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Introductionofhistology组织学绪论Departmentofhistologyandembryologyshanximedicaluniversity山西医科大学组织学与胚胎学教研室Jingya景雅组织学绪论一、组织学学科特点形态学科,显微解剖学研究机体(细胞、组织、器官)微细结构与功能的关系toolslightmicroscopeelectronmicroscopehistologyconfocalmicroscopelightmicroscope光镜结构mastcellsFigure4-29.Electronmicrographofpancreaticacinarcell:condensingvacuole(C),receivingasmallquantityofsecretoryproduct(arrow)fromavesiclemadeintheGolgicomplex(G).M,mitochondrion;RER,roughendoplasmicreticulum;S,maturecondensedsecretory(zymogen)granule.x40,000.透射电子显微镜电镜结构激光共聚焦扫描显微镜confocallaserscanningmicroscope,CLSM激光光源扫描聚焦定位准确标本荧光标记荧光图像清晰计算机图像处理二、组织学研究内容组织学研究三层次细胞水平组织水平器官水平(一)、细胞水平研究细胞是机体结构和功能的基本单位,数量、种类多,形态各异,形态决定功能,不同形态细胞具有不同功能。根据形态学特点判断细胞功能。细胞水平:光镜细胞形态,在组织中排列方式核形态,(判断细胞形态依据)细胞质染色:嗜酸性或嗜碱性细胞水平:电镜细胞膜细胞器:种类数量特殊结构:微绒毛,纤毛,突起RER,golgicomplex,SER线粒体,lysosome,分泌颗粒Ribosome细胞核:常染色质,异染色质(二)组织水平研究细胞是机体结构和功能单位,但在多细胞生物,没有细胞之间的相互配合,细胞无法完成其功能。细胞要发挥其功能,必须组织在一起,构成特定的细胞群体,才能完成相应的功能。这种特定的细胞群体就是组织。形态或功能相互关联的细胞由细胞外基质结合在一起,构成执行一定功能的细胞群体称组织。tissuesarecomposedofaggregatesorgroupsofcellsandextracellularmatrixorganizedtoperformoneormorespecificfunctionstissue细胞形态或功能相互关联的细胞组织在一起,执行该组织的功能合成该组织的细胞外基质extracellularmatrixfiber-纤维groundsubstancetissuefluid(三)、器官水平研究根据形态和功能不同,构成人体不同器官的组织分四种,称四种基本组织四种基本组织上皮组织结缔组织肌组织神经组织以不同比例与方式结合形成不同器官和系统despiteitscomplicaxity,humanbodiscomposedoffourbasictissuetypes根据细胞排列方式识别组织,组织在器官中的分布特点识别器官。上皮组织:细胞排列紧密,细胞外基质很少结缔组织:细胞种类多,排列稀疏,大量细胞外基质肌组织:细胞长纤维状骨骼肌平滑肌神经组织:细胞突起多,无细胞外基质三、组织学研究常用方法(一)光镜石蜡切片应用光学显微镜观察组织切片是研究组织学常用方法,经常观察的是石蜡包埋后的组织切片,基本原理:用石蜡取代组织中水分,使组织具有一定硬度,便于切片。1.取材、固定5mm3固定常用固定液:乙醇、甲醛防止腐败、自溶、尽量使组织结构保持在生活状态2.脱水、透明脱水:乙醇置换组织中水分透明:二甲苯置换组织中乙醇3.浸蜡、包埋浸蜡:石蜡置换二甲苯组织有硬度包埋:形成石蜡包埋块,便于切片4.切片石蜡切片机厚度:5--10μm切片机microtomeglassslidetissueblockparaffinknifetissuesection(二)、常用染色方法未经染色切片无反差,无法观察,染色后便于观察,常用染料为有机化合物,分两类:染料酸性染料:伊红Eosin:carriesanetnegativecharge碱性染料:苏木精Hematoxylin:carriesanetpositivecharge嗜酸性(Acidophilia):组织细胞对酸性染料亲和力强嗜碱性(Basophilia):组织细胞对碱性染料亲和力强中性(Neutrophilia):对碱性和酸性染料亲和力都不强affinitiesfordyesreflectcellmorphologicalandfunctioncharacteristics1.H.E染色苏木精:核紫蓝色,核糖体,RER伊红:胞质粉红色,线粒体,分泌颗粒2.组织化学(histochemistry):通过化学或物理反应原理显示组织或细胞内化学成分,通常是使其形成有色终末产物,以便在镜下观察,可进行定位和定量PAS反应(periodicacid-schiffreaction)显示多糖,糖原、蛋白多糖多糖乙二醇基过碘酸氧化HIO4乙二醛基+亚硫酸品红紫红色沉淀PASreactionH.Ecounterstaining3.Immunohistochemistry利用抗原抗体反应原理,检测组织细胞内多肽、蛋白质的技术。特点:灵敏度高、特异性强Antigen:组织内待测物质Antibody和抗原特异结合可以被标记荧光素铁蛋白过氧化物酶特异抗原刺激后浆细胞产生提取抗原注射抗原标记染色提取抗体(三)电子显微镜术1.transmissionelectronmicroscopy取材:组织小,取材快固定:戊二醛。锇酸脱水:丙酮包埋:环氧树脂切片:超薄切片机,50-80nm重金属盐染色:柠檬酸铅,醋酸铀观察:黑白图像macrophage电子密度高:重金属盐染色深电子密度低:重金属盐染色浅2.scanningelectronmicroscope扫描电镜取材,固定,脱水,干燥,表面喷碳膜、金属膜扫描电镜观察:表面立体结构pseudostratifiedciliatedcolumnarepithelium
本文标题:组织学绪论1
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