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鲜切花在采后流通过程及瓶插期间,易遭受失水胁迫而导致损失。研究表明,当植物处于逆境条件时,植物细胞内自由基平衡会遭到破坏【1】,自由基的增加会导致植物细胞的伤害,首先是启动膜脂过氧化或膜脂脱脂作用,破坏膜结构山。过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)等是植物酶促防御系统的重要保护酶,与植物的衰老、抗逆性等密切相关【2】称花瓣1g加人50mmol/LpH值7.0磷酸缓冲液5ml于冰浴中研磨成匀浆,匀浆倒入离心管中,在转速为15000r/min下离心30min,上清液即为含酶溶液,用于测定过氧化氢酶(CAT),CAT活性测定采用化学滴定法,5ml反应液中含50mmol/LpH值7.0磷酸缓冲液,8mmol/LH2O2及100μL酶提取液,30℃反应1min,加2ml10%aH2S02终止反应,用2mmol/LKMnO4认滴定剩余H202,根据H2O2消失量计算CAT活性.CAT是细胞内清除街H2O2的主要酶。由图可见,随着月季切花瓶插天数的延长,花瓣内的CAT活性都呈现先上升后下降的趋势,但BS+4PU-30处理明显地延缓这一进程。对照花瓣SOD和CAT活性在第2d后开始剧烈下降,至第6d活性分别下降了37.6%和32.3%,BS十4PU-30则减缓这一下降速度,第6dSOD下降不大,CAT活性仅降低了3.0%,说明4PU-30对月季切花瓶插期间花瓣内活性氧清除酶活性的降低具有显著的延缓作用。CAT是重要的活性氧清除酶,活性氧水平的提高会加剧膜脂过氧化,造成植物细胞过早衰老[9]。试验中A、B、C三处理能提高玫瑰切花花瓣中CAT活性,能有效抑制花瓣中活性氧的伤害,从而延缓玫瑰切花的衰老进程。国内外不少研究表明细胞和组织中活性氧产生而不能被及时清除是造成衰老的主要原因,而清除活性氧能力大小的主要标志是抗活性氧毒害的内源保护酶SOD、CAT活性的高或低。一旦SOD和CAT等保护酶活性被削弱,就会造成活性氧的积累,从而加剧膜脂质过氧化程度,使膜结构遭到破坏,膜透性增大【陈少裕.膜脂过氧化对植物细胞的毒害[J].植物生理学通讯,1991,(2):84一87】。我们的实验表明,经水杨酸处理后的实验组,月季花瓣内的SOD和CAT活性下降的速度均慢于对照,我们得到的结果和李柏林、梅慧生【李柏林,梅慧生.燕麦叶片衰老和活性氧代谢的关系习[J].植物生理学报,1989,15(4):6一9.】的研究结果一致。因此可以认为水杨酸能增强月季切花瓶插期间的SOD、CAT活性,减少切花组织内的活性氧的积累,延缓月季切花的衰老速率,延长瓶插观赏时间。SOD的作用是去除细胞内多余的过氧化物[24],起到一个协调组织内酶系统的作用,减缓膜脂的过氧化进程,从而达到减缓月季切花衰老的目的。根据SOD活性测定的结果表明,不同测定时间的SOD活性实验组均明显高于对照组;表明了水杨酸对月季切花瓶插后SOD活性的影响,证明水杨酸能增强SOD活性,减缓月季切花的衰老,延长瓶插寿命的结论颉敏华认为CAT对组织伤害、逆境具有保护效应[15],在月季[16]、桂花[17]等上研究,随着植物成熟衰老,CAT活性呈下降趋势或初期升高,之后下降。本试验瓶插期间CK的POD活性一直下降,其它3个处理呈先上升后下降趋势,与前人报道相符。经过水杨酸处理的3个实验组较CK的POD活性明显上升,但处理B、C之间差异不显著;在CAT活性上,4个处理表现一致,初期升高,之后下降,再次验证了前人的研究结果。王建华,刘鸿先,徐同.超氧物歧化酶(SOD)在植物逆境和衰老生理中的作用[J].植物生理学通讯.1989.(1):1~7[2]HuysteeVanRB.Somemolecularaspectsofplantperoxidasebiosyntheticstudies[J].Ann.Rev.PlantPhysiol..1987.38:205~219.月季切花衰老机理的研究1.1水分代谢失水是月季切花衰老的主要原因。鲜切花离体后,加速衰老的主要因素之一是水分亏缺,脱离母体后,切花体内平衡被破坏,出现萎蔫现象,到最后花瓣干枯和皱缩。因此,防止失水是月季切花保鲜的重要措施。此外,细菌、真菌、酵母菌等的繁殖会造成木质部阻塞,使传导能力逐渐降低,而持续蒸腾作用引起的叶片水势下降将进一步激化。1.2细胞膜及膜脂过氧化鲜切花在衰老过程中,细胞膜的透性增加。用来衡量膜脂过氧化及细胞膜透性的指标分别是丙二醛(MDA)含量和相对电导率。细胞膜透性增加造成细胞内含物流出和细胞间隙中渗出物增加,加剧了水分的丧失,从而加剧了切花的衰老。随着瓶插时间的延长,月季切花MDA含量和相对电导率上升,说明切花膜脂过氧化程度加剧,细胞膜的相对透性增加。1.3酶活性变化酶的活性变化与鲜花衰老密切相关。SOD是与活性氧代谢密切相关的酶类,SOD活性与植物抗氧化胁迫能力呈正相关,在切花衰老过程中SOD的活性均呈先升后降的趋势。CAT活性的变化和SOD有着相似先升后降的趋势。1.4膜脂过氧化植物组织衰老与生物膜的降解密切相关,膜完整性和功能的丧失是衰老初期的基本特征。脂质过氧化是组织生物膜降解的主要机制。若其平衡遭受破坏,过剩的自由基会引发或加剧膜脂过氧化作用,造成细胞膜损伤,代谢紊乱,导致衰老甚至死亡。与细胞膜氧化平衡有关的酶类自由基能导致植物衰老,植物在正常的生长条件下,本身存在着自由基的产生和清除的平衡系统。切花在受到失水胁迫时,植物细胞产生并积累O2-、OH-、H2O2等自由基,同时细胞相应的保护酶系统也得到加强,避免剧烈的膜脂过氧化作用对切花的破坏。植物体内分解和降低活性氧的保护酶系统包括:过氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)和过氧化物酶(peroxidase,POD)。其中POD和CAT主要清除H2O2,SOD主要清除O2-,酶活性和活性氧的含量密切相关。在相同失水胁迫强度下,不同失水胁迫耐性的切花膜脂过氧化保护酶活性不同脯氨酸是植物体内的一种重要渗透调节物质,渗透调节是植物适应水分亏缺的主要生理机制之一。脯氨酸是植物体内最重要和最有效的有机渗透调节物质之一,它在植物体内的含量在很大程度上能反映出植物抗逆性的强弱[16]。干旱胁迫下,游离脯氨酸大量积累,不仅起到渗透调节作用,还因其水合能力强而减少水分丢失。脯氨酸除了作为可溶性物质改变细胞的渗透压以防脱水外,还有很多与抗旱有关特性。
本文标题:鲜切花在采后流通过程及瓶插期间
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