DB15T 975-2016 畜产品牛羊肉中碳、氮同位素丰度比检测方法

ICS67.120.10X22备案号：49434-2016DB15内蒙古自治区地方标准DB15/T975—2016畜产品牛羊肉中碳、氮同位素丰度比检测方法2016-03-20发布2016-06-20实施内蒙古自治区质量技术监督局发布DB15/T975—2016前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由国家乳制品及肉类产品质量监督检验中心提出。本标准由内蒙古自治区质量技术监督局归口。本标准起草单位：国家乳制品及肉类产品质量监督检验中心。本标准主要起草人：郑玉山、高杨、陈育红、徐鹏。IDB15/T975—2016畜产品牛羊肉中碳、氮同位素丰度比检测方法1范围本标准规定了畜产品牛羊肉中碳、氮同位素丰度比的检测方法。本标准适用于畜产品牛羊肉中碳、氮同位素丰度比的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理牛羊肉经过绞碎，索氏提取脱脂干燥后，采用稳定同位素质谱仪测定脱脂牛羊肉中稳定性碳、氮同位素。4试剂与材料4.1除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和GB/T6682中规定的一级水。4.2石油醚（30℃～60℃沸程）。4.3滤纸：经脱脂。4.4脱脂棉。4.5锡箔杯。5仪器与设备5.1稳定同位素质谱仪1)。5.2干燥箱：可控温103℃±2℃。5.3分析天平：感量0.0001g。5.4绞肉机：多孔板的孔径不超过4mm的绞肉机。5.5索氏抽提器：接收瓶体积为250mL。5.6100目筛。5.7称量瓶：直径不小于40mm。6分析方法1)所列仪器为ThermoScientificOrbitrapElite型稳定同位素质谱仪，此处所列出的实验用型号仅是为了提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试不同厂家和型号的仪器。1DB15/T975—20166.1试样前处理将样品用绞肉机（5.4）绞碎后，称取3g～5g试样，置于干燥箱（5.2）中完全干燥后，移入滤纸筒（4.2）中，用石油醚（4.1）进行索氏抽提（5.5）脱脂6h～8h，收集剩余残渣（主要成分为粗蛋白）于称量瓶（5.7）中，在干燥箱（5.2）中烘干，冷却后过100目筛（5.6）备用。6.2同位素测定6.2.1稳定同位素质谱仪工作参数进样器氦气吹扫流量为200mL/min，燃烧炉温度为1000℃，还原炉温度为650℃，载气He流量为90～100mL/min。He稀释压力为0.6bar，CO2参考气压力为0.6bar，N2参考气压力为1.0bar。用USGS24（δ13CPDB=-16.00‰）标定CO2钢瓶，用IAEAN（δ15Nair=0.4‰）标定CO2钢瓶，用标定的钢瓶器作为标准。6.2.2样品测定称取适量（6.1）备用样品放入锡箔杯（4.4）中（称样量由仪器峰值大小决定），通过稳定同位素质谱仪进行测定稳定性碳、氮同位素。平行测定样品。6.2.3结果计算稳定性碳、氮同位素比率分别用δ13C‰、δ15N‰表示，其中δ13C的相对标准为V-PDB，δ15N的相对标准为空气。计算方式见公式(1)。()10001‰21×−=RRδ………………………………………（1）式中：()‰δ——稳定性同位素比率；R1——所测样品同位素与轻同位素丰度比，即13C/12C、15N/14N；R2——标准同位素与轻同位素丰度比，即13C/12C、15N/14N。7精密度每个样品重复测定3次，取平均值，碳、氮同位素的测定精度均大于等于0.2‰；在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的20%。2