GBZ∕T 313.2-2018 尿中三甲基氯化锡的测定 第2部分气相色谱-质谱法

ICS13.100C52中华人民共和国国家职业卫生标准GBZ/T313.2—2018尿中三甲基氯化锡的测定第2部分：气相色谱-质谱法Determinationoftrimethyltinchloride(TMT)inurine——Part2:Gaschromatographic–massmethod2018-08-16发布2019-01-01实施中华人民共和国国家卫生健康委员会发布GBZ/T313.2—2018I前言根据《中华人民共和国职业病防治法》制定本标准。GBZ/T312《尿中三甲基氯化锡的测定》分为两个部分：——第1部分：气相色谱法；——第2部分：气相色谱-质谱法。本部分为GBZ/T313的第2部分。本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本部分起草单位：广东省职业病防治院、深圳市职业病防治院、深圳市罗湖区疾病预防控制中心、深圳市龙岗区疾病预防控制中心。本部分主要起草人：吴邦华、戎伟丰、易娟、赖少阳、刘丽、何嘉恒、吴川、蔡金敏、谢玉璇、刘奋、何俊涛、赖璟琦、张英、蔡志斌、刘渠、张文、林怡然、贠建培、张英。GBZ/T313.2—20181尿中三甲基氯化锡的测定第2部分：气相色谱-质谱法1范围GBZ/T313的本部分规定了测定尿中三甲基氯化锡的气相色谱-质谱法。本部分适用于职业接触人员尿中三甲基氯化锡的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GBZ/T295职业人群生物监测方法总则WS/T97尿中肌酐分光光度测定方法WS/T98尿中肌酐的反相高效液相色谱测定方法3原理尿中三甲基氯化锡用四乙基硼酸钠衍生成为三甲基乙基锡，经正己烷萃取，气相色谱-质谱检测，以保留时间和特征离子的丰度比值进行定性，用特征离子165m/z的离子丰度值（峰面积）定量。4仪器4.1具塞聚乙烯塑料瓶，50mL。4.2离心机，0r/min～3000r/min。4.3微量注射器，1μL、10μL、50μL、100μL。4.4具塞玻璃管：15mL，配有聚四氟乙烯密封盖。4.5旋涡振荡器。4.6气相色谱-质谱仪。仪器操作参考条件：a)色谱条件：——色谱柱：60m×0.32mm×1.0µm二苯基-95%二甲基硅氧烷共聚物（HP-5MS）；——柱温：初温50℃，以20℃/min升到200℃，保持1.0min；——汽化室温度：250℃；——柱流量：2.0mL/min；——分流比：5:1。b)质谱条件：——离子源：电子轰击离子源（EI）；GBZ/T313.2—20182——离子化能量：70eV；——离子源温度：230℃；——接口温度：260℃；——扫描模式：选择离子扫描模式，选择165m/z为定量离子，151m/z、165m/z、179m/z和194m/z为鉴定离子；——溶剂延迟时间：4.0min。5试剂5.1实验用水为去离子水。5.2三甲基氯化锡，优级纯（＞99.8%）。5.3四乙基硼酸钠，优级纯。5.4四氢呋喃，分析纯。5.5乙酸钠，分析纯。5.6冰醋酸，分析纯。5.7正己烷，色谱纯。5.8衍生剂：称取0.1g四乙基硼酸钠，加入10mL四氢呋喃溶解，配成1％四乙基硼酸钠-四氢呋喃溶液，该溶液置于4℃冰箱中避光保存，可稳定1个月。5.9缓冲液（pH4.0±0.2）：在120mL水中加入0.6g乙酸钠，再加1.4mL的冰醋酸。5.10标准溶液：于10mL容量瓶中，加入少量水，准确称量后，加入一定量的三甲基氯化锡，再准确称量，加水至刻度；由2次称量之差计算此溶液的浓度，为标准贮备液（浓度约为5mg/mL），此液在4℃冰箱内可储存6个月。临用前，用水稀释成50.0µg/mL三甲基氯化锡标准溶液。或购买经国家认证并授予标准物质证书的标准溶液物质。6样品的采集、运输和保存用具塞聚乙烯塑料瓶收集接触三甲基氯化锡工人的随机尿样50mL，于室温或冷藏运输，尽快置4℃冰箱中存放，样品可保存15d。7分析步骤7.1按WS/T97或WS/T98测定尿中肌酐浓度。7.2样品处理：将尿样摇匀，吸取5.0mL尿样到15mL具塞玻璃管中，分别加入5.0mL缓冲液、0.2mL衍生剂和1.0mL正己烷，于旋涡振荡器中振荡5min，静置或离心分层后取上层有机相1.0µL分析。若样品中三甲基氯化锡浓度超过测定范围，可用正己烷稀释后测定，计算时乘以稀释倍数。7.3试剂空白处理：用5.0mL水代替尿样，按样品同样处理，做试剂空白。GBZ/T313.2—201837.4标准系列溶液的配制与测定：在15mL的具塞玻璃管中加入5.0mL水，再加入标准溶液，配制成含量为0.0g～2.5g的三甲基氯化锡标准系列溶液，每个标准系列溶液中再加入5.0mL缓冲液、0.2mL衍生剂和1.0mL正己烷，于旋涡振荡器中振荡5min，静置或离心分层后取上层有机相1.0µL分析。参照仪器操作条件，将气相色谱-质谱仪调节至最佳测定状态，分别进样1.0µL的正己烷萃取液，测定各标准系列溶液。以测得的165m/z特征离子的离子丰度值（峰面积）对相应的三甲基氯化锡含量(g)绘制标准曲线或计算回归方程。7.5样品测定：用测定标准系列溶液的操作条件测定样品和试剂空白的165m/z的离子丰度值（峰面积），由标准曲线或回归方程得三甲基氯化锡的含量(g)。8计算按式（1）计算尿中三甲基氯化锡的浓度：kDVmC1000………………………………………………(1)式中：C——尿中三甲基氯化锡的浓度，单位为微克每克肌酐（g/g肌酐）；m——尿中三甲基氯化锡的含量（减去试剂空白），单位为微克（g）；V——取尿样的体积，单位为毫升（mL）；D——尿中三甲基氯化锡的回收率，%；K——尿肌酐浓度，单位为克每升（g/L）。9说明9.1本法的检出限为0.0025g，定量下限为0.0125g，最低检出浓度为0.5g/L(以取尿样5.0mL计)，最低定量浓度为2.5g/L(以取尿样5.0mL计)。测定范围为0.0025µg～2.5000µg，相对标准偏差为0.6%～4.4%。9.2本法平均回收率为95.2%。9.3本法可采用性能类似的其他毛细管色谱柱。9.4尿中与三甲基氯化锡共存的二甲基二氯化锡、甲基三氯化锡对测定不干扰。9.5尿样采集没有时间限制，三甲基氯化锡经尿液排泄较缓慢和恒定，可以采集接触工人的随机尿进行检测。9.6检测的质量保证遵守GBZ/T295。9.7色谱图、质谱图见图1～图3。GBZ/T313.2—20184注：1——三甲基乙基锡（4.98min）；2——二甲基二乙基锡（5.98min）；3——三乙基甲基锡（6.98min）。图1三甲基氯化锡衍生物、二甲基二氯化锡衍生物和甲基三氯化锡衍生物的分离图图2三甲基氯化锡的质谱图图3三甲基氯化锡衍生物三甲基乙基锡的质谱图_________________________________123