鱼体内受试物浓度与试验水体中该物质浓度的比率。３．３辛醇水分配系数（犘狅狑）平衡时正辛醇在水中的溶解比率。水生生物体的生物聚集潜力用Ｐｏｗ的对数来标记。３．４吸收率常数（犓１）鱼暴露于测定物质中时鱼中的测定物质的浓度的增长速率的数字表达（单位：天－１）。３．５释放率常数（犓２）将鱼从含有测定物质的环境中转移至不含测定物质的环境中后鱼中的测定物质的浓度的减小速率的数字表达（单位：天－１）。３．６释放阶段是将鱼从含有测定物质的环境中转移至不含测定物质的环境中后，对外释放测定物质的阶段。４　试验仪器及溶液４．１　试验仪器试验中要避免使用任何部分会被溶解、吸收，或对鱼有不利作用的仪器。可以用矩形或圆柱形的用化学惰性材料制得的仪器，要有一定的容积和装载率。软塑料管的使用要减小到最小。可以用聚四氟１犛犖／犜２２４３—２００８乙烯（ＴｅｆＬｏｎ）、不锈钢或玻璃管。主要试验仪器包括：———试验容器：可容纳２５Ｌ试验液的全玻璃水族箱；———控温箱或控温室：控制试验温度在２３℃±２℃；———ｐＨ计；———溶解氧测定仪。４．２　水———在试验中使用的天然水应是无污染且取自相同的来源的水。稀释的水应要使被选用进行试验的鱼存活并且不出现不正常的现象和行为。应先验证鱼在这种水中可以生存、生长、繁殖。海水和淡水中各种参数的最高限量参见附录Ａ；———在试验的过程中水应该有恒定的性质。ｐＨ值应该在６．０到８．５之间，但是给定条件的试验中应该变化在上下０．５ｐＨ之内。为了保证稀释水不会不恰当的影响试验结果，或者对参照的鱼有不利的影响，样品应该被隔离分析。要测定重金属含量（铜、铅、锌、汞）主要的阳离子和阴离子（Ｃａ、Ｍｇ、Ｎａ、Ｋ、Ｃｌ、ＳＯ４），农药（总的有机含磷量和总的有机含氯量）总的有机含碳量和悬浮固体。水的相对质量每三个月要测量一次，如果水的质量在１年内保持不变，检测的频率和时间就可以适当放宽（６个月一次）；———水的自然粒子常数总的有机含碳量应该越小越好，最大值可允许为５ｍｇ／Ｌ。对于特殊的材料（干物质直径最小要大于０．４５μｍ）总的有机含碳量要小于２ｍｇ／Ｌ。如果需要，水在使用前还应该先过滤。鱼和食物残渣造成的水中有机碳含量应该减小到越小越好。整个试验过程中容器中水中有机含碳量不要超过试验开始时测定物质的有机碳含量，如果超过，可以用溶解药剂。４．３　试验溶剂———先制得适当测定物质浓度的试验溶剂。试验溶剂应该只是将稀释水和测定物质搅动混合。不应使用溶剂或分散剂。测定物质应该用放射性标记，且应用最高的纯度（纯度＞９８％）；———在试验中应有一个持续分配和稀释测定物质的储存溶液。每天每个测试通道至少改变５次量。应该选择流动的模式，但确定性标准满足的话半静止模式也是可以的。每天的前后４８ｈ应对储存溶剂和稀释水进行测定，试验结果相差应该保持在２０％以内。５　试验方法５．１　试验动物———选用全年都可以得到的试验鱼类，健康和无外观畸形。推荐斑马鱼（Ｂｒａｃｈｙｄａｎｉｏｒｅｒｉｏ），一般重５０ｍｇ～５００ｍｇ，试验用鱼规格应大致相同；———在试验过程中用足够的食物和一样的环境以及试验的温度使储存的鱼适应试验的环境。５．２　选择动物的标准按照ＧＢ／Ｔ１３２６７选择动物。５．３　试验条件５．３．１　温度２３℃±２℃或适用于选用鱼种的其他温度。５．３．２　水质ｐＨ７．８±０．２，硬度１００ｍｇ／Ｌ（以ＣａＣＯ３计）。试验期间，试验液中溶解氧含量应大于等于５ｍｇ／Ｌ，若低于此值，用压缩空气充气，补充溶解氧。５．３．３　试验周期试验周期最多８ｄ。２犛犖／犜２２４３—２００８５．４　剂量与分组试验应设两种浓度，两种浓度至少相差３．２倍，最好为１０倍，试验浓度不应对鱼有副作用，可在试验鱼９６ｈＴＬｍ的１／１００至１／１０００之间选择浓度范围。试验浓度不应大于受试物在水中的溶解度。每两水箱为一浓度组，其中一水箱不放入试验鱼，作为化学对照，另一水箱随机放入２０尾试验鱼。５．５　试验步骤———试验开始时和试验进行６ｈ、２４ｈ、４８ｈ、９６ｈ、１４４ｈ、１９２ｈ及１９２ｈ后（试验结束时），采集各试验箱中水样，分析受试物含量。受试物分析，应在取样后４８ｈ内进行；———第２天、４天、６天，取完样后，用干鱼食喂鱼；———至少每天测定一次各水箱的含氧量，试验结束时，测定各水箱的ｐＨ值；———１９２ｈ后，在各处理水箱取鱼样，每一样品为１０尾鱼，快速测量每尾鱼的湿重，１０尾鱼放入一小玻璃容器或其他无污染容器中，匀浆，冻存；———试验结束时，测量对照鱼的平均湿重和脂含量。６　数据处理与结果报告６．１　试验结果处理６．１．１　受试物含量曲线试验液中受试物含量对时间作图，每一浓度可作出两条曲线，分别为有鱼水箱和无鱼水箱受试物时间变化图。６．１．２　计算计算两种水箱中受试物的损失量和鱼对受试物的吸收量。估算在试验周期内，鱼体中受试物含量是否恒定，若已达到平衡，有鱼的试验水箱中，犆Ｗ对时间的曲线应平行于时间轴。如果到达平衡，计算犅犆犉，犅犆犉＝犆ｆ，ｓ／犆ｗ，ｓ如果未到达平衡，计算犅犆犉８天，犅犆犉８天＝犆ｆ，８天／犆ｗ，８天６．２　试验结果的解释———尽可能把试验结果与受试物的理化特性加以比较；———应说明已得到的有关受试物生物富集行为资料是否充分，精确测定生物富集系数是否需要进行其他试验。６．３　试验结果报告试验结果报告应含有下列信息：６．３．１　测定物质———物理性质和相关的物化性质；———化学特征数据（如果可以应包括有机含碳量）；———如果使用放射性标记，被标记的放射性原子的精确位置和放射性物质和其他组分各占的百分数。６．３．２　试验鱼种类学名、品系、来源、适应性、年龄、尺寸范围等。６．３．３　试验条件———使用试验方法（如流动法或半静止法）；———光源的类型、性质、光周期；———测定设计（如：数量、测定容器的大小、换水速率、平行试验组数、每个试验中的鱼的数目、测定浓度、聚集阶段时间、鱼和水的采样频率）；———储备液的准备和更新方法（如用溶解药剂，应记录它们的浓度和有机碳含量）；———测定物质的浓度，测定平均值和它们的标准偏差以及获得数据的方法；———稀释水的来源，预处理的描述，鱼在水中存活的现象，水的性质，ｐＨ，硬度，温度，溶解氧的浓３犛犖／犜２２４３—２００８度，残余氯水平，总的有机碳含量，悬浮物，以及测量与试验结果；———测量容器中水的量，ｐＨ，硬度，ＴＯＣ，温度，溶解氧的浓度；———喂养鱼的细节（例：食物种类、来源、组成———至少是脂类和蛋白质，喂养的量和频率）；———鱼和水样的处理信息，包括准备的细节、存储、萃取、分析过程、脂含量。４犛犖／犜２２４３—２００８附　录　犃（资料性附录）有效稀释水溶液的化学特性表犃．１　有效稀释水溶液的化学特性序　　号试　　样极限浓度１颗粒物质５ｍｇ／Ｌ２有机碳总量２ｍｇ／Ｌ３未离子化的氨１μｇ／Ｌ４残余的氯１０μｇ／Ｌ５有机磷农药总量５０ｎｇ／Ｌ６有机氯农药总量和多氯联苯５０ｎｇ／Ｌ７有机氯总量２５ｎｇ／Ｌ８铝１μｇ／Ｌ９砷１μｇ／Ｌ１０铬１μｇ／Ｌ１１钴１μｇ／Ｌ１２铜１μｇ／Ｌ１３铁１μｇ／Ｌ１４铅１μｇ／Ｌ１５镍１μｇ／Ｌ１６锌１μｇ／Ｌ１７镉１００ｎｇ／Ｌ１８汞１００ｎｇ／Ｌ１９银１００ｎｇ／Ｌ５犛犖／犜２２４３—２００８