SNT 0348.1-2010 进出口茶叶中三氯杀螨醇残留量检测方法

书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖／犜０３４８．１—２０１０代替ＳＮ／Ｔ０３４８．１—１９９５进出口茶叶中三氯杀螨醇残留量检测方法犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犱犻犮狅犳狅犾狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀狋犲犪犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋２０１０１１０１发布２０１１０５０１实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布书书书前　　言　　ＳＮ／Ｔ０３４８分两个部分：———进出口茶叶中三氯杀螨醇残留量检测方法；———出口茶叶中三氯杀螨醇残留量检验方法　液相色谱法。本部分为ＳＮ／Ｔ０３４８的第１部分。本部分按照ＧＢ／Ｔ１．１—２００９给出的规则起草。本部分代替ＳＮ／Ｔ０３４８．１—１９９５《出口茶叶中三氯杀螨醇残留量检验方法气相色谱法》。本部分与ＳＮ／Ｔ０３４８．１—１９９５相比，主要技术变化如下：———修改了样品前处理方法。———增加对阳性样品的气相色谱质谱确证实验。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分起草单位：中华人民共和国安徽出入境检验检疫局。本部分主要起草人：朱梦栩、盛旋、胡艳云、郑屏、张萍、王勇、孙明凡。本部分所代替标准历次版本发布情况为：———ＳＮ／Ｔ０３４８．１—１９９５。Ⅰ犛犖／犜０３４８．１—２０１０进出口茶叶中三氯杀螨醇残留量检测方法１　范围ＳＮ／Ｔ０３４８的本部分规定了进出口茶叶中三氯杀螨醇残留量的检测方法。本部分适用于进出口茶叶中三氯杀螨醇残留量的测定和确证。２　规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。ＧＢ／Ｔ６６８２　分析实验室用水规格和试验方法３　原理用丙酮正己烷混合溶液提取茶叶中的三氯杀螨醇，经石墨化碳黑、中性氧化铝柱净化，氢氧化钾溶液进行碱解，转化为４，４′二氯二苯甲酮（ＤＢＰ），用配有电子俘获检测器的气相色谱仪进行测定，气相色谱质谱确证，内标法定量。４　试剂和材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为ＧＢ／Ｔ６６８２规定的一级水。４．１　丙酮：色谱级。４．２　正己烷：色谱级。４．３　无水乙醇：优级纯。４．４　无水硫酸钠：６５０℃灼烧４ｈ，储于干燥器中备用。４．５　氢氧化钾。４．６　丙酮正己烷（１＋４）混合溶液：量取５０ｍＬ丙酮与２００ｍＬ正己烷混合。４．７　氢氧化钾溶液（１０ｍｏｌ／Ｌ）：称取５６．１ｇ氢氧化钾，溶于１００ｍＬ蒸馏水中。４．８　硫酸钠溶液（２０ｇ／Ｌ）：２０ｇ无水硫酸钠（３．４）溶于１０００ｍＬ蒸馏水中。４．９　石墨化碳黑固相萃取柱：５００ｍｇ，３ｍＬ，或相当者。４．１０　中性氧化铝固相萃取柱：５００ｍｇ，３ｍＬ，或相当者。４．１１　三氯杀螨醇标准品（Ｄｉｃｏｆｏｌ，Ｃ１４Ｈ９Ｃ１５Ｏ，ＣＡＳ编号：１１５３２２）：纯度≥９６．２％。４．１２　内标物标准品：艾氏剂（Ａｌｄｒｉｎ，Ｃ１２Ｈ８Ｃ１６，ＣＡＳ编号：３０９００２），纯度≥９９％。４．１３　三氯杀螨醇标准溶液：准确称取适量的三氯杀螨醇标准品（精确至０．１ｍｇ），用正己烷配制成浓度为１００ｍｇ／Ｌ的标准储备液。根据需要再配制成适用浓度的标准工作液。４．１４　内标物标准溶液：准确称取适量的艾氏剂标准品（精确至０．１ｍｇ），用正己烷配制成浓度为１００ｍｇ／Ｌ的内标物标准储备液，根据需要再配制成适用浓度的内标物标准工作液。１犛犖／犜０３４８．１—２０１０５　仪器和设备５．１　气相色谱仪：配有电子俘获检测器（ＥＣＤ）。５．２　气相色谱质谱联用仪：配有电子轰击离子源（ＥＩ）。５．３　粉碎机。５．４　分析天平：感量０．０１ｇ。５．５　分析天平：感量０．０００１ｇ。５．６　均质器。５．７　离心机：转速３０００ｒ／ｍｉｎ以上。５．８　涡旋混匀器。５．９　氮吹仪。５．１０　固相萃取装置，带真空泵。６　试样的制备将样品缩分至１０００ｇ，用粉碎机全部粉碎，混匀，均匀分成两份作为试样，装入洁净容器内，密封，标明标记。试样置于－１８℃冰箱中保存。在抽样及制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。７　测定步骤７．１　提取称取试样１０ｇ（精确至０．０１ｇ）于１００ｍＬ具塞离心管中，加丙酮正己烷混合溶液（４．６）４０ｍＬ，高速均质提取５ｍｉｎ，将离心管置于离心机内以３０００ｒ／ｍｉｎ的速度离心５ｍｉｎ，将上清液转移至１００ｍＬ容量瓶中，在离心管中加入４０ｍＬ丙酮正己烷混合溶液（４．６），重复上述操作，清液合并转入于容量瓶中，以丙酮正己烷混合溶液准确定容至１００ｍＬ。准确吸取１０ｍＬ提取液于试管中，然后于４０℃氮气流下浓缩至约１ｍＬ，待净化。７．２　净化将石墨化碳黑小柱和中性氧化铝小柱自上而下安装在固相萃取装置上，中性氧化铝固相萃取柱内填充约１０ｍｍ高无水硫酸钠层。使用前，依次以３ｍＬ正己烷、３ｍＬ丙酮、３ｍＬ丙酮正己烷混合溶液（４．６）对净化柱进行预淋洗。将浓缩液（７．１）转移至净化柱中，用９ｍＬ丙酮正己烷混合溶液（４．６）分三次洗涤试管并倾入柱中，控制流速不超过３ｍＬ／ｍｉｎ，收集全部流出液于１０ｍＬ玻璃试管中，４０℃氮气流下浓缩至近干。７．３　碱解在上述试管中依次加入１ｍＬ内标物标准工作液，０．５ｍＬ无水乙醇和１ｍＬ的氢氧化钾溶液（４．７），涡旋混匀５ｍｉｎ，在３０００ｒ／ｍｉｎ下离心５ｍｉｎ。移取正己烷相于一离心管中，用１ｍＬ硫酸钠溶液（４．８）洗涤两次，弃去水相。在正己烷相中加入约０．５ｇ无水硫酸钠脱水，取上层清液供气相色谱和气相色谱质谱测定。２犛犖／犜０３４８．１—２０１０７．４　标准物碱解取适量浓度的标准工作液，于４０℃下氮气吹干，按照７．３的步骤进行碱解。７．５　测定７．５．１　气相色谱测定参考条件７．５．１．１　色谱柱：ＤＢ１７０１石英毛细管柱，３０ｍ×０．５３ｍｍ（内径），膜厚１．０μｍ，或相当者。７．５．１．２　色谱柱温度：７０℃（１ｍｉｎ）１０℃／ｍｉｎ２４０℃（２０ｍｉｎ）。７．５．１．３　进样口温度：２７０℃。７．５．１．４　检测器温度：３００℃。７．５．１．５　载气：氮气，纯度≥９９．９９９％，流速１５ｍＬ／ｍｉｎ。７．５．１．６　尾吹气：氮气，纯度≥９９．９９９％，流速６０ｍＬ／ｍｉｎ。７．５．１．７　进样方式：不分流进样；０．７５ｍｉｎ后开阀。７．５．１．８　进样量：１．０μＬ。７．５．２　气相色谱质谱测定参考条件７．５．２．１　色谱柱：ＤＢ５ＭＳ石英毛细管柱，３０ｍ×０．２５ｍｍ（内径），膜厚０．２５μｍ，或相当者。７．５．２．２　色谱柱温度：７０℃（１ｍｉｎ）１０℃／ｍｉｎ２４０℃（２０ｍｉｎ）。７．５．２．３　进样口温度：２７０℃。７．５．２．４　气相色谱质谱接口温度：２８０℃。７．５．２．５　载气：氦气，纯度≥９９．９９９％，流速１．０ｍＬ／ｍｉｎ。７．５．２．６　进样方式：不分流进样，１ｍｉｎ后开阀。７．５．２．７　进样量：１．０μＬ。７．５．２．８　电离方式：ＥＩ。７．５．２．９　电离能量：７０ｅＶ。７．５．２．１０　测定方式：选择离子监测方式（ＳＩＭ）。７．５．２．１１　艾氏剂监测离子（ｍ／ｚ）：２６３，２６５，２９３；定量离子：２６３。７．５．２．１２　三氯杀螨醇（碱解产物ＤＢＰ）监测离子（ｍ／ｚ）：１３９，１１１，１４１，２５０；定量离子：１３９。７．５．２．１３　溶剂延迟：１０ｍｉｎ。７．５．３　气相色谱测定按照确定的气相色谱条件测定样品和标准工作溶液。以三氯杀螨醇碱解产物ＤＢＰ和内标物艾氏剂的峰面积比为纵坐标，以三氯杀螨醇和艾氏剂的浓度比为横坐标绘制标准工作曲线。以标准曲线对样液进行定量，样液中三氯杀螨醇的碱解产物（ＤＢＰ）的响应值应在仪器检测的线性范围内，如果残留量超出标准曲线范围，应对提取液进行适当稀释。标准工作溶液和样液等体积穿插进样测定，保留时间定性。在７．５．１给定的色谱条件下，艾氏剂和ＤＢＰ的保留时间分别为１５．４ｍｉｎ和１６．５ｍｉｎ。标准品的色谱图参见附录Ａ中图Ａ．１。７．５．４　气相色谱质谱检测及确证对标准工作溶液及样液按７．５．２规定的条件进行测定，如样品中待测物质和内标物的保留时间之比，也就是相对保留时间，与标准工作溶液中对应的相对保留时间相一致，并且在扣除背景后的样品谱图中均出现；同时将样品谱图中各组分定性离子的相对丰度与浓度接近的标准工作溶液谱图中对应的３犛犖／犜０３４８．１—２０１０定性离子的相对丰度进行比较，若偏差不超过表１规定的范围，则可判定为样品中存在对应的待测物。在７．５．２条件下，内标物艾氏剂和三氯杀螨醇分解产物ＤＢＰ的保留时间分别是１７．２ｍｉｎ和１７．５ｍｉｎ。如果不能确证，应重新进样，以扫描方式（有足够灵敏度）或采用增加其他确证离子的方式来确证。根据定量离子ｍ／ｚ１３９对其进行内标法定量。艾氏剂和ＤＢＰ的气相色谱质谱选择离子色谱图和全扫描质谱图参见附录Ｂ中图Ｂ．１和图Ｂ．２。表１　使用气相色谱质谱定性时相对离子丰度最大允许偏差相对丰度／％＞５０＞２０～５０＞１０～２０≤１０允许的相对偏差／％±１０±１５±２０±５０７．５．５　空白试验除不加试样外，均按上述步骤进行。７．５．６　结果计算试样中三氯杀螨醇残留量按式（１）计算：犡＝犃×犮ｓ×犃ｓ犻×犮犻犃ｓ×犮ｓ犻×犃犻×犞犿…………………………（１）　　式中：犡———试样中三氯杀螨醇残留量，单位为毫克每千克（ｍｇ／ｋｇ）；犃———样液中ＤＢＰ的峰面积（或峰高）；犮ｓ———标准工作液中三氯杀螨醇浓度，单位微克每毫升（μｇ／ｍＬ）；犃ｓ犻———标准工作溶液中内标物的峰面积（或峰高）；犮犻———样液中内标物浓度，单位微克每毫升（μｇ／ｍＬ）；犃ｓ———标准工作溶液中ＤＢＰ的峰面积（或峰高）；犮ｓ犻———标准工作液中内标物浓度，单位微克每毫升（μｇ／ｍＬ）；犃犻———样液中内标物的峰面积（或峰高）；犞———样液最终定容体积，单位毫升（ｍＬ）；犿———样液所代表的试样的质量，单位为克（ｇ）。注：计算结果需将空白值扣除。８　测定低限、回收率８．１　测定低限气相色谱检测方法和气相色谱质谱检测方法测定三氯杀螨醇残留量的测定低限均为０．０５ｍｇ／ｋｇ。　８．２　回收率样品的添加浓度及回收率的实验数据见表２。４犛犖／犜０３４８．１—２０１０表２　样品的添加浓度及回收率的实验数据（犌犆）测定方法添加浓度ｍｇ／ｋｇ回收率范围％测定方法添加浓度ｍｇ／ｋｇ回收率范围％ＧＣ０．０５７８～１０２０．１０８５～１０５０．５０８６～１０４３．０８８～１０３ＧＣＭＳ０．０５７９～９８０．１０８３～１０１０．５０８４～１０３３．０８９～１０２５犛犖／犜０３４８．１—２０１０附　录　犃（资料性附录）三氯杀螨醇（碱解产物犇犅犘）及艾氏剂标准品气相色谱图图犃．１　三氯杀螨醇（碱解产物犇犅犘）及艾氏剂标准品气相色谱图６犛犖／犜０３４８．１—２０１０附　录　犅（资料性附录）三氯杀螨醇标准品（碱解产物犇犅犘）和艾氏剂选择离子流色谱图和全扫描质谱图图犅．１　三氯杀螨醇标准品（碱解产物犇犅犘）和艾氏剂选择离子流色谱图图犅．２　三氯杀螨醇标准品（碱解产物犇犅犘）全扫描质谱图犛犖／犜０３４８．１—２０１０