DB32∕T 898-2006 蛋品中乙氧酰胺苯甲酯残留量的测定

ICS65.020.01B45备案号：18643-2006江苏省地方标准DB32/T898—2006蛋品中乙氧酰胺苯甲酯残留量的测定高效液相色谱法Determinationofethopabateresiduesineggs——HighPerformanceLiquidChromatography2006-03-25发布2006-05-25实施江苏省质量技术监督局发布DB32DB32/T898—2006前言为了有效控制蛋品中乙氧酰胺苯甲酯的残留，特制定本标准。本标准按GB/T1.1-2000《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写规则》和GB/T1.2-2002《标准化工作导则第2部分：标准中规范性技术要素内容的确定方法》编制。本标准的附录A为资料性附录。本标准由江苏省农林厅提出。本标准由江苏省畜产品质量检验测试中心起草。本标准主要起草人：陆桂萍、时勇、邵德佳、贡玉清、毕昊容、朱永林、蒋天梅、吴琼、冯群科。DB32/T898—20061蛋品中乙氧酰胺苯甲酯残留量的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了蛋品中乙氧酰胺苯甲酯残留量的测定高效液相色谱法的原理、测定方法、灵敏度、准确度、精密度。本标准适用于鸡蛋中乙氧酰胺苯甲酯残留量的检测，最低检出限为25μg/kg。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6682-1992分析实验室用水规格和试验方法3原理试料中残留的乙氧酰胺苯甲酯用乙腈提取，提取液用无水硫酸钠脱水，加正己烷脱去脂肪，浓缩后用正己烷-丙酮溶解残余物，离心，取上清液过硅镁柱，用甲醇洗脱。洗脱液供液相色谱分析。4测定方法4.1试剂和材料除特别注明外，本标准所用试剂均为分析纯试剂，水为双蒸水，符合GB/T6682-1992中一级水规定。4.1.1乙氧酰胺苯甲酯对照品：纯度不小于99%4.1.2乙腈：色谱纯。4.1.3甲醇：色谱纯。4.1.4正己烷4.1.5异丙醇4.1.6无水硫酸钠：650℃灼烧4h，贮于密闭容器中备用。4.1.7丙酮4.1.8固相萃取柱：硅镁柱500mg/3mL。4.1.9溶液配制4.1.9.1标准储备液精密称取乙氧酰胺苯甲酯标准品20.0mg±0.1mg,置于200mL容量瓶中用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀即得。制成100μg/mL的溶液,作为标准储备液。置4℃保存。储存期为14d。4.1.9.2标准工作液准确吸取标准储备液,用甲醇稀释制成系列标准工作液,浓度为0.05μg/mL、0.1μg/mL、0.25μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.5μg/mL、5.0μg/mL，置4℃保存。储存期为7d。4.2仪器和设备4.2.1高效液相色谱仪，配紫外检测器4.2.2电子天平4.2.3匀浆机4.2.4离心机4.2.5旋转蒸发仪4.2.6旋涡混合器DB32/T898—200624.3测定步骤4.3.1试料的制备取适量新鲜或冷藏的空白或供试组织，绞碎并使均匀。4.3.2提取称取5g±0.05g试料，置于50mL玻璃离心管中,加乙腈20mL,加无水硫酸钠5g，高速匀浆。匀浆液以4000r/min的速度离心10min,将上清液倒入分液漏斗，加正己烷15mL。向剩余沉淀物中加乙腈15mL,高速匀浆。匀浆液以4000r/min的速度离心10min,上清液合并于分液漏斗中,摇匀后静置10min，取下层液于50mL鸡心瓶中,加异丙醇5mL,于45℃～50℃下水浴真空(旋转)蒸发至干。4.3.3净化加5mL正己烷-丙酮（9：1）溶解残余物，涡旋30s，放置30min以上，然后转移至10mL离心管离心5min，吸取上清液留用。取上清液过硅镁小柱，用3mL正己烷洗柱，挤干，用2mL甲醇洗脱。收集洗脱液作为试样溶液，供测定，同时作空白试验。4.3.4测定4.3.4.1色谱条件色谱柱：C18，150mm×4.6mm（i.d.）流动相：乙腈+水(30∶70)流速：1.0mL/mim检测波长：270nm进样量：20μL4.3.4.2测定法取适量试样溶液和相应的标准工作溶液，作单点或多点校准，以色谱峰面积积峰值定量。同时做空白试验。标准工作液及试样溶液中乙氧酰胺苯甲酯的响应值均应在仪器检测的线性范围之内。在上述色谱条件下，乙氧酰胺苯甲酯的保留时间约在5min左右。色谱图参见附录A。4.4结果计算和表述按式（1）计算供试组织中乙氧酰胺苯甲酯的残留量：X=A×V×CsAs×m……………………………………………………………（1）式中：X——供试组织中乙氧酰胺苯甲酯的残留量，单位为毫克/千克（mg/kg）A——供试试料试样溶液中乙氧酰胺苯甲酯色谱峰的峰面积As——标准工作液中乙氧酰胺苯甲酯的峰面积Cs——标准工作液中乙氧酰胺苯甲酯的浓度，单位为微克/毫升（μg/mL）m——试料的称样量，单位为克（g）V——试料的最终稀释体积，单位为毫升（mL）注：计算结果需扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留至小数点后2位。5灵敏度、准确度、精密度5.1灵敏度本方法在鸡蛋中的检出限为25μg/kg。5.2准确度本方法在100μg/kg～500μg/kg添加浓度水平上的回收率范围为80%～110%。5.3精密度本方法的批内变异系数≤10%，批间变异系数≤10%。DB32/T898—20063附录A（资料性附录）乙氧酰胺苯甲酯对照色谱图乙氧酰胺苯甲酯对照色谱图见图A.1。图A.1乙氧酰胺苯甲酯对照色谱图