血液疾病流式细胞术分析

血液病的流式细胞术分析华西医院临检血液室蒋能刚流式细胞术在血液病中的应用：急性白血病免疫分型淋巴细胞增殖性疾病免疫分型骨髓增生异常综合征辅助诊断微小残留白血病ZAP70、P糖蛋白等预后指标检测PNH（CD55、CD59）细胞周期分析CD34+细胞绝对计数标本种类外周血骨髓胸腹水脑脊液淋巴结细针穿刺液活检组织标本要求室温或2～4℃72h内骨髓：急性白血病，MDS，MM外周血：CD55、CD59，LGL标本前处理：离心收集细胞（胸腹水、脑脊液）或制备细胞悬液（活检组织）了解标本中细胞组成（瑞氏染色、台盼蓝染色）细胞浓度调整一般处理步骤胞膜抗原：标记-溶血-洗涤胞浆抗原：标记-溶血-固定/破膜-标记-洗涤免疫球蛋白：溶血-洗涤-标记-洗涤设门方案SSC/FSCCD45CD19、CD20CD3、CD5光散射特征与细胞形态的关系正常骨髓淋巴单核粒细胞CD45SSC原始嗜碱嗜酸Blastwindows抗体设置髓系一般标志：CD13、CD33、CD117、MPO其他标记：CD14、CD64、CD4CD71、GlyACD61、CD41CD36其他非髓系标记：CD2、CD5、CD7、CD56、CD19骨髓增生异常综合症（MDS）•主要表现为粒系及单核系抗原表达异常•正确的结果解释有赖于良好的质量控制和标本细胞活性B淋巴细胞κ、λ确定克隆性阶段性B细胞标记物：CD5、CD10、CD20、CD22、CD23、FMC7其他标记物：CD11c、CD25、CD103、CD38T/NK细胞抗原表达缺失和强度变化T淋巴细胞：CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、CD8NK细胞：CD16、CD56benignMalignant结果分析•分析的重点在于确定每一个细胞标记的存在与否以及表达的强弱（模式识别）。•每个抗体在阳性细胞上的表达百分率并不重要。•以残存正常细胞（如正常成熟淋巴细胞）作为分析参照物。•结合细胞形态可事半功倍。AML-M1AML-M2AML-M3AML-M4/M5AML-M6非造血细胞非特异性染色（死亡细胞）ALL血小板附着于原始粒细胞所致CD61阳性拖尾巨核细胞白血病微小残留白血病：灵敏度为1/1000～1/10000以初诊时免疫表型作为设置抗体组合的依据排除非特异性染色细胞和杂质的影响原血细胞结果报告