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ICS65.020.01B30DB41河南省地方标准DB41/T1810—2019曲茎石斛培养基播种育苗技术规程2019-03-19发布2019-06-19实施河南省市场监督管理局发布DB41/T1810—2019I目次前言................................................................................II1范围..............................................................................12规范性引用文件....................................................................13术语和定义........................................................................14制种..............................................................................15培养基配方........................................................................26培养基播种育苗....................................................................37炼苗与移栽........................................................................38种苗出床分级......................................................................5附录A(资料性附录)曲茎石斛播种培养基配方..........................................7附录B(规范性附录)曲茎石斛瓶苗分级................................................8附录C(资料性附录)曲茎石斛病害防治方法............................................9附录D(资料性附录)曲茎石斛虫害防治方法...........................................10附录E(规范性附录)曲茎石斛出床种苗分级...........................................12DB41/T1810—2019II前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由河南省林业局提出并归口。本标准起草单位:国有南阳市黄石庵林场、河南伏牛山国家级自然保护区黄石庵管理局。本标准主要起草人:高立献、贾赛、张天鹏、高萨娜、王冰、裴新苗、郭利华、何西豪、吴中州、常玮、焦铸锦、董江伟、乔世锴、王玲、王君、薛建敏、薛冰。DB41/T1810—20191曲茎石斛培养基播种育苗技术规程1范围本标准规定了曲茎石斛培养基播种育苗的术语和定义、制种、培养基配方、培养基播种育苗、炼苗与移栽、种苗出床分级。本标准适用于曲茎石斛培养基播种育苗。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB5084农田灌溉水质标准GB/T8321(所有部分)农药合理使用准则NY/T496肥料合理使用准则3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1曲茎石斛DendrobiumflexicauleZ.H.TSi,S.C.SunetL.G.XU兰科石斛属多年生草本植物,附生。茎圆柱形平卧或斜展,显著廻折弯曲,茎长4cm~11(15)cm,叶2~4枚互生于茎上部,总状花序,具1~2朵生于无叶的茎上部,花冠黄绿色展开后粉白色,花瓣长2.5cm~2.8cm,中宽1.3cm,唇瓣具紫色斑块,花期5月。散生于伏牛山海拔800m~1200m的阴坡、半阴坡山谷的岩石上。3.2培养基播种苗将植物种子直接播种在培养基上,在环境因子可控条件下生产出来的苗体。3.3原球茎兰科植物种子萌发过程中,由种胚形成的扁形球状物。3.4无根苗在曲茎石斛培养基播种中,由圆球茎诱导发育用于扩繁的无根苗体。4制种4.1母株选择选择原产伏牛山区植株健壮,无病虫害的曲茎石斛作为制种母株。DB41/T1810—201924.2母株管理4.2.1温湿度母株宜置于荫棚设施中进行培育,在冬季花芽分化期间夜间温度13℃~15℃,白天18℃~20℃;或在阴棚中自然温度越冬。保持60%~70%的空气湿度,干旱时及时补水,生长基质严防积水。4.2.2施肥每年的5月开始,宜每15d施1次腐熟的80~100倍液的稀释薄饼肥,入冬后宜施0.1%~0.05%的磷酸二氢钾或其它适量磷钾肥。4.2.3通风不定期的打开棚内通风口,经常保持空气流动。4.3授粉4.3.1授粉方式同种源异株异花授粉为佳。4.3.2授粉时间自然开花后第3d~4d时授粉,以晴天下午16:00~18:00点为佳。4.3.3授粉方法将母本花上的唇瓣先摘掉,然后用牙签或镊子尖头拨开药帽后去除花粉块;同样方法摘掉父本上的唇瓣,用牙签或镊子尖头取出黄色花粉块,置于容器内或纸上,以备授粉。父母本相近时,可直接进行授粉。授粉时用牙签或镊子将花粉块轻轻放在已去除花粉块的母本合蕊柱下部凹陷的柱头上(蕊腔内),轻轻压紧或用牙签将蕊柱腔的黏液全部粘上花粉块。4.3.4授粉管理授粉后,应及时挂牌,注明父母本名称、产地、授粉时间、编号等内容,挂在授粉后的花枝上。授粉后7d左右,若花瓣萎缩,子房开始膨大变绿并能看到果实邹形,说明授粉成功。在花朵完全枯萎后,可向母株喷洒1:1000倍的磷酸二氢钾溶液补充营养,促进果实发育成长。授粉后120d~140d果实成熟。4.4果实采收10月下旬~11月上中旬,当蒴果开始由绿变黄成熟未开裂前采收,采收后用纸巾包裹后放入塑料封口袋中,置4℃冰箱中保存备用。5培养基配方5.1基本培养基选择基本培养基选择为MS。5.2培养基配方DB41/T1810—20193曲茎石斛培养基播种育苗各阶段培养基配方参见附录A。6培养基播种育苗6.1种子萌发培养6.1.1蒴果清洗消毒将经过后熟未开裂的蒴果,放在流水中洗去表面的灰尘杂质,用牙刷蘸取浓度为10%体积分数的洗洁精溶液刷洗果实表面并浸泡20min,然后用流水冲洗1h。在超净工作台上用75%的酒精浸泡30s,无菌水清洗干净,再放入0.1%的升汞溶液中浸泡10min后,用无菌水冲洗5~6次。6.1.2播种培养在超净工作台上用无菌手术刀、镊子将灭菌好的蒴果剖开,用无菌镊子均匀撒布于种子无菌萌发诱导培养基(参见附录A)上,在培养瓶中进行固体培养,前期避光培养15d后,采用光照培养。6.2原球茎增殖继代培养播种培养60d~75d后,将原球茎均匀地转接到培养瓶中的原球茎增殖继代培养基(参见附录A)上进行继代固体培养。6.3丛生芽分化培养继代培养45d~60d后,将原球茎均匀转接到培养瓶中的丛生芽分化培养基(参见附录A)上,进行固体培养。6.4壮苗生根培养丛生芽分化培养60d~70d后,将茎株高1cm以上的无根苗挑出,转接到培养瓶中的壮苗与生根培养基(参见附录A)上进行固体培养。经过50d的培育,瓶苗全部生根,生根数多在3~4条,当幼苗生根后,可继续培养70d~120d即可出瓶炼苗。6.5培养条件光照强度1500Lx~2000Lx,光照时间10h~12h/d,培养温度25℃~28℃。7炼苗与移栽7.1大棚选址与构建大棚设施应选在通风排水良好,水源丰富,交通方便无污染的开阔地段建造,大棚为镀锌钢管拱棚结构,宽度8m,长度因地制宜,高度3.6m,南北向设置,棚顶覆盖无滴薄膜(或不覆盖薄膜),拱棚架上边覆盖遮阳率为80%的黑色尼龙网,棚下部设防虫网。7.2大棚消毒大棚炼苗7d~10d前密闭,用45%百菌清烟熏剂每667㎡用量200g进行熏蒸剂消毒处理,均匀放置后分别点燃、随即密闭烟熏2h~3h。7.3苗床构建DB41/T1810—20194苗床规格为长3.0m,宽1.2m,高0.5m,床四周用高10cm的塑料挡板做床围栏,下铺钢网,上铺塑料网,棚内栽植床分四行摆放。7.4基质消毒与铺设苗床栽培基质为松树皮块.基质材料规格为大块长2cm~3cm,小块长0.5cm~1.0cm,大块占80%,小块占20%,首先基质用水浸泡后,采用蒸汽杀菌的消毒方法处理基质材料,基质蒸煮温度为95℃~105℃,处理时间100h~120h。基质铺设厚度为7cm~8cm,大料放下层,小料放上层。7.5炼苗石斛组培瓶苗在组培室内逐步降至室温处理7d后,转移至种植大棚内,闭瓶炼苗3d~4d。尔后先拧松瓶盖1d左右,第2天至第3天逐步打开瓶盖,使其炼苗10d~15d,在炼苗期间若发现有轻度感染瓶苗时,用多菌灵800倍液及时清洗消毒,苗体消毒5min~10min后及时种植。感染严重的瓶苗及时移出大棚销毁。7.6出瓶移栽7.6.1出瓶打开瓶盖后的组培苗瓶中加入60%的清水,然后将培养基摇散倒出,用流动的清水将培养基洗净,清洗中做到轻拿轻放。7.6.2瓶苗分级将清洗干净的石斛瓶苗进行分级(见附录B)。7.6.3晾苗在荫棚内按行平摊进行晾苗,至根系由青绿略变为泛白为宜。不应在阳光下和强风处晾苗。晾苗期间,对石斛小苗根系及时喷雾补水,水中加入少量的多菌灵溶液(按正常使用量的1/6比例加入500倍液)和兰花营养液(正常使用量的1/6)。7.6.4移栽栽植曲茎石斛组培瓶苗时间以每年4~5月为宜。丛行距10cm×10cm,每床栽29行,每丛5~7株。栽植方法是把栽培基质扒个小穴,将根系经过甲基托布津800~1000倍液或多菌灵800倍液消毒过的石斛苗放入栽植穴内,根系展开,随即用扒起的基质料覆盖根系至根际处,并用小料覆盖小苗的根际处,栽后用手将每丛向上轻提一下,再把石斛小苗根颈处的基质小料扒开一点,使根际部稍裸露在外为宜。并薄薄撒小料一层,栽后及时浇一次定植水,以浇透为原则。7.7大棚育苗管理7.7.1温度控制在生长季节,棚内温度控制在10℃~30℃之间,夏天温度高于30℃时采取浇水及通风降温,冬天低于0℃时关闭大门或大棚顶覆盖薄膜保温。依大棚自然温度即可越冬和防止霜冻。7.7.2湿度控制DB41/T1810—20195移栽后一周内棚内空气湿度宜保持在90%左右,定植后的7d内大棚保持密闭。一周后棚内空气相对湿度在60%~70%,幼苗叶片较干时应进行浇第二次定植水。以后床面见干时进行喷雾浇水,并逐渐打开通风,夏天高温季节湿度达到70%~80%,并保持通风。7.7.3水分管理7.7.3.1水质要求以pH值6.5左右的软水为佳,灌溉水质应符合GB5084的要求。7.7.3.2浇水曲茎石斛苗床栽植后,前2个月内基质以保持潮润为主,床面见干时应及时喷雾水。栽植2个月后,基质以保持湿润为主。浇水以滴灌或喷灌为好,不得冲灌。一般夏季2d~3d浇一次透水,春秋季以7d~10d浇一次透水,冬季以10d~12d浇一次透水。当棚内空气相对湿度低于30%~40%时应及时补水。在生长季节基质应较湿润,生长停滞期,基质以略干为宜。切忌积水烂根。7.7.3.3浇水时间浇水时间宜为上午9~10点,下午5~6点。即夏秋季节日落前后浇,春季日出前后浇,冬季在中午浇水为佳。夏天浇水时,应选择在早晨或傍晚进行。7.7.4施肥7.7.4.1肥料选择曲茎石斛种植施用果蔬和兰花专用叶面肥,应符合NY/T496的规定执行。7.7.4.2施肥浓度肥料使用最大浓度不超过0.1%,一般气温30℃以下的阴天施肥浓度为0.1%。气温超过30℃的晴天施肥浓度为0.05%。通过发酵灭菌处理过的沼液使用浓度为50~70倍液喷施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