DB22T 1695-2012 饲料添加剂 L-赖氨酸盐酸盐测定

ICS65.120B46备案号：35986-2013DB22吉林省地方标准DB22/T1695—2012饲料添加剂L-赖氨酸盐酸盐测定DeterminationofL-Lysinemonohydrochlorideforfeedgrade2012-12-21发布2013-01-01实施吉林省质量技术监督局发布本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T1695—2012I前言本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2001给出的规则起草。本标准由吉林省质量技术监督局提出并归口。本标准起草单位：吉林省产品质量监督检验院、吉林大学。本标准主要起草人：李媛媛、关树文、张庆波、安伟、赵立群、任明月、王伟、王宇、柴竹林、杨波、王莹、吕航、张文、韩晓红、姚忱。本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T1695—20121饲料添加剂L-赖氨酸盐酸盐测定1范围本标准规定了用氨基酸自动分析仪测定饲料添加剂L-赖氨酸盐酸盐的方法。本标准适用于饲料添加剂L-赖氨酸盐酸盐的含量测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理试样用盐酸溶液溶解、稀释后，用氨基酸自动分析仪测定赖氨酸的量，计算赖氨酸盐酸盐的含量。4试剂与材料所有试剂，如未注明规格，均指分析纯；除另有说明外，水为GB/T6682规定的一级水。4.1盐酸。4.2赖氨酸标准溶液[c(C6H14N2O2)=2.5µmol/L]。4.3盐酸溶液[c(HCl)=0.1mol/L]：吸取8.3mL盐酸(4.2)置于1000mL容量瓶中，用水稀释后，定容至刻度。4.4盐酸稀溶液[c(HCl)=0.02mol/L]：吸取1.67mL盐酸(4.2)置于1000mL容量瓶中，用水稀释后，定容至刻度。4.5赖氨酸标准工作溶液[c(C6H14N2O2)=2nmol/L]：取1mL赖氨酸标准溶液(4.2)用盐酸溶液(4.3)定容至25mL后；取1mL用盐酸溶液(4.3)定容至50mL。4.60.45µm微孔滤膜，水相。5仪器5.1氨基酸自动分析仪。5.2超声波仪。5.3分析天平：感量0.1mg。5.4粉碎机。6试样制备本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T1695—20122取具代表性的饲料样品，用四分法缩减分取25g左右，粉碎并过0.45mm孔径筛，充分混匀后装入磨口瓶中备用。7分析步骤7.1样品处理称取50mg的试样(精确至0.1mg)于50mL比色管中，加30mL盐酸溶液(4.3)，超声提取30min，转移至50mL容量瓶中，用盐酸稀溶液(4.4)定容后，再用盐酸稀溶液(4.4)进行10倍稀释上机测定。7.2测定7.2.1色谱参考条件色谱参考条件如下：a)色谱柱：离子交换柱（4.6mm×60mm）；b)反应器温度：135℃；c)分离柱柱温：57℃；d)缓冲液流速：0.400mL/min；e)反应液流速：0.350mL/min。7.2.2色谱测定按仪器说明书，调整好仪器操作参数，洗脱用缓冲液的pH和适当的分析程序参见附录A，分别注入赖氨酸标准工作溶液和制备好的试样，赖氨酸标准工作溶液色谱谱参见附录B中图B.1用氨基酸自动分析仪以外标法分析测定试样中赖氨酸的量，计算赖氨酸盐酸盐的含量。7.3空白试验除不称取试样外，均按上述步骤进行。8结果计算测定结果可由仪器工作站自动计算，也可按下式（1）计算：10010X9mMVFC................................(1)式中：X—样品中L-赖氨酸盐酸盐的含量，单位为克每百克（g/100g）；C—试样测定液中赖氨酸的量，单位为微摩尔每毫升（pmol/mL）；F—试样稀释倍数；V—试样的定容体积，单位为毫升（mL）；M—L-赖氨酸盐酸盐的摩尔质量，182.65，单位为克每摩尔（g/mol）；m—样品的质量，单位为克（g）；109——将克换算成纳克的系数。结果保留至一位小数。9精密度本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T1695—20123在重复性条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过算术平均值10%。在再现性条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过算术平均值10%。本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T1695—20124AA附录A（资料性附录）推荐性洗脱程序方案表A.1洗脱程序试剂用量缓冲液流量%洗脱时间minB1B2B3B4B5B6R1R2R30.010000000505002.510000002.6010000005.0010000005.10010000013.80010000013.90001000029.00001000029.10000010032.005050032.100010033.00000010034.00100000034.1100100000037.00010037.15050053.01000000050500本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T1695—20125BB附录B（资料性附录）L-赖氨酸盐酸盐的测定色谱图赖氨酸标准品色谱图见图B.1。Minutes0.02.55.07.510.012.515.017.520.022.525.027.530.0mV02040mV0204023.180Lys31.413VIS1RetentionTimeNameVIS2Name图B.1氨基酸分析仪检测赖氨酸标准溶液的色谱图（100pmol/L）_________________________________本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印