DB21T 3193-2019 蛹虫草工厂化栽培技术规程

DB21/T3193—2019蛹虫草工厂化栽培技术规程TechnicalregulationforofCordycepsmilitaris2019-11-30发布2019-12-30实施辽宁省市场监督管理局发布ICS65.020.01B31DB21辽宁省地方标准DB21/T3193-20182前言本标准是按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由辽宁省农业农村厅提出并归口管理。本标准起草单位：沈阳农业大学、辽宁天合生物科技开发有限公司。本标准起草人：范文丽、李天来、须晖、舒黎黎、魏宝东、王奇颖、刘兴安、赵英明、辛广、侯俊、李晓明、孙周平、刘义玲、刘在民。本标准发布实施后，任何单位和个人如有问题和意见建议，均可以通过来电和来函等方式进行反馈，我们将及时答复并认真处理，根据实际情况依法进行评估及复审。归口管理部门通讯地址：辽宁省农业农村厅（沈阳市和平区太原北街2号），联系电话：[phone]标准起草单位通讯地址：沈阳农业大学（沈阳市沈河区东陵路120号），联络电话：[phone]DB21/T3193-20183蛹虫草工厂化栽培技术规程1范围本标准规定了蛹虫草(Cordycepsmilitaris)工厂化栽培中产地环境、生产设施、工厂化栽培技术流程、菌种生产、接种管理、环境控制、采收、烘干与存储等相关生产工艺技术要求。本标准适用于蛹虫草工厂化栽培。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB1886.248食品安全国家标准食品添加剂稳定态二氧化氯GB3095环境空气质量标准GB4806食品安全国家标准食品接触用塑料材料及制品GB5749生活饮用水卫生标准GB7096食品安全国家标准食用菌及其制品GB/T12728食用菌术语GB/T20783稳定性二氧化氯溶液GB26366二氧化氯消毒剂卫生标准GB50073洁净厂房设计规范NY/T528食用菌菌种生产技术规程NY/T749绿色食品食用菌NY/T1742食用菌菌种通用技术要求NY/T1935食用菌栽培基质质量安全要求NY/T2375食用菌生产技术规范NY/T2798.5无公害农产品生产质量安全控制技术规范第5部分:食用菌NY/T5010无公害农产品种植业产地环境条件DB21/T1541蛹虫草栽培技术规程DB21/T3030蛹虫草液体菌种生产技术规程3术语和定义GB/T12728界定的术语和定义适用于本文件。4产地环境DB21/T3193-20184产地环境应符合NY/T5010的规定，环境空气应符合GB3095要求，生产用水应符合GB5749要求。5工厂化设施宜采用大跨度彩钢保温栽培房进行工厂化生产，栽培房设计符合GB50073一般要求。外墙及屋顶保温宜采用聚苯乙烯密度25kg/m3，栽培房可采用“非”字形排列，方位南北通透，可每24m～30m设置横过道，每间培养房容积（长×宽×高为5m×8m×6m）240m3为宜，内墙可喷厚度5cm聚氨酯保温材料，地面夯实后，铺一层5cm厚的泡沫板，再浇注10cm水泥砂浆，墙体地平线上30cm处每个栽培房等距离开20cm×20cm通风口3个，每间栽培房开一扇1.5m×2.0m大门。6工厂化栽培技术流程7菌种生产7.1菌种选择栽培种选用国家或省级部门审（鉴、认）定或登记的蛹虫草品种，其它应符合NY/T1742要求。7.2菌种制备母种的生产应符合NY/T528的规定，原种、栽培种采用液体培养基，培养基配方按DB21/T3030要求进行。7.2.1原种按照原种培养基配方制备培养基，灭菌后，在无菌条件下从母种试管中取5块～6块0.5cm2的菌种块接种到2500mL的三角瓶中，装液量为容量的40%，20±2℃黑暗静置24h，然后振荡培养72h～96h。7.2.2栽培种7.2.2.1装罐采用液体菌种平板检测法和显微镜检测法对菌种纯度进行检测，将符合标准的原种在无菌条件下接入已灭菌发酵罐中，发酵罐装液量为总容量的80%。7.2.2.2发酵条件进入发酵罐的净化空气系统通气压力为0.065Mpa～0.1Mpa，罐内压力为0.035Mpa～0.05Mpa，发酵罐温度控制在（20±2）℃。DB21/T3193-201857.2.2.3观察与检测每天经发酵罐视窗观察，菌液澄清透明，菌丝呈球形、片状和丝状均匀分布；出气口气体无异味；每间隔24h从取样口取样进行杂菌检测，即将取样菌液在超净工作台上均匀涂布到平板中，分别置于28±1℃和36±1℃培养箱中，培养8h～12h后显微镜检查杂菌。7.2.2.4下罐若显微镜观察无杂菌，则培养至72h，及时下罐，进行大生产接种。8接种管理8.1接种环境消毒8.1.1消毒剂选择消毒剂宜选用二氧化氯，质量符合GB26366、GB1886.248和GB/T20783的规定，其使用浓度为0.1L/m3。选用其它消毒剂种类及使用方法按NY/T2798.5执行。8.1.2消毒方法8.1.21清理接种前3d～5d，将工厂化栽培房打扫干净，并用清水清洗地面。8.1.2.2环境条件栽培房内温度控制在15℃～40℃，空气湿度保持在RH≥85%。8.1.2.3清毒处理栽培房内每隔5m在距离地面高1m处设置1个熏蒸点，按消毒体积将药剂均匀分装，置于敞口塑料容器内，按产品说明书要求反应释放二氧化氯气体，人员迅速撤离现场，密闭工厂化栽培房，并启动内循环风机，密闭24h～48h。达到密闭要求时间后，打开通风换气风机换气，直到栽培房内无刺激性气味为止。8.2栽培用培养基制作及接种8.2.1栽培用培养基栽培用培养基主要以小麦或大米为主，质量安全应符合NY/T1935的规定。8.2.2培养基制作将小麦或大米等装入栽培容器中再加水，小麦料水比1:1.2，大米料水比1:1，用高压聚丙烯薄膜和皮筋封口，采用高压灭菌法，灭菌压力0.13MPa±0.01MPa，灭菌时间1h。灭菌后将栽培容器放于消毒的接种室内，冷却至24℃以下即可接种。栽培容器及相关用品均符合GB4806.7的要求。8.2.3接种DB21/T3193-20186在接种隧道中接种，严格按照无菌操作进行，每500g麦子或大米接菌量为60mL±3mL，菌液均匀喷洒到培养基表面。9环境控制9.1发菌期菌丝生长阶段避光培养，栽培室温度控制在20±2℃，空气相对湿度控制在65%±5%，空间CO2浓度控制在0.01%～0.02%，培养6d±1d，菌丝长满整个栽培容器料面。9.2原基分化期菌丝长满培养基后，增加散射光照射，采用LED灯带进行补光，光质可以选择白光、蓝光，光照强度200±50lux，每天光照时间10±1h，并进行5℃昼夜温差刺激,空气相对湿度保持70%±5%。3d±1d后菌丝由白色转为橘黄色，10±1d后原基出现。9.3出菇期现原基时第一次进行放气，即将栽培容器上封口膜刺孔放气，栽培室内CO2浓度控制在0.3%～0.4%，容器内CO2浓度控制在3%～4%。温度控制在18±1℃，空气湿度85%～90%。每天定期开启内循环通风和外循环风机，保持栽培室空气新鲜，每天光照时间8h，当蛹虫草子实体长到1cm时，进行第二次放气，即在封口膜上增加刺孔数量，栽培容器内CO2浓度控制在1.5%～2.5%。10采收蛹虫草生长60d±5d即可采收。从蛹虫草基部拔取，按大小等级分别排列，进行保鲜或烘干。生产记录按DB21/T1541规定执行。采收后应及时清理栽培房，并进行消毒。11烘干与储存采用热风干燥方法，温度40℃～50℃，蛹虫草烘至含水量13%以下即可。烘干后子实体用薄膜袋密封，置5℃～10℃避光干燥的储存库内，防吸潮霉变。蛹虫草商品符合GB7096和NY/T749要求。12病虫害防控栽培房消毒前建议先用5%火碱清洗地面，控制“吃草菌”即虫草生齿梗孢，其它病虫害防治按照NY/T2375要求进行。