青霉素钾检验SOP

GMP管理文件题目青霉素钾检验标准操作规程制定审核批准制定日期审核日期批准日期颁发部门颁发数量3生效日期分发部门文件编码共3页第1页一、目的：建立青霉素钾检验的标准操作规程，保证正确操作。二、依据：《中国兽药典》2005年版一部。三、适用范围：适用于青霉素钾的检验。四、责任者：QC检验员五、正文：1．质量标准：（见青霉素钾质量标准）。2．试剂：2.01稀盐酸2.02乙腈2.030.1mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节PH值至2.5）3．仪器与用具3.01紫外分光光度计3.02水分测定仪3.03酸度计3.04高效液相色谱仪3.05电子天平4.1性状本品为白色结晶性粉末；无臭或微有特异性臭；有引湿性；遇酸、碱或氧化剂等即迅速失效，水溶液在室温放置易失效。则判定该项合格。4.2鉴别：4.2.1在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。则判定该项合格。4.2.2本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱一致。（委托检验）4.2.3取铂丝,用盐酸湿润后,蘸取供试品,在无色火焰中燃烧,火焰即显紫色。则判定该项合格。4.3检查4.3.1吸收度取本品，加水制成每1ml中含1.88mg的溶液，照分光光度法（详见紫外分光光度法标准操作规程）测定，在280nm的波长处，其吸收度不得大于0.10；在264nm的波长处有最大吸收，吸收度应为0.80～0.88，则判定该项合格。4.3.2结晶性取本品少量，依法检查（详见结晶性检查法标准操作规程），应符合规定。则判定该项合格。4.3.3酸碱度取本品，加水制成每1ml中含30mg的溶液，依法测定（详见PH值测定法标准操作规程），PH值应为5.0～7.5。则判定该项合格。4.3.4溶液的澄清度与颜色取本品5份，各0.3g分别加水5ml使溶解，溶液应澄清无色；如显浑浊，与1号浊度标准液（详见溶液的澄清度检查标准操作规程）比较，均不得更浓；如显色，与黄色或黄绿色1号标准比色液（详见溶液的颜色检查法标准操作规程第一法）比较，均不得更深，则判定该项合格。4.3.5水分取本品，照水分测定法（详见水分测定法标准操作规程第一法A）测定，含水分不得过0.5%，则判定该项合格。4.3.6细菌内毒素取本品，依法检查(详见细菌内毒素检查法标准操作规程)，每100青霉素单位中含内毒素的量应小于0.01EU，则判定该项合格。4.3.7无菌取本品，用青霉素酶法灭活后，依法检查（详见无菌检查法标准操作规程），应符合规定，则判定该项合格。4.3.8青霉素聚合物照分子排阻色谱法（详见分子排阻色谱法标准操作规程）测定。色谱条件与系统适用性试验用葡聚糖凝胶G-10(40～120μm)为填充剂，玻璃柱内径1.3～1.6cm，柱高度30～40cm。以pH7.0的0.1mol/L磷酸盐缓冲液〔0.1/L磷酸氢二钠溶液-0.1mol/L磷酸二氢钠溶液（61：39）〕为流动相A，以水为流动相B，流速为每分钟1.5ml；测定波长为254nm。分别以流动相A、B为流动相，取0.1mg/ml蓝色葡聚糖2000溶液200μl，注入色谱仪，理论板数按蓝色葡聚糖2000峰计算均不低于700。拖尾因子均应小于2.0。在两种流动相系统中蓝色葡聚糖2000峰保留时间的比值应在0.93～1.07之间，对照溶液主峰和供试品溶液中聚合物峰与相应色谱系统中蓝色葡聚糖2000峰的保留时间的比值均应在0.93～1.07之间。另以流动相B为流动相，精密量取对照溶液200μl，连续进样5次，峰面积的相对标准偏差应不大于5.0%。题目青霉素钾检验标准操作规程共3页第2页题目青霉素钾检验标准操作规程共3页第3页对照溶液的制备取青霉素对照品约20mg，精密称定，加水溶解并稀释成每1ml中约含0.1mg的溶液。测定法取本品约0.4g，精密称定，置10ml量瓶中，加水使溶解并稀释至刻度，摇匀，立即精密量取200μl，注入色谱仪，以流动相A为流动相进行测定，记录色谱图；另精密量取对照溶液200μl，注入色谱仪，以流动相B为流动相，同法测定。按外标法峰面积计算，含青霉素聚合物以青霉素计不得过0.08%。则判定该项合格。4.4含量测定照高效液相色谱法（详见高效液相色谱法标准操作规程）测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.1mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH值至2.5）-乙腈（70：30）为流动相；检测波长为225nm。取青霉素对照品和2-苯乙酰胺各适量，加水制成每1ml中含约0.2mg的混合溶液，取20μl，注入液相色谱仪，几路色谱图，色谱峰流出顺序为2-苯乙酰胺、青霉素，两峰之间的分离度应不小于2.0。理论板数按青霉素峰计算应不低于1600。测定法取本品适量，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.5mg的溶液，摇匀，精密量取10μl，注入液相色谱仪，几路色谱图；另取青霉素对照品适量。同法测定。按外标法以峰面积计算，其结果乘以1.1136，即为供试品中C16H17KN2O4S的含量。每1mg的C16H17KN2O4S相当于1598青霉素单位。计算公式如下：结果判定：按无水物计算，含青霉素按C16H17KN2O4S计算，不得少于96.0%。相对偏差不得过2.0%。则判定该项合格。供试品含量%=