SZDBZ 348-2019 食品中脂溶性色素的测定 超高效液相色谱串联质谱法

ICS67.050X04SZDB/Z深圳市标准化指导性技术文件SZDB/Z348—2019食品中脂溶性色素的测定超高效液相色谱串联质谱法DeterminationofLipid-solublepigmentsinFoodsUltraPerformanceLiquidChromatographyTandemMassSpectrometry2019-01-28发布2019-03-01实施深圳市市场和质量监督管理委员会发布SZDB/Z348—2019I目次前言......................................................................................................................................................II1范围..................................................................................................................................................12规范性引用文件..............................................................................................................................13原理..................................................................................................................................................14试剂和材料......................................................................................................................................14.1试剂及试剂的配制...................................................................................................................14.2标准品及标准溶液的配制.......................................................................................................25仪器和设备......................................................................................................................................26分析步骤..........................................................................................................................................26.1试样的制备与保存...................................................................................................................26.2提取...........................................................................................................................................36.3过柱净化...................................................................................................................................36.4标准工作曲线制备...................................................................................................................36.5仪器参考条件...........................................................................................................................36.6测定...........................................................................................................................................47结果计算..........................................................................................................................................58精密度..............................................................................................................................................59其他..................................................................................................................................................5附录A.................................................................................................................................................6附录B..................................................................................................................................................7 SZDB/Z348—2019II前言本文件依据GB/T1.1-2009规则编制。本文件由深圳市食品药品监督管理局归口。本文件起草单位：深圳市计量质量检测研究院。本文件主要起草人：张协光，肖伟敏，刘文丽，杨国武，兰全学，郑彦婕，朱丽，罗伟，彭祖茂，邓梦雅。本文件为首次发布。SZDB/Z348—20191食品中脂溶性色素的测定超高效液相色谱串联质谱法1范围本文件规定了食品中禁用脂溶性色素苏丹橙G、二甲基黄、苏丹黑B的测定方法。本文件适用于腊肉、腊鱼、香肠、饼干、调味品、鸡蛋中的苏丹橙G、二甲基黄、苏丹黑B含量的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理用丙酮-乙醇溶液提取样品中的脂溶性色素，提取液经阴离子交换固相萃取小柱净化后，用超高效液相色谱串联质谱仪检测和确证，外标法定量。4试剂和材料4.1试剂及试剂的配制除非另有规定，仅使用分析纯试剂。4.1.1水，GB/T6682规定，一级。4.1.2乙腈（CH3CN）：色谱纯。4.1.3甲醇（CH3OH）：色谱纯。4.1.4甲酸（HCOOH）：色谱纯。4.1.5甲基叔丁基醚[CH3OCC(CH3)3，MTBE]：色谱纯。4.1.6氢氧化钾（KOH）。4.1.7丙酮（CH3COCH3）。4.1.8乙醇（CH3CH2OH）。4.1.90.1%甲酸水溶液：准确量取1mL甲酸（4.1.3）于1L容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，混匀。4.1.10丙酮-乙醇（9/1，v/v）：准确量取90mL丙酮（4.1.7）和10mL乙醇（4.1.8），混匀，作为提取溶剂。4.1.111mol/L氢氧化钾溶液：称取5.6g氢氧化钾（4.1.6），加水溶解稀释至100mL。SZDB/Z348—201924.1.12丙酮-1mol/L氢氧化钾溶液（1/9，v/v）：量取90mL1mol/L氢氧化钾溶液（4.1.11）与10mL丙酮（4.1.7）混合，摇匀，作为淋洗液。4.1.13甲基叔丁基醚-甲醇-甲酸（90/8/2，v/v）：量取90mL甲基叔丁基醚（4.1.5）、8mL甲醇（4.1.3）和2mL甲酸（4.1.4），混匀，作为洗脱液。4.2标准品及标准溶液的配制4.2.1苏丹橙G(C12H10N2O2)：纯度≥98.0%。4.2.2二甲基黄(C14H15N3)：纯度≥98.0%。4.2.3苏丹黑B(C29H24N6)：纯度≥98.0%。注：苏丹橙G、二甲基黄、苏丹黑B的CAS号、相对分子质量和结构式参见附录A中表A.1。4.2.4苏丹橙G标准储备液（100mg/L）：准确称取苏丹橙G（4.2.1）标准品0.01g（精确至0.1mg），用乙腈定容至100mL。储备液于0℃~4℃下保存三个月。4.2.5二甲基黄标准储备液（100mg/L）：准确称取二甲基黄（4.2.2）标准品0.01g（精确至0.1mg），用乙腈定容至100mL。储备液于0℃~4℃下保存三个月。4.2.6苏丹黑B标准储备液（1000mg/L）：准确称取苏丹黑B（4.2.3）标准品0.1g（精确至0.1mg），用乙腈定容至100mL。储备液于0℃~4℃下保存三个月。4.2.7苏丹橙G、二甲基黄、苏丹黑B混合标准中间液：分别吸取苏丹橙G、二甲基黄、苏丹黑B标准储备液1.00mL，用乙腈定容至100mL。标准中间液苏丹橙G、二甲基黄、苏丹黑B的浓度分别为1.0mg/L、1.0mg/L、10mg/L。5仪器和设备5.1超高效液相色谱-质谱联用仪（Ultra-performanceLiquidChromatographyTandemMassSpectrometry，UPLC-MS/MS）：配置电喷雾电离源（ElectrosprayIonization，ESI）。5.2电子天平(感量0.0001g)。5.3超声波提取仪。5.4氮气吹干仪。5.5旋涡震荡器。5.6离心机：转速不低于4000r/min。5.7固相萃取装置。5.8强阴离子交换固相萃取柱：60mg/3mL，上样前用3mL甲醇（4.1.3）、3mL水和3mL1mol/L氢氧化钾溶液（4.1.11）活化。5.9一次性微孔滤头：带0.45μm微孔滤膜，有机系。6分析步骤6.1试样的制备与保存SZDB/Z348—201936.1.1腊肉、腊鱼、香肠、饼干：取有代表性样约500g,用组织捣碎机捣碎，装入洁净容器作为试样，密封并做好标识，于-18℃下保存。6.1.2调味品：取有代表性样约500g,搅拌均匀后装入洁净容器内密封并做好标识，于0℃～4