DB21∕T 2466-2015 禽流感病毒免疫层析(胶体金)检测方法

ICS11.220B41DB21辽宁省地方标准DB21/T2466—2015禽流感病毒免疫层析（胶体金）检测方法Methodoftheimmunochromatogarphicassayforthedetectionofavianinfluenzavirus2015-04-30发布2015-06-30实施辽宁省质量技术监督局发布DB21/T2466—2015I前言本标准根据GB/T1.1-2009的有关规定进行制定。本标准由辽宁省动物疫病预防控制中心提出。本标准由辽宁省畜牧兽医局归口。本标准由辽宁省质量技术监督局发布。本标准负责起草单位：辽宁省动物疫病预防控制中心、辽宁省动物医学研究院。本标准起草人：李树博、赵晓彤、金梅林、董晓辉、吴运谱、高志峰、于长泳、王志国、赵鹏、徐高原、王志勇DB21/T2466—20151禽流感病毒免疫层析（胶体金）检测方法1范围本标准规定了禽流感病毒免疫层析方法的材料设备、检测样品处理、检测方法、判定标准、废弃物处理。本标准适用于检测禽排泄物、组织、鸡胚尿囊液及细胞培养物中的禽流感病毒。本标准适用于生物安全二级实验室操作。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。NY/T541-2002动物疫病实验室检验采样方法GB16548病害动物和病害动物产品生物安全处理规程GB/T16569畜禽产品消毒规范3材料设备3.1检测卡禽流感病毒检测试纸条装在塑料卡中制成检测卡，铝箔密封，内装干燥剂，室温或冷藏保存。测试卡结构及测试部位如下图所示。图13.2样品处理液TrisBase24.2g、Triton-x10010mL，加注射用水至1000mL，调pH值至9.0，过滤除菌，无菌分装，1mL/管。样品孔（S）检测区检测线（T）质控线（C）DB21/T2466—201523.3其他塑料吸管、棉拭子、高速冷冻离心机4检测样品处理4.1泄殖腔拭子检测样品的处理将收集的泄殖腔棉拭子插入到含有处理液的样品管中，充分混合，使其充分洗脱，以2℃～8℃，12,000r/min离心10min，取上清待检。4.2组织检测样品的处理称取组织块0.5g，置于匀浆器中，加生理盐水1mL，研磨完全后取出组织浸出液，然后置2℃～8℃，12,000r/min离心10min，取上清待检。4.3鸡胚尿囊液样品的处理尿囊液样品以2℃～8℃，12,000r/min离心2min，取上清待检。4.4细胞培养样品的处理细胞培养液可直接用于检测或者冻融一次后检测。5检测方法取适量的检测样品（80μL～120μL，滴管3滴～4滴），缓慢滴加到样品孔中，当看到红色液体在试纸条上移动时，放慢加样速度。整个加样过程控制在1min内完成。加样完成后将试纸条平放在桌面上，5min～30min内观察结果。6判定标准阳性结果：在试纸条上出现两条红色的条带。阴性结果：在试纸条上仅在质控线处出现一条红色的条带。无效结果：在质控线不出现红色的条带。7废弃物处理检测过程中的废弃物，应收集后高压灭菌处理。高压灭菌后送到指定的医疗垃圾处理站销毁。_________________________________