疯牛病症状及检测方法

临床症状：临床检查最常见的精神症状是神经状态失常，运动障碍和感觉障碍。神经异常表现为焦虑不安、恐惧、狂躁、神志恍惚、磨牙、两耳一只向前伸另一只位置正常或向后。病畜由于胆怯、恐惧，当有人靠近或追逼时往往出现攻击行为。运动障碍主要表现为共济失调。感觉障碍最常见的症状是对触摸和声音过敏，表现惊恐甚至倒地。50%的病例在挤奶时乱踢乱蹬，部分病例抗拒检查，特别是抗拒头部检查。绝大多数病畜食欲良好，但79%的病畜体重减轻，60%的乳量减少。病初6~8周病势发展较快，病情加重。病程一般为1~4月，少数长达1年左右。病牛以死亡而告终。检测方法：1组织病理学检测组织病理学检测主要是对BSE感染的脑超薄切片进行电子显微镜观察，从而确诊BSE疾病的方法。该法是最早应用于检测的方法之一。但一般只是在疾病发展的后期进行，难以实现BSE的活体检测。2生物学方法该方法是将待检动物的脑组织匀浆接种实验动物，经过一定的潜伏期，观察实验动物是否发病，但涉及到接种剂量、接种次数以及潜伏期长等原因，不适合快速、大量检测。3免疫学方法目前应用效果比较好，能够迅速检测大量样品，其主要原理是抗原抗体的反应。3.1免疫印记法主要原理是PrPSC在蛋白酶K的作用下产生PrP27-30，而PrPC会被完全消化，用PrP27-30抗血清与PrP27-30进行免疫反应即可检测出。该法灵敏度稍差，但试验只需几个小时，可用于大规模的疯牛病检测中。3.2酶联免疫吸附法此法是在免疫印记法基础上建立的。将酶促反应的高效率和免疫反应的高效专一性有机地结合起来，可对各种微量有机物进行测定，具有灵敏度高、特异性强、方便快速、对仪器设备要求不高的优点，非常适合大批量的BSE标本筛选工作。3.3免疫组织化学法（IHC）该法灵敏度高，且具有较高的解剖学分辨率，能够在福尔马林固定和石蜡包埋的材料上进行。既可以对PrPSC进行定性、定量研究，还能够定位。虽然只能用于死后诊断，但此法是特异性检测朊病毒的第一个方法，被当作是检测疯牛病的标准方法。4毛细管电泳法其原理是将抗原抗体竞争实验与毛细管电泳结合起来，检测标本中微量的蛋白质，该法灵敏度很高，可用于检测PrPSC含量很低的脑外组织，如血液等。缺点是难以标准化，结果的判断信号比，并不是实际的PrPSC含量。5双色强荧光目标扫描法其原理是运用共聚焦双色荧光相关分光镜技术检测微量的朊病毒。该法特异性很好、灵敏度极高，可检测到2pmol的蛋白质。检测采样早期大都是基于机体脑部组织，随着检测研究的深入及灵敏度的提高，逐渐发展了其他组织检测。6荧光RT-PCR检测法荧光RT-PCR技术是近几年建立起来的比较成熟的检测技术之一，该技术的原理是在普通PCR反应的基础上引入了更加特异的荧光探针，通过有无荧光释放以及荧光强度来检测，因而与普通PCR相比，具有更加快速敏感和特异的优势。7高效液相色谱有报道显示可以利用高效液相色谱检测与PrPSC相关的疾病。一般先对待测品进行PCR，然后用高效液相色谱检测（大概需30min），且高效液相色谱一次能测192个样品。因此，该法具有快速、可用于早期、灵敏和大批量等优点。8同位素测定德国科学家采用同位素测定动物的毛、骨等，检测牛是否喂饲动物蛋白饲料。作为可疑牛的辅助诊断手段。9其他尿液检测、心电图检测等