HJ 1071-2019 水质 草甘膦的测定 高效液相色谱法

中华人民共和国国家环境保护标准HJ1071-2019水质草甘膦的测定高效液相色谱法Waterquality—Determinationofglyphosate—Highperformanceliquidchromatography（发布稿）本电子版为发布稿。请以中国环境出版集团出版的正式标准文本为准。2019-12-31发布2020-06-30实施生态环境部发布i目次前言...............................................................................................................................................ii1适用范围.....................................................................................................................................12规范性引用文件.........................................................................................................................13方法原理.....................................................................................................................................14干扰和消除.................................................................................................................................15试剂和材料.................................................................................................................................16仪器和设备.................................................................................................................................27样品.............................................................................................................................................38分析步骤.....................................................................................................................................39结果计算与表示.........................................................................................................................410精密度和准确度.......................................................................................................................511质量保证和质量控制...............................................................................................................612废物处理...................................................................................................................................7ii前言为贯彻《中华人民共和国环境保护法》和《中华人民共和国水污染防治法》，保护生态环境，保障人体健康，规范水中草甘膦的测定方法，制定本标准。本标准规定了测定地表水、地下水、生活污水和工业废水中草甘膦的高效液相色谱法。本标准为首次发布。本标准由生态环境部生态环境监测司、法规与标准司组织制订。本标准起草单位：生态环境部南京环境科学研究所。本标准验证单位：江苏省环境监测中心、安徽省生态环境监测中心、江苏省南京环境监测中心、江苏省常州环境监测中心、江苏省无锡环境监测中心和江苏省泰州环境监测中心。本标准生态环境部2019年12月31日批准。本标准自2020年6月30日起实施。本标准由生态环境部解释。1水质草甘膦的测定高效液相色谱法警告：实验中使用的部分溶剂及标准品具有一定的毒性，试剂配制和样品前处理过程应在通风橱中进行，操作时应按规定要求佩戴防护器具，避免接触皮肤和衣物。1适用范围本标准规定了测定水中草甘膦的高效液相色谱法。本标准适用于地表水、地下水、生活污水和工业废水中草甘膦的测定。当进样体积为20μl时，方法的检出限为2μg/L，测定下限为8μg/L。2规范性引用文件本标准引用了下列文件或其中的条款。凡是不注日期的引用文件，其有效版本适用于本标准。HJ91.1污水监测技术规范HJ/T91地表水和污水监测技术规范HJ/T164地下水环境监测技术规范3方法原理样品在pH为4～9的条件下加入二水合柠檬酸三钠，经过滤或固相萃取净化后与9-芴甲基氯甲酸酯（FMOC-Cl）进行衍生化反应，生成的荧光产物经二氯甲烷萃取净化去除衍生化副产物后，用具有荧光检测器的高效液相色谱分离检测。以保留时间和特征波长定性，外标法定量。4干扰和消除样品中的金属离子会与草甘膦形成稳定的络合物从而干扰草甘膦的测定，可通过加入二水合柠檬酸三钠消除干扰。5试剂和材料除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为无目标化合物检出的去离子水。5.1乙腈（CH3CN）：色谱纯。5.2甲醇（CH3OH）：色谱纯。5.3二氯甲烷（CH2Cl2）：色谱纯。25.4盐酸：ρ（HCl）=1.19g/ml，优级纯。5.5磷酸：ρ（H3PO4）=1.69g/ml，优级纯。5.6氢氧化钠（NaOH）。5.7盐酸溶液：1+1。量取50ml盐酸（5.4），缓慢加入到50ml水中。5.8氢氧化钠溶液：c（NaOH）＝0.1mol/L。称取0.4g氢氧化钠（5.6）溶于少量水中，定容至100ml。5.9磷酸溶液：φ（H3PO4）=0.2%。取2.0ml磷酸（5.5）于1000ml容量瓶中，用水稀释定容至标线，混匀。5.10二水合柠檬酸三钠（Na3C6H5O7·2H2O）。5.11十水合四硼酸钠（Na2B4O7·10H2O）。5.12四硼酸钠溶液：c（Na2B4O7）=0.05mol/L。称取1.91g十水合四硼酸钠（5.11）溶于少量水中，定容至100ml。5.139-芴甲基氯甲酸酯（C15H11ClO2）标准品：纯度不低于99.0%，4℃以下避光冷藏。5.149-芴甲基氯甲酸酯乙腈溶液：ρ（C15H11ClO2）=1000mg/L。称取50mg9-芴甲基氯甲酸酯标准品（5.13），用少量乙腈（5.1）溶解，转移至50ml容量瓶中，用乙腈（5.1）稀释定容至标线，混匀。4℃以下避光冷藏，保质期3个月。5.15草甘膦（C3H8NO5P）标准品：纯度不低于99.0%，4℃以下避光冷藏。5.16草甘膦标准贮备液：ρ（C3H8NO5P）=1000mg/L。准确称取50.0mg草甘膦标准品（5.15），溶于少量水中，转移至50ml容量瓶中，用水稀释定容至标线，混匀。4℃以下避光冷藏，保质期6个月，或直接购买有证标准溶液。5.17草甘膦标准使用液：ρ（C3H8NO5P）=10.0mg/L。移取适量草甘膦标准贮备液（5.16），用水稀释，配制浓度为10.0mg/L的草甘膦标准使用液。4℃以下避光冷藏，保质期2个月。5.18滤膜：0.45µm，亲水性聚丙烯、玻璃纤维、亲水性聚四氟乙烯或其他等效材质。6仪器和设备6.1高效液相色谱仪（HPLC）：具有荧光检测器。6.2色谱柱：填料粒径为5μm，柱长250mm，内径4.6mm的十八烷基键合硅胶（C18）反相色谱柱，或其它性能相近的色谱柱。6.3固相萃取柱：填料为二乙烯基苯和N-乙烯基吡咯烷酮共聚物或十八烷基硅胶的萃取柱，或同等柱效的萃取柱，规格为500mg/6ml。6.4聚乙烯塑料（PE）管：10ml。6.5水平振荡器。6.6涡旋振荡器。6.7棕色采样瓶：250ml或500ml带聚四氟乙烯衬垫的螺旋盖玻璃瓶或磨口瓶。6.8棕色样品瓶：2.0ml带聚四氟乙烯衬垫的螺旋盖玻璃瓶。6.9一般实验室常用仪器和设备。37样品7.1样品采集和保存按照HJ91.1、HJ/T91和HJ/T164的相关规定进行样品的采集。用棕色采样瓶（6.7）采集样品，样品满瓶采集。若采集的样品pH不在4～9之间，用盐酸溶液（5.7）或氢氧化钠溶液（5.8）调节其pH至4～9，4℃以下冷藏、避光保存，7d内完成样品分析工作。7.2试样的制备7.2.1固相萃取净化依次用6ml甲醇（5.2）和6ml水活化固相萃取柱（6.3），保证小柱柱头浸润。量取10ml样品，加入29.3mg二水合柠檬酸三钠（5.10），混匀后以约3ml/min（约1滴/秒）的流速通过固相萃取柱，收集净化后的样品，待衍生。注1：对于清洁度较好的，对目标化合物测定没有明显干扰的样品，可加入二水合柠檬酸三钠（5.10）后直接经滤膜（5.18）过滤，待衍生。注2：若样品浓度较高，先将样品稀释后加入二水合柠檬酸三钠（5.10）再进行固相萃取净化，待衍生。7.2.2衍生化反应取2.00ml净化后的样品于聚乙烯塑料（PE）管（6.4）中，加入0.50ml四硼酸钠溶液（5.12），1.00ml9-芴甲基氯甲酸酯乙腈溶液（5.14），充分混匀后置于水平振荡器（6.5）上，40℃下衍生1h。7.2.3液液萃取净化在衍生后的样品中加入5ml二氯甲烷（5.3），置于涡旋振荡器（6.6）上涡旋萃取2min，取水相层，经滤膜（5.18）过滤，收集1ml滤液于棕色样品瓶（6.8）中，待测。7.3空白试样的制备用实验用水代替样品，按照与试样的制备（7.2）相同步骤进行实验室空白试样的制备。8分析步骤8.1液相色谱参考条件流动相A：乙腈（5.1），流动相B：磷酸溶液（5.9），梯度洗脱程序见表1；流速：1.0ml/min；柱温：30℃；进样量：20μl；激发波长：254nm；发射波长：以302nm作为检测波长，以315nm作为辅助定性波长。4表1梯度洗脱程序时间（min）流动相A（%）流动相B（%）03565102575158020203565253565注：15min～20min用于清洗色谱柱，清洗时间可根据实际样品的复杂程度进行调整。20min～25min为色谱柱的平衡时间。8.2工作曲线的建立分别取适量的草甘膦标准使用液（5.17），用水稀释，制备至少5个浓度点的标准系列，草甘膦的质量浓度分别为0μg/L、10μg/L、20μg/L、50μg/L、100μg/L、200μg/L、500μg/L（此为参考浓度）。按7.2.2步骤进行衍生化反应，按7.2.3步骤液液萃取净化，然后按仪器参考条件（8.1），由