神经兴奋性不应期的测定

神经兴奋性不应期的测定【目的和原理】可兴奋组织（神经、肌肉）在一次兴奋之后，其兴奋性要经历一个规律的时相变化。在神经依次经历绝对不应期（absoluterefractoryperiod）、相对不应期（relativerefractoryperiod）、超常期和低常期。然后再恢复到正常兴奋水平。在绝对不应期内给予刺激，即使加大脉冲强度，细胞也不发生兴奋；在相对不应期内给予阈上刺激，细胞可产生兴奋，但产生的动作电位幅度较低。而在超常期，较小的刺激可使神经兴奋。兴奋性的高低或有无，可以通过测定阈值来确定。兴奋不应期的测定一般用前后两个刺激，前面的刺激称为“条件性刺激”，用来引起神经的一次兴奋；后面的刺激称为“检测性刺激”，用来测定神经兴奋性的改变。调节两个脉冲之间的时间间隔过程中，观察“检测性刺激”所引起的动作电位幅值的改变，以测定神经兴奋不应期的变化。【实验对象】蟾蜍。【实验器材和药品】计算机、生物机能实验系统、神经标本盒、蛙板、玻璃板、蛙类手术器械一套、滴管、培养皿、蛙钉、污物缸、棉线、林格液（任式液）。【实验步骤】1.制备坐骨神经标本。(1)蛙洗净，双毁髓。(2)除去腹部以下皮肤，打开腹腔，将内脏向上翻，用粗剪刀剪去上半侧躯体，沿脊椎正中将下肢标本一分为二，放入培养皿中，加任氏液润湿。(3)从脊椎开始分离坐骨神经至膝关节处，注意不能使神经干燥，不牵拉神经，尽量少用金属触碰神经。(4)分离股骨，保留靠近膝关节端股骨1cm。（5）分离腓肠肌，在肌腱处扎棉线后提起线，剪去膝关节下部其余部分。2.仪器线路连接同神经干动作电位及其传导速度测定，在菜单条目中选择“神经干兴奋不应期测定”程序。程序参数设置：扫描控制——自动重复扫描，扫描速度根据需要设定,一般2ms/div～4ms/div。灵敏度——根据生物电放大器的增益设定为0.1mv～0.5mv/cm刺激参数——脉冲宽度0.1ms，强度0.2mv～1.8v范围内。3.加大脉冲强度1，在屏幕上可看到动作电位的幅度逐渐增大，等幅度增至最大时停止调节脉冲强度。4.使脉冲强度2等于脉冲强度1，改变脉冲间隔，观察第二个动作电位的幅度变化情况。可观察到第二个动作电位逐渐向第—个动作电位靠近，越靠近，第二个动作电位的幅度越低，直至消失，即使增加脉冲强度，也不能再引起第二个动作电位，表明第二个刺激落在前一刺激的绝对不应期内。单击“储存”按钮将所需信号储存。5.测量，第二个刺激引起的动作电位幅度开始减小时，两脉冲间隔时间记为t1。继续减小两脉冲间隔，第二个刺激引起动作电位消失，加大脉冲强度也不再出现时，两脉冲的间隔就是前一刺激的绝对不应期，记为t2。t1-t2就是第一个刺激的相对不应期。【预期结果】蛙神经干存在有效不应期。