DB13T 2347-2016 中红侧沟茧蜂人工繁育技术规程

ICS65.140B47DB13河北省地方标准DB13/T2347—2016中红侧沟茧蜂人工繁育技术规程2016-05-23发布2016-07-01实施河北省质量技术监督局发布DB13/T2347—2016I前言本标准按GB/T1.1-2009给出的规则编写。本标准由河北省农林科学院提出。本标准起草单位：河北省农林科学院植物保护研究所。本标准起草人：李建成、路子云、冉红凡、刘文旭、马爱红、屈振刚。DB13/T2347—20161中红侧沟茧蜂人工繁育技术规程1范围本标准规定了中红侧沟茧蜂Microplitismediator（Haliday）以粘虫为繁育寄主的人工繁育技术的术语和定义、粘虫的人工饲养和中红侧沟茧蜂繁育的环境条件、种源、方法等内容。本标准适用于以粘虫为中间寄主的中红侧沟茧蜂的人工繁育。2术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2.1中红侧沟茧蜂属膜翅目Hymenoptera茧蜂科Braconidae，是重要的农业害虫天敌，其寄主涉及到鳞翅目夜蛾科和尺蛾科的40多种昆虫，其中包括棉铃虫Helicoverpaarmigera（Hubner）、粘虫Mythimnaseparata（Walker）、地老虎Agrotisypsilon(Rottemberg)和甘蓝夜蛾Mamestrabrassicae（Linnaeus）等。2.2粘虫人工饲料用于人工饲养粘虫的饲料，人工饲料配方及制作方法见附录C。2.3滞育茧处于滞育状态的中红侧沟茧蜂蜂茧，颜色为褐色，纺锤形，长×宽=4.5mm×1.5mm，重3.8mg～4.4mg，0℃～4℃可保存一年。2.4发育茧处于发育状态的中红侧沟茧蜂蜂茧，颜色为绿色，纺锤形，长×宽=4.6mm×1.7mm，重3.2mg～3.7mg，0℃～4℃可保存7d～10d。3人工繁育环境条件3.1厂房条件厂房水电设施齐全、具有良好的防水、保温性能，周围植物稀少或可严密隔离。3.2车间组成DB13/T2347—20162由人工饲料制备室、粘虫养殖室、接蜂室、繁蜂室、消毒室、质量检测室、包装车间、恒温冷藏室、原材料库组成。3.3配套设施3.3.1通风系统在各养殖室内安装通风设备，通风口用60目纱网隔离。3.3.2控温、控湿系统采用全自动温湿度调控系统控制环境条件；粘虫幼虫饲养室环境条件为温度：26℃±1℃，相对湿度3龄以下幼虫70%～80%，4龄以上幼虫为60%～70%；成虫饲养室环境条件为温度21℃±1℃，相对湿度为75%～85%，光周期为L∶D=12∶12。发育茧繁殖条件温度为26℃±1℃，相对湿度60%～70%，光周期L∶D=14∶10；滞育茧繁殖条件温度为16℃±1℃，相对湿度60%～70%，光周期L∶D=10∶14。3.3.3防逃逸设施在门口设置隔离间，在通风口、窗户等处设置防虫网，防止幼虫和成虫逃逸。4粘虫的人工饲养4.1粘虫种源由玉米田间采集幼虫，室内继代培养，挑选生长发育良好，健康的个体作为种源。粘虫鉴定特征见附录B。4.2粘虫卵4.2.1粘虫卵的收集以聚丙烯塑料绳为产卵底物，将其穿入产卵箱顶层事先挖好的小孔中，末端系扣防止塑料绳脱落；塑料绳长度以达到或超过产卵箱底部为准，每天收集有粘虫卵的塑料绳。4.2.2粘虫卵的保存将每天收集的粘虫卵放入保鲜袋中，置于温度0℃～4℃的冰箱内保存。4.2.3粘虫卵的消毒将带有粘虫卵的塑料绳先用无菌水冲洗2～3遍，然后用4%甲醛溶液浸泡10min，最后再用无菌水冲洗2～3遍，充分晾干。4.2.4粘虫卵的孵化晾干的有粘虫卵塑料绳放入保鲜袋，加少许玉米苗保湿。放入温度26℃±1℃，光周期为L∶D=12∶12的光照培养箱中使其孵化，卵孵化后转入养虫袋内饲喂。4.3粘虫幼虫4.3.1养虫袋DB13/T2347—20163养虫袋用100目锦纶纱制成，长、宽均为33cm，袋口用塑料拉杆封住。袋内放入U形铁丝，撑起一定空间，供幼虫在其间取食活动。此袋可供养1～2龄小幼虫1000头左右，3～4龄幼虫200～300头，5龄以上幼虫70头左右。4.3.2粘虫低龄幼虫饲养1～3龄粘虫小幼虫需选择较鲜嫩的玉米苗作为饲料在养虫袋中饲养，在养虫袋内每天加入100g～200g新鲜玉米苗供幼虫食用。每天清除虫粪和更换饲料，操作时注意把残余在玉米芯叶内的幼虫收回，防止幼虫丢失；待幼虫到达3龄及时调整养虫袋内幼虫密度。4.3.3粘虫大龄幼虫饲养幼虫到达4龄后用人工饲料在养虫袋饲养，人工饲料配方及配制方法见附录C。此时幼虫取食量、排粪量不断增加，每天添加60g～120g人工饲料，必须保证养虫袋每饲料的足量供应和及时清除粪便。同时随着幼虫的生长及时调整幼虫密度并且剔除病虫，5龄前每袋供养200头左右，5龄后每袋供养70头左右。养虫室内要注意通风换气，此时幼虫适宜的环境温度为26℃±1℃，湿度为60%～70%，光周期为L∶D=12∶12。4.4粘虫蛹4.4.1粘虫化蛹盒用长35cm，宽25cm，高10cm的塑料盒供粘虫化蛹，盒盖中间配有纱网。4.4.2粘虫化蛹将6龄幼虫挑出放入化蛹盒内，每盒可放幼虫100～150头。盒底铺有3～5层吸水纸，喷洒适量水并放少量玉米苗保湿。4.4.3粘虫蛹收集待粘虫化蛹3d后收集蛹。4.4.4粘虫蛹消毒将蛹放入4%甲醛溶液浸泡20min，然后用清水冲洗2～3遍。4.4.5粘虫蛹羽化将消毒后的蛹放入与化蛹盒内，盒底放3～5层吸水纸，用湿毛巾盖在盒子顶部。放入温度为26℃±1℃，湿度为75%～85%，光周期为L∶D=12∶12的养虫室内使其羽化。4.5粘虫成虫4.5.1粘虫成虫营养补充成虫羽化后需饲喂10%蜂蜜水以补充营养。将80ml～100ml10%蜂蜜水倒入容积250ml三角瓶中，用脱脂棉制作一灯芯状吸绳，一端插入蜂蜜水中，另一端在瓶口，供粘虫成虫取食。4.5.2粘虫成虫产卵箱产卵箱规格为50cm×35cm×55cm，框架、底座、后座为铝合金材料，前面为玻璃推拉门，其余面为不锈钢纱网，每笼可供300头左右成虫产卵。DB13/T2347—201644.5.3粘虫成虫产卵在产卵箱内放置300头粘虫成虫，雌雄虫随机。箱顶盖上湿毛巾保湿，成虫3天后开始产卵，产卵介质为聚丙烯塑料绳。5中红侧沟茧蜂的繁育5.1中红侧沟茧蜂种源在非抗虫棉田采集棉铃虫幼虫，通过室内饲养获得自然蜂种。中红侧沟茧蜂鉴定特征见附录A。5.2中红侧沟茧蜂接种箱接种箱规格为40cm×35cm×35cm的透明盒，前盖带有60目的锦纶纱网以保持盒子的通透性。5.3中红侧沟茧蜂接种在中红侧沟茧蜂羽化后按雌雄1:1的比例放入蜂箱（雌雄鉴别见附录A），并使之交配48h。然后在接蜂箱底部放150g～200g玉米苗，并饲喂10%蜂蜜水以补充营养。接蜂时，在箱内放入交配后的中红侧沟茧蜂雌蜂100头，箱底部放入2龄～2龄末的粘虫幼虫2000头，封闭好箱盖以防粘虫幼虫逃逸。接种24h后取出被寄生粘虫幼虫，并更换下一批粘虫幼虫。5.4被寄生粘虫幼虫饲养将接种24h的粘虫幼虫过筛后，放入养虫袋，幼虫密度为每袋500头。每天更换饲料并清除粪便，及时剔除病虫和未寄生幼虫。饲养控制条件因繁育滞育茧和发育茧而不同（见5.5）。5.5中红侧沟茧蜂蜂茧的繁育5.5.1发育茧的繁育将被寄生的粘虫幼虫在温度26℃±1℃，L∶D=14∶10，相对湿度65%～75%的条件下饲养，一般10d左右即可出茧。5.5.2滞育茧的繁育将被寄生的粘虫幼虫在温度16℃±1℃，L∶D=10∶14，相对湿度65%～75%的条件下饲养，一般25d左右出茧。5.6中红侧沟茧蜂蜂茧贮存5.6.1发育茧的贮存将发育茧放到底部有湿沙土的玻璃瓶中保湿，置于温度0℃～5℃的冷藏箱，可存放7d～10d。5.6.2滞育茧的贮存将滞育茧放到底部有湿沙土的玻璃瓶中保湿，置于0℃～5℃的冷藏箱，可存放一年左右。DB13/T2347—20165AA附录A（资料性附录）中红侧沟茧蜂形态特征A.1成虫中红侧沟茧蜂Microplitismediator（Haliday）♀体长3mm。头触角丝状，18节，深黑，长4.20mm～5.00mm，约与体等长。横形，向后圆形收窄。颜面和颊具革状细皱。额和头顶具细刻点。唇基基部稍隆起，与颜面微分开；幕骨陷深。颚眼距稍长于上颚基宽。单复眼间距约为单眼直径的2.8倍。胸前胸背板侧方光滑，中央凹陷，内有短横脊。中胸盾片及小盾片具皱状刻点；盾纵沟由浅而细的皱显出；小盾片前凹内具纵脊。中胸侧板前方具皱状刻点，中央侧沟之后平滑有光泽。后胸侧板满布粗糙皱纹。翅径脉从翅痣中央发出；第2肘室四边形，向端部狭；第1肘间横脉与肘脉第1段端或肘脉第2段着色部位等长；小脉在基脉外方，其距稍短于小脉本身长度。腹并胸腹节具网状粗皱；中纵脊明显。第一背板长约为宽的2倍，满布皱纹，中央稍纵凹，侧缘几乎平行，端部圆，后端中央有明显的光滑小隆丘；其余背板光滑。体色体黑色，腹部有时呈黑褐色，第2+3节背板赤黄色；触角黑褐色，柄节基部多半红褐色。须淡黄色；足赤黄色，基部或中后足基节基部黑褐色；翅基片淡赤色，翅稍带烟褐色，翅痣和翅脉暗褐色，翅痣基部有黄白色斑。♂触角较粗且长，上颊稍长于复眼横径。其余同♀。A.2卵中红侧沟茧蜂产生无卵黄卵，初产卵长289.94±30.9μm，卵椭圆型，稍微有点儿弯曲，颜色为乳白色或无色透明。A.3幼虫中红侧沟茧蜂将卵产于寄主体内，幼虫在寄主体内生长发育。其发育时期随着温度和湿度的不同而不同，一般为6d～11d，中红侧沟茧峰幼虫有3个龄期。初孵幼虫长0.51mm、宽0.12mm，腹部扁平，非常活跃；头部高度骨化，头长0.12mm、宽0.21mm，比身体其余部分宽，具l对触角和1对运用自如的角质化的颚；体色乳白色，有13节，最后1节长80μm、宽40μm，呈圆锥型尾巴状。随着幼虫的生长，在尾丝的背侧面凸出1个球状器官，该器官为尾囊，尾巴消失，这时幼虫体长1.77mm、宽0.51mm。在产卵后108h～113h，1龄幼蜂开始蜕皮；2龄幼蜂为无头型，尾囊发达，可见10节腹节。在寄生后7d～8d，3龄幼蜂在寄主腹节4～5节处钻出结茧化蛹，平均体长4.5mm、宽1.5mm，头不再比身体宽，腹节第2～7节各有1对气孔。至幼蜂钻出寄主后，寄主血腔中仍能观察到幼蜂蜕下的皮壳。A.4茧纺锤型。中红侧沟茧蜂具有兼性滞育特性，能产生2种不同颜色的茧，即滞育茧（褐色）和非滞育茧（绿色）。绿色最为常见，特定的条件下产生褐色茧，茧表有时有纵形皱纹。滞育茧的平均单茧重比非滞育茧重，抗逆性强。DB13/T2347—20166BB附录B（资料性附录）粘虫形态特征B.1成虫淡黄色或淡黄褐色至淡灰褐色，体长15mm～20mm，翅展35mm～45mm。头部与胸部灰褐色。腹部暗褐色。触角丝状，胸发达，遍被鳞毛。前翅灰黄褐色、黄色或橙色，变化很多，内横线往往只现几个黑点，环纹与肾纹圆形，淡黄色或褐黄色，肾纹后端有1个白点，其两侧各有1个黑点。由翅尖向斜后方有1条暗色条纹。后翅正面暗褐，反面淡褐，向基部色渐淡，缘毛白色。翅僵针刺状，雌蛾3根较尖细，雄蛾1根略粗壮。雄蛾较小，体色较深，其尾端经挤压后，可伸出1对鳃盖形的抱握器，抱器略似扫帚，抱器腹大，内突及背突均小，抱器冠发达，抱握器顶端具1长刺，这一特征是别于其他近似种的可靠特征。雌蛾腹部末端有1尖形的产卵器。B.2卵半球形，直径约0.5mm，初产时乳白色，孵化前呈黄褐色至黑褐色。卵粒单层排列成行，但不整齐，常夹于叶鞘缝内，或枯叶卷内，在水稻和谷子叶片尖端上产卵时常卷成卵棒。B.3幼虫体色多变，初孵幼虫多为灰褐色；2～3龄幼虫灰褐或捎带暗红色，取食嫩叶后，胸腹部前半截常现绿色。密度小时，4龄以上幼虫多呈淡黄褐至黄绿色不等。密度大时，多为灰黑至黑色。头黄褐至红褐色，有暗色网状纹。头部中央沿蜕裂线有黑褐色纵纹，略似“八”字形。幼虫体表有许多纵行条纹，背中线白色，边缘有细黑线，背中线两侧有2条红褐色纵条纹，近背面较宽，两纵线间均有灰白色纵行细纹。胸盾片浓黑，有光泽。胸部第一节和腹部第一至八节两侧各有气门一个，气门盖黑色。腹部第三至六节腹面各有腹足1对，第十节有尾足一对。腹面