组培大赛知识点

组培大赛知识点1、植物组织培养：在无菌和人工控制的环境条件下，利用人工培养基，对植物的胚胎、器官、组织、细胞、原生质体等进行离体培养，使其再生发育成完整植株的过程。茎尖培养：切取植物茎尖部分或茎尖分生组织部分进行无菌培养的方法。愈伤组织培养：在人工培养基上诱导植物外植体产生一团无序生长的薄壁细胞及对其培养的技术。细胞脱分化：也称去分化，是指离体培养条件下生长的细胞、组织或器官经过细胞分裂或不分裂，逐渐失去原来的结构和功能而恢复分生状态，形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或称为未分化细胞特性的细胞的过程。细胞分化：是指导致细胞形成不同结构、引起功能改变或潜在发育方式改变的过程。再分化：离体培养的细胞或组织可以由脱分化状态重新进行分化，形成另一种或几种类型的细胞、组织、器官，甚至形成完整植株，这个过程叫做再分化。细胞全能性：任何具有完整细胞核的细胞都具有发育成一个独立完整植株的潜力。胚状体：在植物组织培养中，起源于一个非合子细胞、经过胚胎发生和胚胎发育过程形成具有双极性的胚状结构，叫胚状体或体细胞胚。外植体：用于培养的植物胚胎、器官、组织、细胞、原生质体通常成为外植体。继代培养：在外植体或培养物培养一段时间后，为了防止培养的细胞老化，或培养基养分利用完而造成营养不良及代谢物过多积累而产生毒害的影响，要即使将其转接到新鲜培养基中进行培养，使其能顺利的增殖、生长、分化，形成完整的植株。这一过程称为继代培养。液体培养：在培养基中不添加任何凝固剂使培养基呈流体状态的培养。消毒：消除培养基及培养设备里的微生物及细菌等以达到无菌条件。器官培养：是指利用植物根、茎、叶、花、果实及子房和胚等器官的全部或部分或器官原基进行离体培养的技术。胚胎培养：在无菌条件下对植物的胚、子房、胚珠和胚乳进行离体培养的技术。褐变：在离体快繁的初代培养和启动生长中，往往会出现外植体接种到培养基中后，很快就会出现外植体及其接触到培养基的部分变成褐色的现象，称为褐变。接种：把经过表面灭菌的植物材料经分割得到的器官、组织或细胞，在无菌条件先转移到无菌培养基的过程。初代培养：将外植体进行的第一次培养。体细胞杂交：又称细胞融合或原生质体融合，是指将不同来源的原生质体相融合并使之分化再生、形成新物种或新品种的技术，可实现远远杂交，打破生殖隔离。2、在植物组培快繁中为什么常用茎尖作为材料？因为茎尖分生组织基本不带病毒，可通过离体培养活的无病毒植株。3、目前常用的植物组织培养基是什么培养基和主要成分？Ms培养基主要成分：大量元素/微量元素、铁盐、维生素和氨基酸4、植物原生质体融合的主要方法？聚乙二醇（PEG）法、高钙高pH法和电融合法5、调控培养条件下细胞的生长和分化的主要植物激素？IAA、CTK6、植物组织培养的特点？第一，实验材料来源单一，无性系遗传特性一致；第二，成本低，效率高；第三，环境条件可控，误差小；第四，生长快，周期短，可重复性强；第五，可连续运行、周年试验或生产，利于自动化控制。7、组培的原理？植物细胞全能性。8、配置的培养基经过高压灭菌后不凝固，可能是什么原因造成的？Ph偏酸9、植物茎尖培养脱毒的原理？植物体内病毒梯度分布学说：在植物不同组织和部位，病毒分布和浓度不同，顶端分生组织不带病毒。10、培养基的制作步骤分为哪几步？母液的配制与保存、培养基的配制11、植物材料表面灭菌常用的药物？Hgcl2酒精NaclO12、愈伤组织细胞的分化一般分几个时期？各有何特点？启动期（诱导期）：这个时期外植体细胞大小没有显著变化，但细胞内的代谢很活跃。特点①呼吸作用加强，耗氧量明显增加②核糖体数量增加并大多形成多聚核糖体③RNA和蛋白质的量迅速增加。分裂期：细胞分裂快，结构疏松，缺少组织结构，维持其不分化的状态。分化期：细胞形态大小保持相对稳定，体积不再减小，成为愈伤组织的生长中心。13、细胞分裂素在植物组织培养中的主要作用？促进细胞分裂和分化，诱导胚状体和不定芽的形成，延缓组织的衰老和促进蛋白质的合成。常用于芽的诱导和继代增殖培养。14、影响组培苗移栽入土成活的主要因素有哪些？温度不适、湿度小、光照强15、植物组织和细胞培养过程中，形成再生植株有哪些途径？悬浮培养细胞的植株再生：一是由悬浮细胞直接形成体细胞胚；二是先将悬浮培养细胞在半固体培养基上诱导形成愈伤组织，然后再由愈伤组织再生植株。16、植物组织培养根据培养对象或取材部位等可以分为哪些类型？根据培养对象：植株培养、胚胎培养、器官培养、组织培养、细胞培养、原生质体培养根据培养过程：初代培养、继代培养根据培养基的物理状态：固体培养、液体培养17、简述植物组培快繁的程序？无菌培养的建立、初代培养、继代培养和快速增殖、诱导生根、驯化移栽18、在植物组织培养中，造成组培材料污染的因素有哪些？如何采取相应的措施防止或降低污染？污染原因：一是外植体表面消毒不彻底；二是无菌操作过程中培养基和接种工具消毒不彻底、接种室和超净工作台不符合要求、操作人员操作不规范、环境中的空气不洁净等。采取措施：注意选择植物材料部位及取材时期；严格消毒灭菌；规范操作，合理控制环境条件。19、植物组织培养实验室的组成和主要设备？组成：准备室、接种室、培养室、驯化室主要设备：灭菌设备、细胞器分离和计数设备、超净工作台、显微镜和解剖镜、接种工具、培养架、称量仪器等。20、以制作配方为ms的培养基1L为例，叙述组培培养基的配制步骤。（大量元素母液为10×，微量元素母液、铁盐母液、有机物母液均为100×，激素母液浓度为1mg/ml）①准备好称量用的器具及配制培养基所需的电磁炉等各种仪器；②吸取母液的量：大量元素100ml，微量元素、铁盐、有机物各10ml，激素5ml；并称量琼脂6g，蔗糖30g；③在容器内装300ml左右的纯水，依次加入琼脂、大量元素、微量元素、铁盐、有机物、激素等，再加入蔗糖并搅拌均匀；④加水定容至1L，边加热边用玻璃棒搅拌均匀；⑤用1mol/L的Hcl或NaoH调整培养基的pH值至5.5~6.0⑥待培养基温度降至50度时开始分装，每个容器中的量为1/3~1/4。最后封口。21、植物组织培养基中常用的细胞分裂素和生长素有哪些？细胞分裂素：6-BA、ZT（玉米素）、KT（激动素）、2-ip、TDZ生长素：IAA、IBA、NAA（萘乙酸）、2,4-D、ABT生根粉22、植物组织培养中外植体表面消毒时常用的消毒剂有哪些？70%~75%酒精（10~30s）、升汞（Hgcl2）(6~12min)、NaClO(5~50min)、漂白粉(20~30min)、6%~12%双氧水（5~15min）、新洁尔灭23、植物组织培养中常用的培养基是什么？Ms培养基24、植物组织培养按培养的过程分为哪两种培养？按培养的方式？培养过程：初代培养、继代培养培养方式：25、植物组织培养中常用的环境培养条件分别是什么？温度25℃左右，光照3000~4000lx，气体，湿度70~80%，培养基的渗透压，培养基的pH值5.6~5.826、胚状体区别与不定芽的主要特征？胚状体：在植物组织培养中，起源于一个非合子细胞、经过胚胎发生和胚胎发育过程形成具有双极性的胚状结构，叫胚状体或体细胞胚。不定芽：在叶腋和茎尖以外其他器官上所形成的芽成为不定芽。27、分离植物原生质体常用的试剂？果胶酶、纤维素酶、半纤维素酶（去除细胞壁，释放原生质体）28、如何配制植物激素？先用稀酸或稀碱或酒精充分溶解，再加水定容，在弱光条件下进行。29、如何将从户外采集的植物叶片变成无菌外植体？使用化学药品对外植体进行合理有效的灭菌30、试管苗从出瓶移栽到栽培管理要注意哪些问题？①从瓶中取苗时，手要轻，不能用力过猛，防止扯断苗根；②试管苗清洗时，手要轻；若根过长，可适当减掉一段；③移栽基质以疏松、透气、排水良好者为宜，并要彻底消毒；④已经植入育苗盘的试管苗，应在清洁可控温、湿度大的环境下生长；⑤植苗入盘的时间，最好选在无风阴湿的天气；⑥移栽时拿苗要轻，移栽约一周后，要适当喷施叶面肥。31、在超净工作台上接种时用于消毒道具的盛有酒精的瓶子着火了该如何处理？盖上盖子32、植物组织培养植株再生的途径？不定芽途径、腋芽增殖途径、原球茎途径、小鳞茎途径、胚状体途径33、褐化现象的产生原因和预防措施各是什么？产生原因：外植体中的质膜系统被破坏，多酚物质和酚氧化酶即可接触进行化学反应，产生有毒的醌类物质，其颜色为褐色到黑色。对外植体产生伤害。预防措施：（1）取材部位预处理（避光或黑暗处理）；（2）用1/2MS培养基，弱光或黑暗条件培养；（3）加入防褐剂；（4）连续继代培养。34、植物快繁的器官再生主要分为五种类型，并加以介绍不定芽途径腋芽增殖途径原球茎途径小鳞茎途径胚状体途径35、加入琼脂和不加入琼脂分别叫什么培养？固体培养、液体培养36、培养基中所用的大量元素有哪些？NPSKCaMg