移液器(移液枪)及其使用

移液器基础知识移液器简介及原理微量加样器（移液器）最早出现于1956年，由德国生理化学研究所的科学家Schnitger发明。其后，在1958年德国Eppendorf公司开始生产按钮式微量加样器，成为世界上第一家生产微量加样器的公司。加样的物理学原理有下面两种：①使用空气垫(又称活塞冲程)加样；②使用无空气垫的活塞正移动加样。上述两种不同原理的微量加样器有其不同的特定应用范围。移液器品牌1.Eppendorf（德国艾本德）：世界上第一支微量加样器的诞生地。2.Glison（法国吉尔森）：著名的法国移液器生产商。3.Mettler-Toledo：德国著名的移液器、精密天平等实验仪器生产商。4.Labsystem（芬兰雷勃）：移液器及微孔板检测仪等实验仪器生产商。5.Dragonmed（大龙）6.TOMOS（美国托莫斯）7.Proline（芬兰百得）8.Rainin（美国瑞宁）9.NICHIRYO（日本立洋）移液器要放在支架上移液过程安装吸嘴设定容量预洗吸液放液卸去吸嘴散装吸嘴的安装方法两只手分别持移液器和吸嘴，安装后旋转。盒装吸嘴的安装方法将移液器垂直插入吸嘴中，稍用力下压，然后旋转。错误操作：在将枪头套上移液枪时，很多人会使劲地在枪头盒子上敲几下。这样会导致移液枪的内部配件（如弹簧）因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散，甚至会导致刻度调节旋钮卡住，严重的情况会将白套筒折断。正确操作：将移液器垂直插入枪头中，稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合。如果是多道（如8道或12道）移液枪，则可以将移液枪的第一道对准第一个枪头，然后倾斜地插入，往前后方向摇动即可卡紧。枪头卡紧的标志是略为超过O型环，并可以看到连接部分形成清晰的密封圈。设定容量调整按钮为粗调调整摩擦环为细调设定容量时的注意事项1、移液器要在规定的容量内使用，切勿超量程使用，否则会卡住内部机械装置而损坏了移液器。2、调整容量时，如果从大到小时，可以直接调到想要的容量；如果从小到大时，一定要调超三分之一圈，然后再调回来，这样做可以使弹簧完全放开,而且移液器总是在顺时针运转可以延长移液器的使用寿命。1.连接恰当的吸嘴；2.按下控制钮至第一档；3.将移液器吸嘴垂直进入液面下1-6mm（视移液器容量大小而定）；0.1-10ul容量的移液器进入液面下1-2mm2-200ul容量的移液器进入液面下2-3mm1-5ml容量的移液器进入液面下3-6mm注：为使测量准确可将吸嘴预洗3次，即反复吸排液体3次。4.使控制钮缓慢滑回原位；5.移液器移出液面前略等待1-3秒；1000ul以下停顿1秒5-10ml停顿2-3秒.6.缓慢取出吸嘴，确保吸嘴外壁无液体。吸液的操作1.将吸嘴以一定角度抵住容量内壁；2.缓慢将控制钮按至第一档并等待约1－3秒；3.将控制钮按至第二档过程中，吸嘴将剩余液体排净；4.慢放控制钮；5.按压弹射键弹射出吸嘴。排液的操作移液的方法一是前进移液法。用大拇指将按钮按下至第一停点，然后慢慢松开按钮回原点。接着将按钮按至第一停点排出液体，稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体。最后松开按钮。二是反向移液法。此法一般用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体。其操作是先按下按钮至第二停点，慢慢松开按钮至原点。接着将按钮按至第一停点排出设置好量程的液体，继续保持按住按钮位于第一停点（千万别再往下按），取下有残留液体的枪头，弃之。1.当移液器吸嘴有液体时切勿将移液器水平或倒置放置，以防液体流入活塞室腐蚀移液器活塞。2.移液器使用完毕后，把移液器量程调至最大值，且将移液器垂直放置在移液器架上。3.如液体不小心进入活塞室应及时清除污染物。4.平时检查是否漏液的方法：吸液后在液体中停1-3秒观察吸头内液面是否下降；如果液面下降首先检查吸头是否有问题，如有问题更换吸头，更换吸头后液面仍下降说明活塞组件有问题，应找专业维修人员修理。移液器的养护及注意事项5.需要高温消毒的移液器应首先查阅所使用的移液器是否适合高温消毒后再行处理。6.吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指，绝不允许突然松开，以防将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气。7.吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时，吸头内壁会残留一层“液膜”，第二次吸取时的体积会大于第一次的体积。8.卸掉的吸头一定不能和新吸头混放，以免产生交叉污染。移液器的校准校准应在无通风的房间，移液器和空气温度在20℃-25℃之间，相对湿度在55％以上。特别是当移液量在50ul以下，空气湿度应越高越好，以减少蒸发损失的影响。在万分之一级别天平上放置一个小三角烧瓶，用待标定的移液器吸取蒸馏水（隔夜存放或超声15min）加入小三角烧瓶内底部，每次称重后计量，去皮重后再加蒸馏水，连续加蒸馏水10次。加蒸馏水的量根据待标定的移液器不同规格而不同，见下表。移液器10次标定称量在所要求的重量范围之内为合格移液器；不合格移液器需要进行调整。移液器规格标定使用蒸馏水量要求重量范围0.5-10ul2ul1.75-2.25mg5-40ul10ul9.8-10.2mg40-200ul70ul69.4-70.6mg200-1000ul300ul298.0-302.0mg1-5ml2000ul1990.0-2010.0mg2-10ml3500ul3485.0-3515.0mg