GBT 17336-1998 食品中红曲色素的测定

GB/T17336—1998前言红曲色素作为食品着色剂已经列入GB2760—1996食品添加剂使用卫生标准，按正常需要量加入。目前未发现国内外食品中红曲色素的薄层层析检测方法，我们选用先制定标准TLC板，柱层去掉干扰物，本法快速、准确。本标准由中华人民共和国卫生部提出。本标准起草单位：中国预防医学科学院劳动卫生与职业病研究所、卫生部食品卫生监督检验所和中国药品生物制品检定所。本标准起草人：李严巍、王梅、鲁雁飞、杨祖英、刘宝灵。本标准由卫生部委托技术归口单位中国预防医学科学院负责解释。中华人民共和国国家标准食品中红曲色素的测定DeterminationofmonascascoloursinfoodsGB/T17336—19981范围本标准规定了用薄层层析方法测定食品中红曲色素。本标准适用于食品中红曲色素的测定。2原理样品中红曲色素经提取，净化后，TLC分离，与标准TLC板比较定性，选用分配系数在两相中不同而达到分离的目的。3试剂3．1硅胶：柱层析用，120～180目。3．2奎胶GF254。3．3甲醇。3．4正己烷﹕醋酸乙酯﹕甲醇（5﹕3﹕2）。3．5氯仿﹕甲醇（8﹕3）。3．6海沙：先用1﹕10盐酸煮沸15min，用水洗至中性，再于105℃干燥，贮于具塞的玻璃瓶中，备用。3．7石油醚：沸程60～90℃。3．8红曲色素的标准溶液：取1g红曲色素，加入30mL甲醇溶解，然后加入5g硅胶，拌匀，装入50g硅胶层析柱中（湿法装柱），将拌有硅胶的红曲色素装在柱项，后用甲醇洗脱；直至洗脱下来的甲醇无色为止，然后减压浓缩至膏状，于60～70℃烘箱中烘干，约剩下0.89g的红曲色素作为薄层分析用标准品。用甲醇配成1mg/mL的标准溶液。3．9红曲色素标准使用液：临用时吸取标准溶液5.0mL，置于50mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，此溶液每毫升相当于0.1mg红曲色素。4仪器4．1微量注射器10μL。中华人民共和国卫生部1998—04—20批准1999—01—01实施中华人民共和国卫生部1998—04—20批准1999—01—01实施GB/T17336—19984．2展开槽25cm×6cm×4cm。4．3薄层板：市售预制硅胶GF254板。4．4层析柱。4．5接收瓶。4．6全玻璃浓缩器。4．7真空泵。5操作方法5．1样品处理5．1．1配制酒：取10mL样品，于水浴上挥干，加少量乙醇溶解残渣，进行薄层分析。5．1．2蛋糕：取30.0g蛋糕，搅碎，加海沙少许，混匀，用热风机吹干样品即可，加入30mL石油醚去脂肪，重复3～5次，弃去石油醚，然后将蛋糕渣放入通风橱中，残余石油醚自然挥除后，放入蒸馏瓶中，加95%乙醇约90mL，回流30min，过滤，用乙醇洗涤5次，合并提取液，将提取液浓缩至20mL。此液留作测定用。5．1．3市售豆腐乳：取豆腐乳30g，搅碎，加95%的乙醇50～70mL，提取回流30min，过滤，用乙醇洗涤残渣5次，合并乙醇提取液，减压浓缩至20mL，此液留作测定用。5．1．4火腿肠：称取30g火腿肠，捣碎，加海沙少许，混匀，每次加入50mL石油醚提取脂肪，共提取三次，每次提取45min，过滤，滤液弃去，残渣放通风橱中，用吹风机吹干，用50mL甲醇提取红曲色素30min，共3次，过滤，合并滤液，滤液中加入3mL的钨酸钠溶液沉淀蛋白，弃去蛋白，滤液减压浓缩至10mL，此液供测定用。5．2测定5．2．1点样：取市售硅胶GF254板（4cm×20cm），离底边2cm处，点上述样品溶液10μL，同时在右边点2μL色素标准溶液。5．2．2展开：将5.2.1已点上样品与标准品的二块板，分别放入试剂“3.3”和“3.4”中展开，待展开剂前沿至15cm处，取出，放入通风橱，晾干，在UV254nm下观察，试剂“3.3”得到4个点，Rf值分别分0.86，0.71，0.54，0.38，试剂“3.4”得到3个点，Rf值分别为0.86，0.69，0.57。样品与标品的斑点的Rf值一致。则证明样品的色素为红曲色素。中华人民共和国卫生部1998—04—20批准1999—01—01实施中华人民共和国卫生部1998—04—20批准1999—01—01实施