CNAS-TRL-018-2022 医学实验室 核酸检测质量和安全指南

发布日期：2022年03月01日CNAS技术报告医学实验室核酸检测质量和安全指南中国合格评定国家认可委员会CNAS-TRL-018:2022第1页共22页发布日期：2022年03月01日目录前言...............................................................................................................................21范围...........................................................................................................................32规范性引用文件.......................................................................................................33总则...........................................................................................................................34基于扩增的核酸检测程序.......................................................................................44.1手工核酸提取纯化及检测方法.........................................................................44.1.1工作流程.......................................................................................................44.1.2设施设备与环境...........................................................................................44.1.3质量控制关键点...........................................................................................64.1.4安全管理.......................................................................................................84.2全自动核酸提取纯化及检测方法...................................................................104.2.1工作流程.....................................................................................................104.2.2设施设备与环境.........................................................................................104.2.3质量控制关键点.........................................................................................114.2.4安全管理.....................................................................................................124.3全自动核酸提纯及荧光PCR分析系统.........................................................124.3.1工作流程.....................................................................................................124.3.2设施设备与环境.........................................................................................124.3.3质量控制关键点.........................................................................................134.3.4安全管理.....................................................................................................135基于高通量测序的核酸检测程序.........................................................................145.1工作流程...........................................................................................................145.2设施设备与环境...............................................................................................155.3质量控制关键点...............................................................................................165.4安全管理...........................................................................................................19附录A（资料性附录）实验室功能区核酸检测采样方案.....................................20CNAS-TRL-018:2022第2页共22页发布日期：2022年03月01日前言本文件由中国合格评定国家认可委员会（CNAS）制定，为CNAS-CL02《医学实验室质量和能力认可准则》中有关分子诊断相关检验的质量和安全提供指南，供医学实验室和评审员参考使用。本文件为首次发布。本文件主要起草单位：中国合格评定国家认可中心、泰达国际心血管病医院、深圳华大医学检验实验室、广州达安基因股份有限公司、迪安诊断技术集团股份有限公司、罗氏诊断产品（上海）有限公司、北京中科基因技术股份有限公司、北京金域医学检验实验室有限公司、中国科学院微生物研究所。本文件主要起草人：吕京、付岳、李沐洋、冯涛、周晓垂、岑妙兰、蒋析文、黄桃生、杨梅、姜育燊、原霖、郑燕华、朱以萍、周亚莉、李军燕、贾克刚、傅应裕、杨晨。CNAS-TRL-018:2022第3页共22页发布日期：2022年03月01日医学实验室核酸检测质量和安全指南1范围本指南适用于医学实验室从事核酸检测时参考使用。2规范性引用文件下列文件对于本指南的应用是必不可少的。凡是注明日期的引用文件，仅该版本适用于本指南。凡是未注明日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改部分）适用于本指南。《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》GB19489《实验室生物安全通用要求》GB19781《医学实验室安全要求》GB4793.9《测量、控制和实验室用电气设备的安全要求》GB/T22576.1《医学实验室质量和能力的要求第1部分：通用要求》YY0569《Ⅱ级生物安全柜》WS233《病原微生物实验室生物安全通用准则》WS589《病原微生物实验室生物安全标识》WS/T640《临床微生物学检验标本的采集和转运》WS/T648《空气消毒机通用卫生要求》ISO15190《医学实验室安全要求》ISO22367《医学实验室-风险管理在医学实验室的应用》ISO/TS20658《医学实验室-样品采集、运送、接收和处理指南》CNAS-CL02-A001：2021《医学实验室质量和能力认可准则的应用要求》CNAS-GL039：2019《分子诊断检验程序性能验证指南》3总则开展核酸检测的医学实验室，应当满足检测质量和能力要求，同时应满足安全要求。核酸检测质量和能力应基于检测目的和检测程序确定，实验室安全要求应满足相关的标准和法规要求。样品采集、运送、接收和处理应符合WS/T640《临床微生物学检验标本的采集和转运》和ISO/TS20658《医学实验室-样品采集、运送、接收和处理指南》CNAS-TRL-018:2022第4页共22页发布日期：2022年03月01日等标准要求。核酸检测和解释应依据相关的标准要求。安全警示标识满足WS589《病原微生物实验室生物安全标识》要求。实验室安全应遵守ISO15190《医学实验室安全要求》、WS233《病原微生物实验室生物安全通用准则》、GB19489《实验室生物安全通用要求》等标准，以及相关法律法规和主管部门的要求。4基于扩增的核酸检测程序4.1手工核酸提取纯化及检测方法4.1.1工作流程核酸检测过程分为检验前、检验中和检验后（具体内容见表1），包括样本采集、转运和接收、核酸提取、PCR扩增、报告解读及医疗垃圾处理等过程。表1检验过程检测过程内容检验前过程检测项目的申请，知情同意的签署，样本的采集、运输、接收和保存、耗材的验收等检验中过程检测过程中的核酸提取质量控制、核酸扩增、室内质量控制，室间质量评价，检验过程的标准操作程序及实验记录等检验后过程包括报告的解释及发放，数据的处理及保存，检验后样本和材料的保存、处理及销毁等4.1.1.1送检申请、样本采集、样本运输、样本接收等检验前过程应符合GB/T22576.1-2018中5.4要求；4.1.1.2核酸提取、PCR扩增等检验中过程应符合GB/T22576.1中5.5、5.6要求；4.1.1.3报告的解释及发放，数据的处理及保存等检验后过程应符合GB/T22576.1中5.7、5.8、5.9要求。4.1.2设施设备与环境4.1.2.1设施设备a）检测设备CNAS-TRL-018:2022第5页共22页发布日期：2022年03月01日工作区域检测仪器设备配置标准、设施与环境参数的设置应符合《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》。b）安全设施设备适用时，实验室应考虑配备的安全设备主要包括生物安全柜、样本灭活设备、高压灭菌器、紫外线消毒灯和空气消毒机等。1）生物安全柜实验室应根据操作样本的生物安全风险等级选择合适的生物安全柜。生物安全柜的选择和安装要求应符合YY0569《Ⅱ级生物安全柜》的要求。生物安全柜的安装位置应避开门口、人员走动区域、空调风口、排风口等易受气流干扰区域，安装、维护等应遵循制造商说明书并由具备资格的专业技术人员进行。2）样本灭活设备需要时，应在进行核酸检测前对样本进行灭活处理。常用的样本热灭活设备有水浴锅、鼓风干燥箱、灭活仪等。实验室应定期对样本灭活设备温度参数进行校准。已使用化学剂可靠灭活的样本无需进行热灭活处理。3）高压灭菌器每次灭菌时均应对灭菌效果进行监测。应对高压灭菌器进行定期检查和维护，确保灭菌压力、温度、时间等参数正常，以及压力管道、