SNT 2114-2008 进出口水果和蔬菜中阿维菌素残留量检测方法 液相色谱法

书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖／犜２１１４—２００８进出口水果和蔬菜中阿维菌素残留量检测方法　液相色谱法犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犪犫犪犿犲犮狋犻狀狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀犳狉狌犻狋犪狀犱狏犲犵犲狋犪犫犾犲犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋—犔犆犿犲狋犺狅犱２００８０９０４发布２００９０３１６实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布书书书前　　言　　本标准的附录Ａ、附录Ｂ为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准由中华人民共和国山东出入境检验检疫局负责起草。本标准起草人：李立、李金强、李佩暖。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。Ⅰ犛犖／犜２１１４—２００８进出口水果和蔬菜中阿维菌素残留量检测方法　液相色谱法１　范围本标准规定了水果及蔬菜中阿维菌素检测的制样和液相色谱检测方法。本标准适用于苹果及菠菜中阿维菌素残留量的检测。其他水果和蔬菜可以参照本标准。２　试样制备与保存２．１　试样制备将所取样品缩分出１ｋｇ，取可食部分，经组织捣碎机捣碎，均分为两份，装入洁净容器内，作为试样密封并标明标记。２．２　试样保存将试样于－１８℃以下保存。在抽样和制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。３　方法提要试样中的阿维菌素用丙酮提取，经浓缩后，用ＳＰＥＣ１８柱净化，并用甲醇洗脱。洗脱液经浓缩、定容、过滤后，用配有紫外检测器的高效液相色谱测定，外标法定量。４　试剂和材料除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为去离子水。４．１　丙酮。４．２　甲醇：色谱纯。４．３　阿维菌素标准品：纯度≥９６．０％。４．４　阿维菌素标准储备液：称取０．１ｇ（准确至０．０００２ｇ）阿维菌素标准品于１００ｍＬ容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度。配制成浓度为１．０ｍｇ／ｍＬ的标准储备液。４．５　阿维菌素标准工作液：根据需要移取适量的阿维菌素标准储备液，用甲醇稀释成适当浓度的标准工作液。标准工作液需每周配制一次。５　仪器和设备５．１　高效液相色谱仪：配有紫外检测器。５．２　组织捣碎机。５．３　振荡器。５．４　旋转蒸发器。５．５　固相萃取柱：ＳＰＥＣ１８　规格：６０ｍｇ／３ｍＬ；使用前用５ｍＬ甲醇和５ｍＬ水活化。６　测定步骤６．１　提取称取试样约２０ｇ（精确至０．１ｇ）于１００ｍＬ具塞锥形瓶中，加入５０ｍＬ丙酮，于振荡器上振荡０．５ｈ１犛犖／犜２１１４—２００８用布氏漏斗抽滤，用２０ｍＬ×２丙酮洗涤锥形瓶及残渣。合并丙酮提取液，于４０℃水浴旋转蒸发至约２ｍＬ。　６．２　净化将上述的浓缩提取液完全转入ＳＰＥＣ１８柱，再用５ｍＬ水淋洗，去掉淋洗液。最后用５ｍＬ甲醇洗脱，收集洗脱液，用氮气吹至近干。准确加入１．０ｍＬ甲醇溶解残渣，用０．４５μｍ滤膜过滤，滤液供液相色谱测定。外标法定量。６．３　测定６．３．１　高效液相色谱条件：ａ）　色谱柱：ＯＤＳＣ１８反相柱，４．６ｍｍ×１２５ｍｍ；ｂ）　流动相：甲醇∶水（９０＋１０）；ｃ）　流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ；ｄ）　检测波长：２４５ｎｍ；ｅ）　柱温：４０℃；ｆ）　进样量：２０μＬ。６．３．２　色谱测定根据样液中阿维菌素含量情况，选定峰高相近的标准工作液，标准工作液和样液中阿维菌素响应值均应在仪器检测线性范围内，标准工作液和样液等体积参插进样。在上述色谱条件下，阿维菌素保留时间约为５．３ｍｉｎ。标准色谱图参见附录Ａ，标准品紫外光谱图参见附录Ｂ。６．４　空白试验除不加试样外，均按照上述测定步骤进行。７　结果计算与表述用色谱数据处理机，或按式（１）计算试样中阿维菌素残留量，计算结果需扣除空白值：犡＝犺·犮·犞犺ｓ·犿……………………………（１）式中：犡———试样中阿维菌素残留量，单位为毫克每千克（ｍｇ／ｋｇ）；犺———样液中阿维菌素峰高，单位为毫米（ｍｍ）；犺ｓ———标准工作液中阿维菌素峰高，单位为毫米（ｍｍ）；犮———标准工作液中阿维菌素浓度，单位为毫克每升（ｍｇ／Ｌ）；犞———样液最终定容体积，单位为毫升（ｍＬ）；犿———最终样液代表的试样量，单位为克（ｇ）。８　测定低限和回收率８．１　测定低限本方法的测定低限为０．０１ｍｇ／ｋｇ。８．２　回收率苹果样品中添加阿维菌素的浓度和回收率的实验数据：———在０．０１ｍｇ／ｋｇ时，回收率为８２．５％；———在０．０５ｍｇ／ｋｇ时，回收率为８７．５％；２犛犖／犜２１１４—２００８———在０．５０ｍｇ／ｋｇ时，回收率为９５．０％。菠菜中添加阿维菌素的浓度和回收率的实验数据：———在０．０１ｍｇ／ｋｇ时，回收率为８３．０％；———在０．０５ｍｇ／ｋｇ时，回收率为８９．０％；———在０．５０ｍｇ／ｋｇ时，回收率为９７．０％。３犛犖／犜２１１４—２００８附　录　犃（资料性附录）阿维菌素标准品液相色谱图图犃．１　阿维菌素标准品液相色谱图附　录　犅（资料性附录）阿维菌素标准品紫外吸收光谱图图犅．１　阿维菌素标准紫外吸收光谱图４犛犖／犜２１１４—２００８犉狅狉犲狑狅狉犱犃狀狀犲狓犃，犃狀狀犲狓犅狅犳狋犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犪狉犲犻狀犳狅狉犿犪狋犻狏犲犪狀狀犲狓犲狊．犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狑犪狊狆狉狅狆狅狊犲犱犫狔犪狀犱犻狊狌狀犱犲狉狋犺犲犮犺犪狉犵犲狅犳狋犺犲犆犲狉狋犻犳犻犮犪狋犻狅狀犪狀犱犃犮犮狉犲犱犻狋犪狋犻狅狀狅犳狋犺犲狆犲狅狆犾犲’狊犚犲狆狌犫犾犻犮狅犳犆犺犻狀犪．犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狑犪狊犱狉犪犳狋犲犱犫狔犛犺犪狀犱狅狀犵犈狀狋犲狔犈狓犻狋犐狀狊狆犲犮狋犻狅狀犪狀犱犙狌犪狉犪狀狋犻狀犲犅狌狉犲犪狌狅犳狋犺犲狆犲狅狆犾犲’狊犚犲狆狌犫犾犻犮狅犳犆犺犻狀犪．犜犺犲犿犪犻狀犱狉犪犳狋犲狉狊狅犳狋犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犪狉犲犔犻犔犻，犔犻犼犻狀犙犻犪狀犵，犔犻狆犲犻狀狌犪狀．犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犻狊犪狆狉狅犳犲狊狊犻狅狀犪犾狊狋犪狀犱犪狉犱犳狅狉犻狀狊狆犲犮狋犻狅狀犪狀犱狇狌犪狉犪狀狋犻狀犲狆狉狅犿狌犾犵犪狋犲犱犳狅狉狋犺犲犳犻狉狊狋狋犻犿犲．５犛犖／犜２１１４—２００８犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犪犫犪犿犲犮狋犻狀狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀犳狉狌犻狋犪狀犱狏犲犵犲狋犪犫犾犲犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋—犔犆犿犲狋犺狅犱１　犛犮狅狆犲犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狊狆犲犮犻犳犻犲狊狋犺犲犿犲狋犺狅犱狊狅犳狊犪犿狆犾犲狆狉犲狆犪狉犪狋犻狅狀犪狀犱犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犪犫犪犿犲犮狋犻狀狉犲狊犻犱狌犲狊犫狔犺犻犵犺犘犲狉犳狅狉犿犪狀犮犲犾犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔犻狀犳狉狌犻狋犪狀犱狏犲犵犲狋犪犫犾犲．犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犻狊犪狆狆犾犻犮犪犫犾犲狋狅犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犪犫犪犿犲犮狋犻狀狉犲狊犻犱狌犮犲犻狀犪狆狆犾犲犪狀犱狊狆犻狀犪犮犺．２　犛犪犿狆犾犲狆狉犲狆犪狉犪狋犻狅狀犪狀犱狊狋狅狉犪犵犲２．１　犘狉犲狆犪狉犪狋犻狅狀狅犳狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲犜犺犲犮狅犿犫犻狀犲犱狆狉犻犿犪狉狔狊犪狀狆犾犲犻狊狉犲犱狌犮犲犱狋狅１犽犵，狋犺犲犲犱犻犫犾犲狆狅狉狋犻狅狀狊犪狉犲犫犾犲狀犱犲犱犻狀犪犫犾犲狀犱犲狉，犪狀犱狋犺犲狀犱犻狏犻犱犲犱犻狀狋狅狋狑狅犲狇狌犪犾狆狅狉狋犻狅狀狊．犈犪犮犺狆狅狉狋犻狅狀犻狊狆犾犪犮犲犱犻狀犪犮犾犲犪狀犮狅狀狋犪犻狀犲狉犪狊狋犺犲狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲，狑犺犻犮犺犻狊狋犺犲狀狊犲犪犾犲犱犪狀犱犾犪犫犲犾犲犱．２．２　犛狋狅狉犪犵犲狅犳狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲犜犺犲狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲狊犺狅狌犾犱犫犲狊狋狅狉犲犱犫犲犾狅狑－１８℃．犐狀狋犺犲犮狅狌狉狊犲狅犳狊犪犿狆犾犻狀犵犪狀犱狊犪犿狆犾犲狆狉犲狆犪狉犪狋犻狅狀，狆狉犲犮犪狌狋犻狅狀狊狊犺犪犾犾犫犲狋犪犽犲狀狋狅犪狏狅犻犱犮狅狀狋犪犿犻狀犪狋犻狅狀狅狉犪狀狔犳犪犮狋狅狉狊狑犺犻犮犺犿犪狔犮犪狌狊犲狋犺犲犮犺犪狀犵犲狅犳狉犲狊犻犱狌犲犮狅狀狋犲狀狋．３　犘狉犻狀犮犻狆犾犲犜犺犲犪犫犪犿犲犮狋犻狀狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀狋犺犲狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲犪狉犲犲狓狋狉犪犮狋犲犱犫狔犪犮犲狋狅狀犲，犪狀犱狋犺犲狀犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犲犱犪狀犱犮犾犲犪狀犲犱狌狆犫狔狊狅犾犻犱狆犺犪狊犲犲狓狋狉犪犮狋犻狅狀犆１８犮犪狉狋狉犻犱犵犲．犈犾狌狋犲狑犻狋犺犿犲狋犺犪狀狅犾，犪狀犱狋犺犲犲犾狌犪狋犲犻狊犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犲犱，犿犪犱犲狌狆狋狅狏狅犾狌犿犲，犪狀犱犳犻犾狋犲狉犲犱．犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀犻狊犿犪犱犲犫狔犺犻犵犺狆犲狉犳狅狉犿犪狀犮犲犾犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔犲狇狌犻狆狆犲犱狑犻狋犺犝犞犱犲狋犲犮狋狅狉，狌狊犻狀犵犲狓狋犲狉狀犪犾狊狋犪狀犱犪狉犱犿犲狋犺狅犱．４　犚犲犪犵犲狀狋狊犪狀犱犿犪狋犲狉犻犪犾狊犝狀犾犲狊狊狅狋犺犲狉狑犻狊犲狊狆犲犮犻犳犻犲犱，狋犺犲狉犲犪犵犲狀狋狊狊犺狅狌犾犱犫犲犪狀犪犾狔狋犻犮犪犾犾狔狆狌狉犲，“狑犪狋犲狉”犻狊犱犻狊狋犻犾犾犲犱狑犪狋犲狉．６犛犖／犜２１１４—２００８４．１　犃犮犲狋狅狀犲．４．２　犕犲狋犺犪狀狅犾：犎犘犔犆犵狉犪犱犲．４．３　犃犫犪犿犲犮狋犻狀狊狋犪狀犱犪狉犱：犘狌狉犻狋狔≥９６．０％．４．４　犃犫犪犿犲犮狋犻狀狊狋犪狀犱犪狉犱狊狋狅犮犽狊狅犾狌狋犻狅狀：犠犲犻犵犺０．１犵（犪犮犮狌狉犪狋犲狋狅０．０００２犵）狅犳犪犫犪犿犲犮狋犻狀狊狋犪狀犱犪狉犱犻狀狋狅犪１００犿犔狏狅犾狌犿犲狋狉犻犮犳犾犪狊犽，犱犻狊狊狅犾狏犲狑犻狋犺犿犲狋犺犪狀狅犾，犿犻狓狋犺狉狅狌犵犺犾狔．犜犺犲犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀狅犳狋犺犲狊狋犪狀犱犪狉犱狊狋狅犮犽狊狅犾狌狋犻狅狀犻狊１．０犿犵／犿犔．４．５　犃犫犪犿犲犮狋犻狀狊狋犪狀犱犪狉犱狑狅狉犽犻狀犵狊狅犾狌狋犻狅狀：犃犮犮狅狉犱犻狀犵狋狅狋犺犲狉犲狇狌犻狉犲犿犲狀狋狆狉犲狆犪狉犲狊狋犪狀犱犪狉犱狑狅狉犽犻狀犵狊狅犾狌狋犻狅狀狅犳犪狆狆狉狅狆狉犻犪狋犲犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀犫狔犱犻犾狌狋犻狀犵狋犺犲狊狋犪狀犱犪狉犱狊狋狅犮犽狊狅犾狌狋犻狅狀狑犻狋犺犿犲狋犺犪狀狅犾．犘狉犲狆犪狉犲狋犺犲狊狋犪狀犱犪狉犱狑狅狉犽犻狀犵狊狅犾狌狋犻狅狀犳犾犲狊犺犾狔犲狏犲狉狔狑犲犲犽．５　犃狆狆犪狉犪狋狌狊犪狀犱犲狇狌犻狆犿犲狀狋５．１　犎犻犵犺狆犲狉犳狅狉犿犪狀犮犲犾犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺，犲狇狌犻狆狆犲犱狑犻狋犺犝犞犱犲狋犲犮狋狅狉．５．２　犎犻犵犺狊狆犲犲犱犫犾犲狀犱犲狉．５．３　犛犺犪犽犲狉．５．４　犚狅狋犪狉狔犲狏犪狆狅狉犪狋狅狉．５．５　犆犾犲犪狀狌狆犮狅犾狌犿狀：犛犘犈犆１８犮犪狉狋狉犻犱犵犲，６０犿犵／３犿犔犪犮狋犻狏犪狋犲犱狑犻狋犺５犿犔狅犳犿犲狋犺犪狀狅犾犪狀犱狉犻狀狊犲犱狑犻狋犺５犿犔狅犳狑犪狋犲狉．６　犘狉狅犮犲犱狌狉犲６．１　犈狓狋狉犪犮狋犻狅狀犠犲犻犵犺狋犮犪２０犵（犪犮犮狌狉犪狋犲狋狅０．１犵）犻狀狋狅犪１００犿犔犮狅狀犻犮犪犾犳犾犪狊犽狑犻狋犺狊狋狅狆狆犲狉，犪犱犱５０犿犔狅犳犪犮犲狋狅狀犲，狊犺犪犽犲犳狅狉０．５犺狑犻狋犺狊犺犪犽犲狉，狋犺犲犲狓狋狉犪犮狋犻狊犳犻犾狋犲狉犲犱犫狔狊狌犮狋犻狅狀狋犺狉狅狌犵犺犪犫狌犮犺狀犲狉犳狌狀狀犲犾，狑犪狊犺狋犺犲狉犲狊犻犱狌犲犪狀犱狋犺犲犳犾犪狊犽狑犻狋犺２×２０犿犔犪犮犲狋狅狀犲，犮狅犿犫犻狀犲犪犮犲狋狅狀犲犪狀犱犲狏犪狆狅狉犪狋犲犱狋狅犮犪２犿犔狑犻狋犺狉狅狋犪狉狔犲狏犪狆狅狉犪狋狅狉狌狀犱犲狉４０℃．６．２　犆犾犲犪狀狌狆犜狉犪狀狊犳犲狉狋犺犲犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犲犱犲狓狋狉犪犮狋犻狀狋狅犪犛犘犈犆１８犮犪狉狋狉犻犱犵犲，狋犺犲犲犳犳犾狌犲狀狋犻狊犱犻狊犮犪狉犱犲犱犪狀犱狉犻狀狊犻狀犵狑犻狋犺５犿犔狅犳狑犪狋犲狉．犜犺犲狀犲犾狌狋犲狑犻狋犺５犿犔狅犳犿犲狋犺犪狀狅犾，犮狅犾犾犲犮狋狋犺犲犲犾狌犪狋犲犪狀犱狀犲犪狉犾狔狋狅犱狉狔狀犲狊狊狑犻狋犺犪狊狋狉犲犪犿狅犳狀犻狋狉狅犵犲狀．犕犪犽犲狌狆狋狅１．０犿犔狑犻狋犺犿犲狋犺犪狀狅犾．犉犻犾狋犲狉狋犺犲狊狅犾狌狋犻狅狀狑犻狋犺狋犺犲犳犻犾狋犲狉犿犲犿犫狉犪狀犲狅犳７犛犖／犜２１１４—２００８０．４５μ犿．犜犺犲犳犻犾狋狉犪狋犲犻狊狌狊犲犱犳狅狉犎犘犔犆犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀．６．３　犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀６．３．１