GBZ∕T 311-2018 尿中甲苯二胺的测定 气相色谱法

ICS13.100C52中华人民共和国国家职业卫生标准GBZ/T311—2018尿中甲苯二胺的测定气相色谱法Determinationoftolylenediamineinurine—Gaschromatographymethod2018-08-16发布2019-01-01实施中华人民共和国国家卫生健康委员会发布GBZ/T311—2018I前言根据《中华人民共和国职业病防治法》制定本标准。本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准起草单位：天津市疾病预防控制中心、江苏省无锡市职业病防治医院、深圳市职业病防治院、河南省职业病防治研究院、新乡市职业病防治研究所。本标准主要起草人：杨德一、缪荣明、赵淑岚、张万超、刘保峰、张明、李添娣、何俊涛、赵欣、肖庆峰、刘凌、刘静。GBZ/T311—20181尿中甲苯二胺的测定气相色谱法1范围本标准规定了测定尿中甲苯二胺的气相色谱法。本标准适用于职业接触人员尿中甲苯二胺的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法WS/T97尿中肌酐分光光度测定方法WS/T98尿中肌酐的反相高效液相色谱测定方法3原理尿液样品（以下称尿样）中甲苯二胺(Toluenediamine，TDA)的螯合物加硫酸加热水解成TDA，在碱性条件下用甲苯萃取，用七氟丁酸酐衍生化后，经极性毛细管色谱柱分离，电子捕获检测器（ECD）检测，以保留时间定性，峰面积定量。4仪器4.1漩涡混匀器。4.2离心机。4.3恒温水浴锅。4.4气相色谱仪，电子捕获检测器。仪器操作参考条件：a)色谱柱：Rtx-50，30m×0.25mm×0.25µm；b)柱温：160℃；c)汽化室温度：290℃；d)检测器温度：320℃；e)载气流量：1.00mL/min；f)分流比：20﹕1。5试剂GBZ/T311—201825.1实验用水：按照GB/T6682执行。5.22,4-TDA，色谱纯。5.3甲苯，色谱纯。5.4七氟丁酸酐，98%。5.5氢氧化钠溶液，450g/L。5.6盐酸溶液，1.0mol/L。5.7硫酸溶液，3.0mol/L。5.8缓冲溶液：称取27.2g磷酸二氢钾，用200mL水溶解，用氢氧化钠溶液调节pH至7.0。5.92,4-TDA标准贮备液：准确称取0.0500g2,4-TDA置于50mL容量瓶中，用盐酸溶液溶解并定容至刻度，配制成浓度为1.0mg/mL的标准贮备液。5.102,4-TDA标准溶液：用盐酸溶液稀释2,4-TDA标准贮备液，配制成浓度为0.040µg/mL的标准溶液。6样品的采集、运输和保存6.1环境条件：采尿场所应干净、整洁，无甲苯二异氰酸酯（TDI）污染源。6.2样品采集：用清洁的聚乙烯塑料瓶采集班末尿样，尿样的采集应大于50mL。必要时采集双份样品，一份作为备份样品。6.3样品空白：随机抽取与样品采集同批号的采尿瓶2份，作为样品空白。6.4样品运输：将采集后的样品和样品空白置于清洁容器中4℃冷藏运输。6.5样品保存：样品在-20℃下可保存7d。7分析步骤7.1按照肌酐测定法（见WS/T97或WS/T98），尽快测定尿中肌酐浓度。7.2样品处理：吸取2.0mL尿样于10mL离心管中，加1.5mL硫酸溶液，摇匀，盖好，放置于沸水浴加热8h，取出冷却至室温，加5mL氢氧化钠溶液混匀，加2.0mL甲苯，振摇2min，于1500r/min离心10min。取出约1.5mL甲苯层，放入另一离心管中，加20.0L七氟丁酸酐，振摇2min，放置5min，加1.0mL缓冲液，振摇2min，以除去过剩的七氟丁酸酐，放置2min，取甲苯层进样测定。7.3标准曲线绘制：取5支具塞比色管，分别加入0.00mL、0.50mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL标准溶液，各加盐酸溶液至2.00mL，配成0.000µg/mL、0.010µg/mL、0.020µg/mL、0.030µg/mL、0.040µg/mL标准系列。除加热外，标准系列处理过程同样品。参照仪器操作条件，将气相色谱仪调节至最佳测定状态，取1.0L甲苯层进样，测定标准系列，每个浓度重复测定3次，以峰面积均值对TDA浓度(g/mL)绘制标准曲线。GBZ/T311—201837.4样品测定：取处理过的样品的甲苯层1.0L进样，根据测得的峰面积由标准曲线计算出TDA的浓度。8计算按式（1）计算尿中甲苯二胺的浓度：21ccC........................................(1)式中：C—尿中TDA的浓度，单位为微克每毫克肌酐（μg/mg肌酐）；c1—从标准曲线上查得的尿样品溶液中TDA的浓度，单位为微克每毫升（g/mL）；c2—尿肌酐浓度，单位为克每升（g/L）。9说明9.1本法的检出限为0.0006µg/mL；线性范围为0.002µg/mL～0.040µg/mL。9.2采样后，应尽快测定尿肌酐浓度。9.3色谱标准图见图1。注：1—甲苯；2—2,4-TDA。图1色谱标准图