DB34T 3102-2018 饲料中磺酰脲类除草剂的测定 液相色谱串联质谱法

ICS 65.100B25DB34安徽省地方标准DB34/T3102—2018饲料中磺酰脲类除草剂的测定液相色谱串联质谱法DeterminationofsulfonylureaherbicidesresiduesinfeedsHPLCLC/MS/MSmethod文稿版次选择2018-04-16发布2018-05-16实施安徽省质量技术监督局发布DB34/T3102—2018I前  言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由安徽省食品药品检验研究院（国家农副加工食品质量监督检验中心）提出。本标准由安徽省动植物检验检疫标准化技术委员会归口。本标准起草单位：安徽省食品药品检验研究院（国家农副加工食品质量监督检验中心）、安徽省检验检疫科学技术研究院、上海出入境检验检疫局。本标准主要起草人：丁磊、程浩、周晓莹、余晓娟、王欣、宋伟、吕亚宁、周典兵、韩芳、胡艳云、罗纪军、邓晓军、盛旋、郑平。DB34/T3102—20181饲料中磺酰脲类除草剂的测定液相色谱串联质谱法1范围本标准规定了饲料中烟嘧磺隆、甲酰胺磺隆、环氧嘧磺隆、甲基噻吩磺隆、甲磺隆、醚磺隆、醚苯磺隆、氯磺隆、胺苯磺隆、四唑嘧磺隆、甲磺胺磺隆、三氟啶磺隆、丙苯磺隆、氟磺隆、吡啶磺隆、氯嘧磺隆、乙氧嘧磺隆、氟胺磺隆、甲基氟嘧磺隆、环丙嘧磺隆等20种磺酰脲类除草剂残留量的液相色谱串联质谱法。本标准适用于配合饲料、浓缩饲料及添加剂预混合饲料中烟嘧磺隆等20种磺酰脲类除草剂的检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T14699.1饲料采样3方法原理样品中磺酰脲类除草剂经丙酮提取，采用凝胶渗透色谱仪净化，液相色谱串联质谱法测定，外标法定量。4试剂和材料除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水应符合GB/Ｔ6682规定的一级水。4.1乙腈：色谱纯。4.2丙酮：色谱纯。4.3甲酸：色谱纯。4.4环己烷：色谱纯。4.5乙酸乙酯：色谱纯。4.6氯化钠：分析纯。4.7乙酸乙酯-环己烷（1：1，体积比）：等体积的乙酸乙酯和环己烷互溶。4.8标准物质：烟嘧磺隆、甲酰胺磺隆、环氧嘧磺隆、甲基噻吩磺隆、甲磺隆、醚磺隆、醚苯磺隆、氯磺隆、胺苯磺隆、四唑嘧磺隆、甲磺胺磺隆、三氟啶磺隆、丙苯磺隆、氟磺隆、吡啶磺隆、氯嘧磺隆、乙氧嘧磺隆、氟胺磺隆、甲基氟嘧磺隆和环丙嘧磺隆纯度≥95％。4.9标准储备溶液——分别称取10mg（精确至0.1mg）标准物质（4.8）于10mL容量瓶中，用乙腈（4.1）溶解并定容，配制成浓度为1000mg/L的标准储备溶液。DB34/T3102—20182——在0℃～4℃冰箱中可以保存12个月。4.100.22μm有机滤膜。5仪器和设备5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源(ESI)。5.2凝胶渗透色谱仪。5.3分析天平：感量0.1mg和0.01g。5.4匀浆机。5.5离心机。5.6氮吹浓缩仪。5.7涡旋混合器。5.8超声波清洗器。5.9超纯水系统。6试样制备与保存按照GB/T14699.1的规定执行，取有代表性的样品，四分法缩减取约200g，经粉碎，混匀装入磨口瓶中备用。7分析步骤7.1提取称取5g（精确至0.01g）样品于50mL离心管中，先加入10mL水，静置2h，涡旋振荡后加入20mL丙酮，10000r/min均质提取1min，加入10g氯化钠，涡旋1min后，8000r/min离心5min，吸取丙酮层于100mL旋蒸瓶中，用10mL丙酮重复提取一次，合并两次提取液，于45℃水浴下旋转蒸发干，用10mL乙酸乙酯-环己烷（4.7）溶解残渣待净化。7.2净化7.2.1凝胶色谱条件凝胶色谱条件如下：a)净化柱：S-X3Bio-Beads填料，粒度38μm～75μm，300mm×25mm（内径），或相当者；b)流动相：乙酸乙酯-环己烷（4.7），流速5mL/min；c)进样量：5mL；d)净化程序：0min～19min弃去淋洗液，19min～27min收集淋洗液。7.2.2净化过程5mL乙酸乙酯-环己烷（4.7）溶解液进凝胶色谱系统，按照7.2.1的条件净化。将收集的洗脱液于45℃水浴中浓缩至干，准确加入2mL初始流动相溶解残渣，经0.22μm有机滤膜（4.10）过滤供液相色谱-质谱/质谱仪测定。8测定DB34/T3102—201838.1液相色谱条件液相色谱条件如下：a)色谱柱：C18100mm×2.1mm，1.8μm，或相当者；b)柱温箱温度：40℃；c)进样量：10μL；d)流动相梯度及流速见表1。表1液相色谱梯度洗脱条件时间/(min)流速/（mL/min）0.1％甲酸水溶液/(％)乙腈/(％)0.000.39552.000.39555.000.390107.000.3703012.000.3604014.000.3406016.000.3109018.000.3109018.010.395520.000.39558.2质谱条件质谱条件如下：a)离子源：电喷雾离子源（ESI）；b)扫描方式：正离子扫描；c)检测方式：多反应监测（MRM）；d)其他参考质谱条件参见附录A中表A.1。8.3标准曲线的绘制取空白样品按照7.1和7.2处理，用所得的样品溶液将磺酰脲类标准储备溶液（4.9）逐级稀释得到的浓度为1.0μg/L、2.0μg/L、5.0μg/L、10.0μg/L、50.0μg/L的基质标准工作液，浓度由低到高进样检测，以定量子离子峰面积-浓度作图，得到标准曲线回归方程。8.4定量测定及定性判定按照液相色谱串联质谱条件测定样品和基质标准工作溶液。基质标准工作液和待测液中待测物的响应值应在仪器线性响应范围内。若响应值超出线性范围，应用空白基质样液将其稀释至线性范围内进行定量测定。按照上述条件测定试样和基质标准工作溶液，如果试样中的质量色谱峰保留时间与标准工作溶液一致（变化范围±2.5％之内）；样品中目标化合物的两个子离子的相对丰度与浓度相当标准溶液的相对丰度一致，相对丰度偏差不超过表2的规定，则可定性判定该目标物，磺酰脲类除草剂总离子色谱图见附录B中图B.1。DB34/T3102—20184表2定性离子相对丰度的最大允许偏差相对离子丰度＞50％＞20％～50％＞10％～20％≤10％允许的相对偏差±20％±25％±30％±50％8.5空白试验除不加试样外，按上述分析步骤进行。8.6平行试验按以上步骤对同一试样进行平行试验。9结果计算和表述按公式（1）计算试样中残留的含量，计算结果需扣除空白值。FmAsiVciAiXi..................................(1)式中：Xi——试样中被测组分残留量，单位为微克每千克（μg/kg）；ci——标准溶液中被测组分的浓度，单位为微克每升（μg/L）；Ai——测定液中被测组分的峰面积；Asi——标准液中被测组分的峰面积；V——样品溶液最终定容体积，单位为毫升（mL）；F——稀释倍数；m——试样的质量，单位为克（g）。10定量限本标准中醚苯磺隆、氯磺隆、四唑嘧磺隆、三氟啶磺隆、甲基氟嘧磺隆、丙苯磺隆定量限为1.0μg/kg,烟嘧磺隆、甲酰胺磺隆、环氧嘧磺隆、甲基噻吩磺隆、甲磺隆、醚磺隆、胺苯磺隆、甲磺胺磺隆、氟磺隆、吡啶磺隆、氯嘧磺隆、乙氧嘧磺隆、氟胺磺隆、环丙嘧磺隆定量限为0.5μg/kg。11精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20％。DB34/T3102—20185AA附录A（资料性附录）参考质谱条件参考质谱条件：a)干燥器温度：350℃；b)干燥器流速：8L/min；c)鞘气温度：350℃；d)鞘气流速：12L/min；e)毛细管电压：3500V；f)碰撞气：高纯氮气；g)其他质谱参数见表A.1。表A.120种磺酰脲类除草剂英文名称、CAS号、参考保留时间、监测离子对和碰撞能量名称英文名称CAS号保留时间/mim监测离子对（m/z）碰撞能量/eV烟嘧磺隆NicosulfuronCA155150009.604411.2/213.110411.2/182.1※15甲酰胺磺隆ForamsulfuronC1390500010.104453.2/272.15453.2/182.0※20环氧嘧磺隆Oxasulfuron144651-06-910.394407.1/284.010407.1/150.1※15甲基噻吩磺隆Thifensulfuron-methyl79277-27-310.566388.1/167.1※10388.1/141.215甲磺隆Metsulfuron-methyl74223-64-611.013382.1/167.1※10382.1/141.215醚磺隆Cinosulfuron94593-91-611.051414.2/183.1※10414.2/157.120醚苯磺隆Triasulfuron82097-50-511.598402.1/167.215402.1/141.2※15氯磺隆Chlorsulfuron64902-72-311.713358.2/141.1※15358.2/167.115胺苯磺隆Ethametsulfuron-methyl97780-06-812.175411.2/196.1※10411.2/168.120四唑嘧磺隆Azimsulfuron120162-55-212.643425.2/182.2※15425.2/156.120甲磺胺磺隆Mesosulfuron-methyl208465-21-812.763504.1/182.1※20504.1/306.220三氟啶磺隆Trifloxysulfuron145099-21-412.813460.1/178.1※15460.1/279.115DB34/T3102—20186表A.1（续）名称英文名称CAS号保留时间/mim监测离子对（m/z）碰撞能量/eV丙苯磺隆propoxycarbazone181274-15-713.294421.1/180.1※10421.1/264.010氟磺隆Prosulfuron94125-34-514.791420.1/141.2※15420.1/167.115吡啶磺隆Pyrazosulfuron-ethyl93697-74-614.840415.1/182.1※15415.1/186.115氯嘧磺隆Chlorimuron-ethyl90982-32-415.060415.1/186.1※15415.1/213.010乙氧嘧磺隆Ethoxysulfuron126801-58-915.072399.2/261.1※10399.2/218.120氟胺磺隆Triflusulfuron-methyl126535-15-715.326493.1/264.2※15493.1/238.125甲基氟嘧磺隆Primisulfuron-methyl86209-51-015.367469.1/254.0※15469.1/199.120环丙嘧磺隆Cyclosulfamuron136849-15-515.474422.1/261.1※10421.1/218.120注：※为定量离子对，对于不同质谱仪器，仪器参数可能存在差异，测定前应将质谱参数优化到最佳。DB34/T3102—20187BB附录B（资料性附录）磺酰脲类除草剂总离子色谱图磺酰脲类除草剂总离子色谱图见图B.1。5678910111213141516171819200.02.0x1044.0x1046.0x1048.0x1041.0x1051.2x1051.4x1051.6x105TIC离子强度（cps）T(min)图B.120种磺酰脲类除草剂多反应监测质谱图注：19.604min烟嘧磺隆、10.104min甲酰胺磺隆、10.394min环氧嘧磺隆、10.566min甲基噻吩磺隆、11.013min甲磺隆、1