T∕WSJD 18.5-2021 工作场所空气中化学因素测定 肼的高效液相色谱法

团体标准T/WSJD18.5—2021工作场所空气中化学因素测定肼的高效液相色谱法Determinationofchemicalagentsinworkplaceair—Hydrazinebyhigh-performanceliquidchromatography中国卫生监督协会发布ICS13.100CCSC522021-09-14发布2021-10-01实施T/WSJD18.5—2021I前言本文件按照GB/T1.1—2020给出的规则起草。本文件由中国卫生监督协会提出并归口。本文件起草单位：中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所、国家卫生健康委职业安全卫生研究中心、北京市化工职业病防治院。本文件主要起草人：崔师伟、闫慧芳、潘亚娟、潘兴富、丁春光、刘晓东、郑玉桥。T/WSJD18.5—20211工作场所空气中化学因素测定肼的高效液相色谱法1范围本文件规定了工作场所空气中肼的高效液相色谱测定方法。本文件适用于工作场所空气中蒸气态和气溶胶态肼浓度的测定。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件。不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GBZ159工作场所空气中有害物质监测的采样规范3原理工作场所空气中蒸气态和气溶胶态的肼用硫酸溶液浸渍玻璃纤维滤膜采集，用磷酸二氢钠、乙二胺四乙酸二钠缓冲溶液洗脱，1%苯甲醛-乙腈溶液衍生为苄连氮，经色谱柱分离，紫外检测器300nm波长下检测，以保留时间定性，测定峰高或峰面积，用外标标准曲线法进行定量。4仪器设备与耗材4.1浸渍玻璃滤膜，孔径1μm。4.2空气采样器，流量满足1L/min～2L/min。4.3滤料收集器，三段式。4.4螺口玻璃瓶（盖内衬聚四氟乙烯膜），12mL。4.5精密微量注射器，10µL，50µL，1000µL。4.6容量瓶，10mL，100mL。4.7电子分析天平，感量0.1mg。4.8超高效液相色谱仪，具二极管阵列检测器或紫外检测器。5试剂5.1去离子水（ρ≥18.2MΩ）。5.2硫酸肼（H6N2SO4），色谱纯。5.3苯甲醛（C7H6O），色谱纯。5.4乙腈（C2H3N），色谱纯。5.5乙二胺四乙酸二钠（C10H14N2O8Na2），优级纯。T/WSJD18.5—202125.6磷酸二氢钠（NaH2PO4），优级纯。5.7磷酸（H3PO4），ρ20=1.87g/mL，优级纯。5.8硫酸（H2SO4），ρ20=1.84g/mL，优级纯。5.9洗脱溶液：准确称取磷酸二氢钠6.24g、乙二胺四乙酸二钠7.44g，溶于400mL去离子水中，用磷酸调节溶液的pH=3.5；该溶液的磷酸二氢钠和乙二胺四乙酸二钠浓度分别为0.1mol/L、0.05mol/L。5.10衍生溶液：准确移取2.0mL苯甲醛与200mL乙腈混匀；该溶液置于棕色瓶内避光保存。5.11滤膜浸渍溶液：取1.5mL浓硫酸用去离子水稀释至200mL。5.12标准储备溶液：准确称取2.5365g硫酸肼，用去离子水溶解并定容至100mL；该溶液硫酸肼浓度为25.365mg/L，相当于肼浓度为6.25mg/mL（32.06/130.12=0.2464）。5.13标准应用溶液：取2.00mL标准储备溶液于10mL容量瓶中，用去离子水定容至刻度；该溶液相当于肼浓度为1.25mg/mL。6样品的采集、运输和保存6.1样品采集现场采样按照GBZ159执行。用装有两张滤膜的三段式滤膜收集器，以2L/min流量，采集15min空气样品。用装有两张滤膜的三段式滤膜收集器，以1L/min流量，采集2h～8h空气样品。6.2样品空白在采样同时用装有两张滤膜的三段式滤膜收集器，立即封闭两端，按照样品采集后的方法进行转移滤膜，与样品一起运输、保存和测定。每批次现场样品不少于2个样品空白。6.3样品运输和保存采样后，将采样后的前、后段滤膜分别置于解吸瓶中，于清洁容器内常温条件下运输。样品置于4℃条件下可稳定保存25d。7分析步骤7.1仪器操作参考条件a)色谱柱：50mm×2.1mm1.7µmC18；b)流动相：乙腈:水=70:30（体积比）；c)流速：0.2mL/min；d)波长：300nm；e)柱温：35°C；f)进样体积：2µL。7.2标准系列溶液的配制与测定取5只容量瓶，用洗脱溶液将标准应用溶液稀释成肼浓度为0μg/mL～30μg/mL的标准系列溶液。分别取出0.50mL标准系列溶液置于色谱进样瓶中，加入0.50mL衍生溶液和0.50mL洗脱溶液，室温下衍生反应30min。T/WSJD18.5—20213参照仪器操作条件，将液相色谱仪调节至最佳测定状态，测定标准系列溶液，以测得的峰面积或峰高值分别与其对应的肼浓度（μg/mL）计算线性回归方程。7.3样品处理与测定将样品的前、后段滤膜分别转入螺口玻璃瓶中，加入5.00mL洗脱溶液，不时振摇，解吸30min。取出0.50mL样品洗脱溶液于色谱进样瓶中，加入0.50mL衍生溶液和0.50mL洗脱溶液，不时振摇，衍生反应30min后测定。用测定标准系列溶液的操作条件测定样品和样品空白的洗脱溶液，测得样品峰面积或峰高值后，由线性回归方程计算肼的浓度（μg/mL）。若样品洗脱溶液中肼浓度超出测定范围，可用洗脱溶液稀释后测定，计算时乘以稀释倍数。8计算8.1按式（1）将样品的采样体积换算成样品的标准采样体积（V20）101.327329320PtVV+=………………………………………（1）式中：V20——样品的标准采样体积，单位为升（L）；V——样品的采样体积，单位为升（L）；t——样品采集时的空气温度，单位为温度（℃）；P——样品采集时的空气大气压强度，单位为千帕（kPa）。8.2按式（2）计算空气中肼的浓度20222011VDvVDv+=…………………………………………（2）式中：ρ——空气中肼的浓度，单位为毫克每立方米（mg/m3）；ρ1,ρ2——测得前段滤膜、后段滤膜样品洗脱溶液中肼的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）；v——滤膜样品洗脱液的体积，单位为毫升（mL）；V20——样品标准采样体积，单位为升（L）；D1,D2——与样品前段、后段滤膜中肼剂量相当的洗脱效率。8.3时间加权平均接触浓度（ρTWA）按GBZ159规定计算。9说明9.1方法检出限为19.4ng/mL，方法定量下限为0.064μg/mL；测定范围为0.064μg/mL～30μg/mL；采集30L空气样品时，最低检出浓度为0.003mg/m3，最低定量浓度为0.010mg/m3；平均洗脱效率为89.3%～95.5%，相对标准偏差为1.11%～3.88%。9.2现场可能共存的异烟酰肼、氨基脲、苯甲醛、偏二甲基肼在本方法的测定条件下分离效果较好。分离色谱参考图见图1。T/WSJD18.5—20214说明：1——异烟酰肼、氨基脲；2——苯甲醛；3——偏二甲基肼；4——肼的衍生物。图1色谱分离参考图_________________________________