GB 31604.13-2016 食品安全国家标准 食品接触材料及制品 11-氨基十一酸迁移量的测定

书书书中华人民共和国国家标准犌犅３１６０４．１３—２０１６食品安全国家标准食品接触材料及制品１１氨基十一酸迁移量的测定２０１６１０１９发布２０１７０４１９实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会发布书书书犌犅３１６０４．１３—２０１６Ⅰ　　　　前　　言　　本标准代替ＧＢ／Ｔ２３２９６．１２—２００９《食品接触材料　高分子材料　食品模拟物中１１氨基十一酸的测定　高效液相色谱法》。本标准与ＧＢ／Ｔ２３２９６．１２—２００９相比，主要变化如下：———标准名称修改为“食品安全国家标准　食品接触材料及制品　１１氨基十一酸迁移量的测定”；———修改了食品模拟物试液的制备；———修改了分析结果的表述。犌犅３１６０４．１３—２０１６１　　　　食品安全国家标准食品接触材料及制品１１氨基十一酸迁移量的测定１　范围本标准规定了食品接触材料及制品中１１氨基十一酸迁移量的高效液相色谱检测方法。本标准适用于食品接触材料及制品中１１氨基十一酸迁移量的测定。２　原理食品模拟物中１１氨基十一酸与荧光胺反应生成衍生物，经高效液相色谱分离，用荧光检测器检测其衍生物含量，换算得出１１氨基十一酸的含量，采用外标法定量。３　试剂和材料除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为ＧＢ／Ｔ６６８２规定的一级水。试验中容器及转移应避免使用塑料材质器具。３．１　试剂３．１．１　十水合四硼酸二钠（Ｎａ２Ｂ４Ｏ７·１０Ｈ２Ｏ）。３．１．２　磷酸（Ｈ３ＰＯ４）。３．１．３　硼酸（Ｈ３ＢＯ３）。３．１．４　荧光胺（Ｃ１７Ｈ１０Ｏ４）。３．１．５　氢氧化钠（ＮａＯＨ）。３．１．６　磷酸二氢钠一水合物（ＮａＨ２ＰＯ４·Ｈ２Ｏ）。３．１．７　冰乙酸（ＣＨ３ＣＯＯＨ）。３．１．８　无水乙醇（ＣＨ３ＣＨ２ＯＨ）。３．１．９　丙酮（ＣＨ３ＣＯＣＨ３）：色谱纯。３．１．１０　异辛烷［（ＣＨ３）２ＣＨＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）３］。３．１．１１　甲醇（ＣＨ３ＯＨ）：色谱纯。３．１．１２　氮气（Ｎ２）：纯度≥９９．９％。３．２　试剂配制３．２．１　水基、酸性、酒精类、油基食品模拟物：按ＧＢ５００９．１５６操作。３．２．２　乙酸溶液（９６％）：量取９６ｍＬ冰乙酸，用水稀释至１００ｍＬ。３．２．３　磷酸溶液（１０％）：量取１０ｍＬ磷酸，用水稀释至１００ｍＬ。３．２．４　硼酸溶液（５％）：称取５．０ｇ硼酸，加入１００ｍＬ水完全溶解。３．２．５　氢氧化钠溶液（２０％）：称取２０．０ｇ氢氧化钠，加入１００ｍＬ水完全溶解。犌犅３１６０４．１３—２０１６２　　　　３．２．６　磷酸盐缓冲溶液（０．００５ｍｏｌ／Ｌ）：准确称取６９０ｍｇ磷酸二氢钠一水合物溶于大约９００ｍＬ水中，缓慢加入少量磷酸溶液调节其ｐＨ为（３±０．２），以水定容至１Ｌ。３．２．７　硼酸缓冲溶液（０．０４ｍｏｌ／Ｌ）：准确称取１．５３ｇ十水合四硼酸二钠溶于大约９０ｍＬ水中，缓慢加入少量５％硼酸溶液调节其ｐＨ为（９±０．２），以水定容至１００ｍＬ。３．２．８　荧光胺溶液：准确称取２０ｍｇ荧光胺，加入１００ｍＬ丙酮完全溶解，避光保存。３．３　标准品１１氨基十一酸（Ｃ１１Ｈ２３Ｏ２Ｎ，ＣＡＳ号：２４３２９９７），纯度≥９９％，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。３．４　标准溶液配制３．４．１　１１氨基十一酸水溶液储备液（１．２５ｍｇ／ｍＬ）：准确称取１１氨基十一酸标准品１２５ｍｇ（精确至０．１ｍｇ）用２ｍＬ９６％乙酸溶解后转移至１００ｍＬ容量瓶中，并以水定容至刻度，放置于４℃冰箱保存。３．４．２　１１氨基十一酸异辛烷储备液（０．５０ｍｇ／ｍＬ）：准确称取１１氨基十一酸标准品２５ｍｇ（精确至０．１ｍｇ）用５ｍＬ冰乙酸溶解后转移至５０ｍＬ容量瓶中，并以异辛烷定容至刻度，放置于４℃冰箱保存。３．４．３　１１氨基十一酸水溶液标准中间液（２５μｇ／ｍＬ）：分别移取２ｍＬ水溶液储备液至３个不同的１００ｍＬ容量瓶中，分别用水基、酸性、酒精类食品模拟物定容。３．４．４　水基、酸性食品、酒精类食品模拟物标准工作溶液：分别移取１１氨基十一酸水溶液标准中间液０ｍＬ、１．０ｍＬ、２．０ｍＬ、４．０ｍＬ、１０．０ｍＬ、２０．０ｍＬ至５０ｍＬ容量瓶中，用水定容。标准工作液的浓度分别为０μｇ／ｍＬ、０．５μｇ／ｍＬ、１．０μｇ／ｍＬ、２．０μｇ／ｍＬ、５．０μｇ／ｍＬ、１０．０μｇ／ｍＬ。采用同样方式，分别用对应酸性、酒精类食品模拟物配制同样浓度系列的１１氨基十一酸标准工作溶液。临用时配制。３．４．５　油基食品模拟物标准工作溶液：分别称取５ｇ（精确至０．０１ｇ）橄榄油至６个不同的２５ｍＬ锥形瓶中。分别加入０μＬ、５μＬ、１０μＬ、２０μＬ、５０μＬ、１００μＬ的１１氨基十一酸异辛烷储备液，充分混匀。标准工作液的浓度分别为０μｇ／ｇ、０．５μｇ／ｇ、１．０μｇ／ｇ、２．０μｇ／ｇ、５．０μｇ／ｇ、１０．０μｇ／ｇ。然后按５．２．２进行。４　仪器和设备４．１　高效液相色谱仪：配荧光检测器。４．２　振荡器：往复型。４．３　涡旋振荡器。４．４　氮气浓缩器，配加热装置。４．５　分析天平：感量为１ｍｇ和０．１ｍｇ。４．６　ｐＨ计：精度０．０１。４．７　微孔滤膜：０．２２μｍ。５　分析步骤５．１　食品模拟物试液的制备按照ＧＢ５００９．１５６及ＧＢ３１６０４．１的要求，对样品进行迁移试验，得到食品模拟物试液。犌犅３１６０４．１３—２０１６３　　　　５．２　浸泡液的处理５．２．１　水基、酸性、酒精类食品模拟物准确移取１．０ｍＬ从迁移试验中获得的水基、酸性、酒精类食品模拟物至１０ｍＬ反应管中，当模拟物为４％乙酸时应同时加入１５０μＬ氢氧化钠溶液以调节ｐＨ。余下步骤按５．４进行衍生，平行制样２份。５．２．２　油基食品模拟物称取５ｇ（精确至０．０１ｇ）从迁移试验中得到的橄榄油介质食品模拟物至２５ｍＬ锥形瓶中，加入５ｍＬ异辛烷，混匀。准确移入５．０ｍＬ９６％乙酸，将锥形瓶放置在振荡器上振荡３０ｍｉｎ。待两相分离后，准确移取１．０ｍＬ下层的乙酸提取液转移至１０ｍＬ反应管中，用氮气浓缩器于４０℃将乙酸提取液吹干。向吹干后的反应管中准确移入１．０ｍＬ水，置于涡旋振荡器上处理１０ｓ，充分混匀。余下步骤按５．４进行衍生，平行制样２份。５．３　空白试液的制备按５．２处理未与食品接触材料接触的食品模拟物，余下步骤按５．４进行衍生。５．４　１１氨基十一酸的衍生准确移取１．０ｍＬ硼酸缓冲溶液加入到制备的水基、酸性、酒精类、油基食品模拟物试液及制备的空白溶液中，置于涡旋振荡器上处理１０ｓ，充分混匀。混匀过程中，加入１．０ｍＬ荧光胺溶液。将所得衍生物溶液过微孔滤膜，滤液待测。５．５　仪器参考条件ａ）　色谱柱：Ｃ１８柱（柱长２５０ｍｍ，内径４．６ｍｍ，粒径５μｍ），或同等性能的色谱柱。ｂ）流动相：甲醇磷酸盐缓冲溶液（７０＋３０，体积比）。ｃ）流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ。ｄ）进样量：１０μＬ。ｅ）柱温：室温。ｆ）荧光检测器：激发波长３９０ｎｍ，发射波长４８０ｎｍ。５．６　标准工作曲线的制作分别吸取上述标准系列的衍生溶液注入液相色谱仪中，按照５．５仪器参考条件测定相应的峰面积（１１氨基十一酸标准物质衍生物色谱图见附录Ａ），以标准工作液中１１氨基十一酸浓度为横坐标，以１１氨基十一酸峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线。５．７　试样溶液的测定按照５．５仪器参考条件，将试样的衍生溶液注入液相色谱仪中，以保留时间定性，同时记录峰面积，根据标准曲线得到待测液中１１氨基十一酸的浓度。６　分析结果的表述由标准曲线得到食品模拟物试液中１１氨基十一酸的浓度，按ＧＢ５００９．１５６进行迁移量计算，得到犌犅３１６０４．１３—２０１６４　　　　食品接触材料及制品中１１氨基十一酸的迁移量。计算结果保留至小数点后两位。７　精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的１０％。８　其他本标准的定量限：水基、酸性、酒精类食品模拟物中１１氨基十一酸定量限为０．８ｍｇ／Ｌ，油基食品模拟物中１１氨基十一酸定量限为０．８ｍｇ／ｋｇ。犌犅３１６０４．１３—２０１６５　　　　附　录　犃１１氨基十一酸标准物质衍生物色谱图犃．１　水中１１氨基十一酸标准物质衍生物的ＨＰＬＣ色谱图见图Ａ．１。图犃．１　水中１１氨基十一酸标准物质衍生物的犎犘犔犆色谱图犃．２　４％乙酸溶液中１１氨基十一酸标准物质衍生物的ＨＰＬＣ色谱图见图Ａ．２。图犃．２　４％乙酸溶液中１１氨基十一酸标准物质衍生物的犎犘犔犆色谱图犌犅３１６０４．１３—２０１６６　　　　犃．３　１０％乙醇溶液中１１氨基十一酸标准物质衍生物的ＨＰＬＣ色谱图见图Ａ．３。图犃．３　１０％乙醇溶液中１１氨基十一酸标准物质衍生物的犎犘犔犆色谱图犃．４　橄榄油中１１氨基十一酸标准物质衍生物的ＨＰＬＣ色谱图见图Ａ．４。图犃．４　橄榄油中１１氨基十一酸标准物质衍生物的犎犘犔犆色谱图