DB22T 2389-2015 水稻对稻瘟病抗性鉴定技术规程

ICS65.020.01B05备案号：48404-2016DB22吉林省地方标准DB22/T2389—2015水稻对稻瘟病抗性鉴定技术规程Techniquespecificationforidentificationofriceblastdiseaseresistance2015-12-15发布2016-01-25实施吉林省质量技术监督局发布本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2389—2015I前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由吉林省农业委员会提出并归口。本标准起草单位：吉林省农业科学院。本标准主要起草人:任金平、刘晓梅、姜兆远、李莉、张金花、李淑芳、孙辉、王琳、高鹏、郑建波、吴宪。本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2389—20151水稻对稻瘟病抗性鉴定技术规程1范围本标准规定了水稻抗稻瘟病鉴定接种体准备、鉴定方法、抗性评价与副产物处理。本标准适用于水稻种质资源及水稻品种（系）对稻瘟病抗性的鉴定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。NY/T1300农作物品种区域试验技术规范水稻3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1接种体inoculum用于人工接种鉴定用的稻瘟病菌(Pyriculariagrisea)分生孢子悬浮液，其孢子浓度约为2×105个/ml。3.2苗瘟blastofseedling水稻3叶～4叶期发生的稻瘟病。3.3参鉴材料testedcultivars包括水稻种质资源、品种（系）。3.4对照材料controlcultivars抗性为感病的蒙古稻。3.5喷雾接种sprayinoculation苗期鉴定时，用与空气压缩机（0.8Mpa）链接的猴头喷雾器将接种体喷洒于稻苗上，喷雾量为300ml/m2。3.6产孢培养基sporulatedmedium燕麦片30g、西红柿汁200ml、琼脂20g、蒸馏水1000ml。3.7自然诱发鉴定identificationbynaturalinduction在自然条件下利用感病品种诱发的鉴定方法。本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2389—201523.8叶瘟leafblast水稻移栽后叶片上发生的稻瘟病。3.9穗瘟panicleblast水稻抽穗后穗颈和枝梗上发生的稻瘟病。3.10病圃diseasenursery在稻瘟病易发区设立具有代表性的诱发水稻叶瘟和穗瘟的鉴定圃。4接种体准备4.1病原标样采集与保存采集省内各地区田间具有典型稻瘟病症状的穗颈，去掉多余枝梗及籽粒保留穗颈长度5cm，阴干后阴凉干燥处保存。4.2病原物分离将穗颈浸泡4h后放在铺有无菌滤纸的培养皿内，于27℃温箱保湿培养24h，孢子达到透明状态时，采用震落法震落在水琼脂培养基上，然后挑取单孢至PDA培养基上培养。4.3菌种保存将有致病性的纯培养物接种到灭菌的稻节上，置于干燥器内室温保存。4.4生理小种鉴定与编号应按全国统一的生理小种鉴别方法进行病原菌生理小种鉴定并编号。4.5接种体悬浮液的制备选择10个优势小种菌株，27℃条件下在PDA培养基上培养7d后，移至产孢培养基上，再培养5d～7d，无菌条件下洗去表面菌丝进行12h光暗培养3天，用无菌水洗涤稀释至孢子终浓度2×105个/ml。5鉴定方法5.1苗瘟鉴定5.1.1鉴定设计将试验材料直接穴播于盛有肥沃土壤的育苗盘（60cm×30cm）内，每盘60穴，每份材料播一穴，每穴10粒种子，每盘设对照材料1份。一叶一心期和接菌前各施一次氮肥，每平方米施硫酸铵30g。试验设3次重复。5.1.2接种时间和方法在水稻3叶～4叶期进行喷雾接种。每平方米接种孢子液300ml，接种后于26℃～28℃的温室内，黑暗保湿(RH95%)16h后移去遮光物，保湿控温管理。本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2389—201535.1.3调查时间方法水稻接种后7d～8d当对照材料发病达7级或以上时进行调查，每份材料逐株逐叶调查。5.1.4分级与记录应按附录A表A.1分级，按附录B表B.1记录。5.2叶瘟和穗瘟鉴定5.2.1病圃选择选择常年易发生重病田块设为病圃，每份材料每次重复的病圃面积不少于1m2。5.2.2病圃试验设计每份材料移栽3行，行长1m，行距为20cm，每行7穴，每穴3株，按顺序排列，区行垂直两端栽诱发。品种蒙古稻2行作为诱发行，株行距与参鉴品种相同。其余应按NY/T1300的规定执行。5.2.3病圃管理病圃施肥量高于当地生产田10%，其余应按NY/T1300的规定执行。5.2.4调查时间和方法5.2.4.1叶瘟在水稻孕穗期（7月下旬）对参鉴材料进行逐株逐叶调查，1周后复查1次。5.2.4.2穗瘟在水稻黄熟期（9月上中旬）对每份参鉴材料进行调查，连续实查100穗，1周后复查1次，记载每穗的发病情况、总穗数、病穗数，计算病穗率。5.2.5分级与记录5.2.5.1叶瘟应按附录A表A.1分级，按附录B表B.2记录。5.2.5.2穗瘟穗瘟发病率与分级的关系见附录A表A.2，应按附录B表B.3记录。6抗性评价6.1评价原则依据苗瘟、叶瘟、穗瘟的调查数据，以最高数值作为参鉴材料的抗性级别，在中抗到高感的评价区间，当同级别数值在各个点次出现频率低于25%时，抗性评价上调一个级别，作为参鉴材料的苗瘟、叶瘟和穗瘟的最终级别。6.2评价标准本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2389—20154稻瘟病抗性评价分级标准见附录A表A.1、表A.2，将参鉴材料划分为高抗（HR）、抗(R)、中抗(MR)、中感(MS)、感(S)、高感(HS)6个类型。6.3抗性记录按附录B表B.4记录。7副产物处理7.1接种体将接种后剩余的接种体集中灭菌处理。7.2病株将发病稻株深埋或焚烧。本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2389—20155附录A（规范性附录）水稻稻瘟病分级标准水稻苗叶瘟调查分级见表A.1。表A.1水稻苗叶瘟调查分级标准病级病情抗性评价0无病。高抗1针头状大小褐点2褐点较大，直径小于1mm抗3圆形至椭圆形的灰色病斑，边缘褐色，直径1mm～2mm中抗4典型纺锤形病斑，长1cm～2cm，通常局限在两叶脉之间，病斑面积小于叶面积的2.0%5典型纺锤形病斑，病斑面积占叶面积的3.0%～10.0%中感6典型纺锤形病斑，病斑面积占叶面积的11.0%～25.0%7典型纺锤形病斑，病斑面积占叶面积的26.0%～50.0%感8典型纺锤形病斑，病斑面积占叶面积的51.0%～75.0%9全叶枯死高感水稻穗瘟发病率群体抗性分级见表A.2。表A.2水稻穗瘟发病率群体抗性分级标准病级病穗率（d）抗性评价00高抗1≤5.0%抗35.0%＜d≤10.0%中抗510.0%＜d≤25.0%中感725.0%＜d≤50.0%感9＞50.0%高感本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2389—20156附录B（资料性附录）水稻稻瘟病记录表水稻苗瘟调查记录表见表B.1。表B.1水稻苗瘟调查记录表地点：调查日期：调查人：分菌系田间编号品种名称12345678910最高病级1…2…水稻叶瘟调查记录表见表B.2。表B.2水稻叶瘟调查记录表地点：调查日期：调查人：病级最高病级田间编号品种名称第一次第二次1…2…水稻穗瘟调查记录表见表B.3。表B.3水稻穗瘟调查记录表地点：调查日期：调查人：田间编号品种名称调查总穗数穗颈瘟数枝梗瘟数发病率/%发病率级别1…2…本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2389—20157水稻稻瘟病抗性鉴定结果表见表B.4。表B.4水稻稻瘟病抗性鉴定结果表地点：调查日期：调查人：苗瘟叶瘟穗瘟田间编号品种名称病级抗性病级抗性发病率/%发病率级别抗性1…2…_________________________________本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印