6细胞工程(安利国)第六章考试重点

胚胎工程1、胚胎发育的基本过程包括：生殖细胞的发生、受精、卵裂、囊胚、原肠胚、中胚层及体腔形成、胚层分化等主要阶段。2、体外受精技术主要包括：精子的采集与体外获能、卵子的回收及成熟培养、卵子与精子的体外受精、受精卵的体外发育、试管胚胎的移植等环节。3、胚胎移植技术：指良种母畜配种后，从其体内取出受精卵或早期胚胎，移植到同种生理状态相同的母畜体内继续发育成为新个体的技术。4、胚胎分割技术：指将一枚胚胎用显微手术的方法分割成几份，经体内或体外培养，然后移植人受体中，以得到同卵双生或同卵多生后代的技术。5、常用的胚胎分割技术有：显微针分割法、显微刀分割法、酶软化透明带后显微分割法及徒手分割法、酶消化去透明带后分割法。6、胚胎的低温冷冻保存技术主要包括：常规冷冻法、一步冷冻法、玻璃化法。7、发育分为个体发育和系统发育。8、受精：精子和卵子融合形成受精卵的过程。9、精子的获能现象：直接排出的精子不能使卵受精，必须在生殖道中停留一段时间后才具备受精能力，这一现象即为精子的获能现象。卵泡液、输卵管分泌物、血清、房水等多种液体都可以使精子获能。10、卵黄相对多的一端称为植物极，另一端称为动物极。11、卵母细胞与卵泡细胞构成卵泡，根据其发育程度可分为：原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡、成熟卵泡。P10012、卵裂分为：完全卵裂、不完全卵裂。13、卵裂的结果是分裂球形成中空的球状胚，称为囊胚。囊胚中间的腔称为囊胚腔，囊胚壁的细胞层称为囊胚层。14、原肠胚的形成方式主要有内陷、内移、分层、内转、外包等。在中胚层之间形成的腔称为真体腔。15、发育包括5种主要的机制：细胞分裂、细胞分化、模式形成、形态发生、生长。16、诱导：在发育中来自一群细胞的信号能影响到相接触的另部分细胞的发育的现象。17、有些动物早期胚胎的细胞并没有决定，每一个细胞都能够产生一个完整的胚胎，细胞的分化潜能远远大于它的正常命运，称为调整型。18、模式形成：是胚胎细胸通过建立空间与时间的活动模式，从而使结构得到高度有序的发育过程。19、体外受精：指哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术。它的基本原理是：在人工模拟体内环境，包括营养、温度、湿度、气体、渗透压、PH等，使卵丘卵母细胞复合体中的初级卵母细胞成熟，同时使精子获能，完成受精。20、体外受精技术的主要操作步骤有：（1）卵母细胞的采集和成熟培养（2）精子的获能处理（3）体外受精（4）受精卵的体外培养5）胚胎移植21、超数排卵：指人为注射外源促性腺激素，促使卵巢排出较正常情况下更多的成熟卵子。最常用的方法是利用孕马血清促性腺激素PMSG。在母牛发情期的第九天开始肌肉注射FSH，以递减剂量连续注射4d，每天注射两次，总剂量为300~400U，第三天的上下午在注射FSH的同时肌肉注射氯前列烯醇各两支。22、卵母细胞的采集方法有：超数排卵、从活体卵巢中采集卵母细胞、从屠宰后母畜卵巢上采集卵母细胞。23、精子的获能过程：第一阶段是脱出精子表面的抗原物质和去能因子DF，增强膜通透性。第二阶段是精子细胞膜蛋白变化，即发生顶体反应。24、精子获能的方法：体内获能（从交配母畜的子宫内冲取精子用于受精）、体外获能（精子的洗涤，经过1次或多次离心后除去杂质、死精子、低活力精子，洗涤液为BO液和改良的TALP液；二是使用高离子强度液、钙离子载体、肝素以促使钙离子进入精子顶体并刺激精子内部PH升高，从而诱发精子获能）25、显微受精技术主要包括透明带下注射和卵细胞浆内单精子显微注射技术。26、发育阻滞：体外受精的早期胚胎在体外发育过程中，往往会停滞在某一阶段不再发育的现象。27、克服阻滞现象的方法：一是改进培养液成分，改善培养条件，尽量满足早期胚胎发育所需物质，确定并减除对其发育不利的成分；二是利用体细胞共同培养体系，以提供发育所需的物质条件。28、胚胎移植：也称受精卵移植，是指将良种母畜配种后，从其生殖道取出受精卵或早期胚胎，移植到同种生理状态的母畜体内，使之继续发育成为新个体技术。29、胚胎移植的意义：（1）发挥优良母畜的繁殖力，迅速扩大优良畜种数量，加速优良畜种的推广应用；（2）缩短世代间隔，增加选择强度，促进家畜改良速度；（3）长期保存冷冻胚胎，便于优良品种的种质运输和保存；（4）是胚胎分割、胚胎嵌合、性别鉴定和核移植等其他胚胎生物技术的基础，也是基础生命科学研究的重要手段。30、同步发情：利用某些激素制剂人为地控制并调整一群母畜发情周期的进程，使之在预定时间内集中发情的技术。一种方法向母牛群同时施用孕激素，抑制卵泡的发育和发情，经过一定时期同时停药，随之引起同期发情。另一种方法是利用前列腺素F2a使黄体溶解，中断黄体期，从而提前进入卵泡期，使发情提前到来。31、胚胎采集方法：手术法（输卵管冲卵法）、非手术法（用二路导管的冲卵器）32、体外培养液中低剂量的葡萄糖的添加是必要的，在胚胎发育早期，必需氨基酸不仅没有作用，甚至还会对胚胎发育产生副作用。33、血清是胚胎培养中添加的主要蛋白质源物质，在保持细胞的存活、促进生长。维持细胞PH及渗透压的稳定、增加细胞弹性及膜的完整性等方面发挥着重要作用。34、谷胱甘肽GSH是一种生物体内应用的抗氧化物。有两种来源的GSH可被胚胎利用：一是卵母细胞合成的GSH，以满足受精后发育中的需求；二是生殖道分泌的GSH。35、-15°~-50°C是一个致死温度区。抗冻保护剂常分为：细胞内液抗冻保护剂（甲醇、乙二醇、丙二醇、甘油）、细胞外液抗冻保护剂（半乳糖、蔗糖）。36、胚胎冷冻方法：常规冷冻法、一步冷冻法、玻璃化法（对胚胎毒性较大）。37、动物性别控制：指通过人为干预，使动物按人们的愿望繁殖所需性别后代的技术。38、动物的性染色体决定类型主要包括：雄性异配子型（XY和XO型）、雌性异配子型（ZO和ZW型）和雄性单倍性型（受精发育为雌性，不受精发育为雄性）。39、性别控制的方法在哺乳动物中主要应用X和Y精子的分离和鉴定胚胎性别的方法。40、X与Y精子的差别：（1）Y精子有F小体；（2）X染色体的DNA含量比Y染色体多，重量体积也大；（3）Y精子活力比X精子强，运动速度快，Y精子尾部膜电荷较多，而X精子头部膜电荷较多；（4）Y精子耆碱性，而X精子则耆酸性。（5）只有Y精子才能表达H-Y抗原。41、精子的分离方法有：沉降法、离心沉降法、电泳法、免疫学分离法、流式细胞分离法、化学药品处理法。42、胚胎性别的鉴定方法有：细胞学方法（通过核型分析对胚胎进行性别鉴定）、生物化学微量分析法（通过测定与X染色体相关的酶活性，来达到鉴定胚胎性别的目的）、免疫学方法（利用H-Y抗原或H-Y单克隆抗体检测胚胎是否存在雄性特异性H-Y抗原，从而进行的胚胎鉴定方法。又包括：细胞毒性分析法、间接免疫荧光法、囊胚形成抑制法）、分子生物学方法（利用Y染色体上SRY基因来鉴别胚胎的性别，包括：DNA探针法和PCR扩增法）。43、应用最广的雄性激素是17α2甲基睾酮，雌性激素是17β2雌二醇和雌酮。44、性别控制的意义P120