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IEF考马斯亮蓝染色试剂盒简介:考马斯亮蓝染色液(CommassieBlueStainingSolution)是以考马斯亮蓝R250为染料可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白电泳胶的常规染色或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。等点聚焦染色后考马斯亮蓝染色又称IEF考马斯亮蓝染色,一般与三氯乙酸溶液及脱色液联合使用。本染色液经过改良,不含有毒的甲醇,但含有刺激性气味的乙酸。组成:操作步骤(仅供参考):1、临用前,取适量的考马斯亮蓝染色液和硫酸铜溶液,按99:1的比例混合,即为IEF考马斯亮蓝染色液,即配即用。2、等点聚焦电泳结束后,取凝胶放入5-10倍体积的三氯乙酸水溶液,置于水平或侧摆摇床上缓慢摇动。3、倾去三氯乙酸水溶液,加入10倍体积的IEF脱色液,置于水平或侧摆摇床上缓慢摇动15-20min。4、倾去IEF脱色液,加入新鲜配制的IEF考马斯亮蓝染色液,置于水平或侧摆摇床上缓慢摇动以上(胶厚度小于等于1mm)或1h以上(胶厚度大于1mm)。5、倾去染色液,用蒸馏水冲洗。6、加入适量常规脱色液,确保脱色液可以充分覆盖凝胶;Leagene推荐常规脱色液的配方是:40%乙醇,10%乙酸,50%蒸馏水。7、置于水平或侧摆摇床上缓慢摇动,室温脱色,期间更换脱色液2~4次,直至蓝色背景基本上全部被脱去,并且蛋白条带染色效果达到预期,通常蛋白条带在脱色1~2h后即可出现。8、完成脱色后把凝胶保存在水中,用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶涨。如编号名称PT0041Storage试剂(A):考马斯亮蓝染色液100mlRT试剂(B):硫酸铜溶液1mlRT临用前,按试剂(A):(B)=99:1的比例混合,即为IEF考马斯亮蓝染色液。试剂(C):IEF脱色液500mlRT使用说明书1份需避免溶涨,可以把胶保存在含20%甘油水溶液中,长期保存可以制备干胶注意事项:1、染色时如果把凝胶和染色液一起放置在微波炉中适当加热,可以大大加快染色速度。但加热时宜尽量避免沸腾,以免出现因暴沸而导致的凝胶碎裂。2、脱色期间可以在脱色液中加入一片吸水纸,可以使部分染料吸附在吸水纸上,加快脱色;脱色时间过长也会导致蛋白条带的颜色变浅。4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。有效期:12个月有效。相关:编号名称CS0001ACK红细胞裂解液(ACKLysisBuffer)DM0007瑞氏-姬姆萨复合染色液PW0053Western抗体洗脱液(碱性)TC0699植物总糖和还原糖检测试剂盒(硝基水杨酸法)
本文标题:IEF考马斯亮蓝染色试剂盒
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