(USP1092)溶出度试验的开发和验证中文

前言目的：溶出度试验的开发和验证（1092）目的是为溶出度的测定提供了全面的开发和验证的方法以及相应的分析技术。本指导原则贯穿溶出度测定的全部过程，并对方法验证提供了指导和验证标准。同时它还涉及对普通制剂和缓释制剂产生的数据和接受标准进行说明。范围：本指导原则讨论了溶出度试验的开发和验证，重点是固体口服剂型。所提出的概念也可能适用于其他剂型和给药途径。对于一些不同于USP章节中的设备和程序均已给出合适的解释。本指导原则的基本框架如下：1.前期评估（对产品开发以及溶出度方法开发的前期研究评估）1.1滤膜相容性研究（PerformingFilterCompatibility）1.2原料药在不同溶媒中溶解度和稳定性的测定1.3选择溶出介质和体积1.4选择溶出设备（桨法和篮法以及其他方法）2.方法开发2.1脱气2.2沉降2.3搅拌2.4研究设计2.4.1取样时间点2.4.2观察2.4.3取样2.4.4清洗2.5数据处理2.6溶出度试验的评估3.分析整理3.1样品的处理3.2过滤3.3离心3.4分析过程3.5光谱分析3.6HPLC分析4.程序化4.1溶出介质的准备4.2样品的选择和取样时间的设计4.3取样和过滤4.4清洗4.5使用软件和计算机处理结果4.6找出需要验证的存在偏差的过程5.验证5.1专属性/安慰剂的干扰5.2线性和范围5.3准确度/回收率5.4精密度试验5.4.1重复性试验5.4.2中间精密度试验5.4.3重现性试验5.5耐用性试验5.6对照品和供试品的稳定性试验5.7程序化验证6.接受标准6.1普通速释制剂6.2缓释制剂6.3控释制剂6.4多重溶出度试验6.5溶出度结果的解释6.5.1普通速释制剂6.5.2缓释制剂6.5.3控释制剂7.参考文献1.前期评估（对产品发展以及溶出度方法开发的前期研究评估）在方法开发之前，对用以评价剂型的溶出行为的滤膜、溶出介质、介质体积和溶出设备进行筛选是非常重要的。1.1滤膜相容性研究在获得准确试验结果中，过滤是一个样品制备的关键步骤。过滤的目的是为了去除溶出液中未溶解的药物和辅料。如果不把未溶解的药物和辅料从供试品溶液中去除，那么那些未溶解的药物颗粒会继续溶解并改变试验结果，因此，如果取样管中没有过滤器，必须对溶出度样品立即过滤。过滤同时也可去除可能干扰测定的不溶性辅料。选择适当的过滤材料是非常重要的，和应该完成的，并且昀好在早期的溶出开发过程中用实验进行确定。在选择滤膜中重要考虑是滤膜的材料，型号和孔径大小。过滤器的选择是根据评价过程中溶出程序开发的早期阶段，在后期试验中可能需要重新考虑，比如药品或成分的变化以及辅料质量的变化（微晶纤维素粒径的改变）。用于溶解试验的过滤器有管路过滤器，过滤盘或frits，滤头，或针头式过滤器。过滤材料必须与介质和药物兼容。一般的孔径范围从0.20到70μm，如果需要其他孔径的过滤器同样可以使用。如果原料药的粒度很小（例如，微分化颗粒或纳米颗粒），找到一个过滤器孔径滤除这些小颗粒滤膜至今还具有挑战性。过滤可能发生对药物的吸附，并需要进行评估。过滤材料将与溶解介质相互作用，影响单个溶质的回收率，必须通过具体案例进行考虑。不同的过滤材料具有不同的药物结合特性。滤膜对药物的吸附率依赖于药物浓度。因此，吸附性应在预期浓度范围内不同浓度样品溶液进行评估。由于药物吸附是可饱和的，弃去一定体积的初滤液收集随后的续滤液，以达到接近原来的溶液浓度的样品也是可取的。通常选择适合的过滤材料，昀大限度地减少滤膜吸附干扰，润湿滤膜对减少吸附也是必要的。此外，从过滤器滤下的溶出物不干扰检测也是非常重要的，一般可以通过溶出介质过滤前后进行比较得知，滤膜是否干扰样品的测定。根据要过滤样品溶液的体积以及样品溶液中颗粒的量选择滤膜孔径。使用正确的滤膜孔径将提高溶液的通过率和回收率，并减少滤膜堵塞。使用大孔径滤膜过滤小体积溶液，可以导致样品溶液损失量过大而收集不到所用样品量；使用小孔径滤膜过滤，需要更高的压力和较长的时间，并且溶液滤膜迅速堵塞。用于USP装置4的过滤器使用时需要特别注意，因为他们使用在流中（应该是自动取样器中的过滤装置），不溶颗粒沉积在过滤器，创造流动的阻力。在自动化系统的情况下，对滤膜材料和孔径大小的过滤器的选择可以用类似的方式来手动过滤。流通过滤器的流量和堵塞可能自动化系统中是关键的。通过试验比较过滤和未过滤的标准和样品溶液差别，验证该滤波器是适当。这是通过首先制备一个合适的标准溶液和样品溶液。例如，准备在烧杯中一个典型溶解的样品，大力用磁力搅拌器搅拌使药物溶解完全。对于标准溶液，比较过滤溶液（弃去的适当体积后）和未过滤的溶液品的结果；样品溶液，比较过滤样品（弃去适当体积后）和离心分离，过滤解决方案。1.2原料药在不同溶媒中溶解度和稳定性的测定在选择合适的溶出介质的过程中，需要确定原料药的物理化学特性。在溶出度试验需要决定溶出介质的组成，重要的是要评估缓冲液和pH值，以及不同的表面活性剂（如果需要）对药物的溶解度和稳定性的影响。在37℃通过测定不同介质中的饱和浓度，用摇瓶溶解法（平衡溶解度）测定药物的溶解性，为了平衡药物和溶出介质中缓冲液之间的离子潜在影响，使用盐酸和氢氧化钠的混合物对溶解度进行研究；除了典型的缓冲溶液。在某些情况下，评估药物在37℃以外条件下（即，25℃）的溶解度可能也是必要的。在溶解度试验过程中应检查上清溶液的pH值，以确定在溶解过程中pH值是否改变。也可使用其他可供选择的方法进行溶解度测定。溶出典型的介质可如下（未按照优先顺序列出）：稀盐酸，在生理pH值范围为1.2-7.5缓冲溶液（磷酸盐或者醋酸盐），模拟胃或肠液（含有或不含酶）和水。例如某些药物，药物和缓冲液或盐的不相容可能会影响缓冲液的选择。用缓冲液和酸的体积摩尔浓度对药物有增溶作用，这个因素也需要评估。有时候水溶性介质中（酸性水溶液或缓冲溶液）可能添加一定比例的表面活性剂（如十二烷基硫酸钠（SDS），聚山梨醇酯，或十二烷基二甲基氧化胺）以提高药物的溶解度。选择用于溶解度试验的表面活性剂时应涵盖所有常用种类的表面活性剂，比如阴离子、非离子型和阳离子，当已经确定一个合适的表面活性剂时，应对表面活性剂不同的浓度进行研究，以确定达到漏槽条件所需的昀低浓度。一般情况下，表面活性剂的浓度高于它的临界胶束浓度（CMC）。表1列出了溶出介质中常用的表面活性剂，表中提供了CMC的近似的临界值，以便我们参考，此外，表中所列表面活性剂并不全面，不能排除未列出的表面活性剂。其他表面活性剂，如羟丙基β-环糊精，已被用来作为溶出介质添加剂来提高难溶性化合物的溶解，美国食品药品管理局（FDA）溶出度数据库中，已经收载含有羟丙基β-环糊精的溶出介质（1）。通常情况下，表面活性剂的加入量以满足达到漏槽条件所需的溶出介质体积。由于使用不同级别的表面活性剂会影响药物的溶解度，因此要控制表面活性剂的级别和纯度。例如，SDS只有在技术级和高纯度级别才可以使用。在使用HPLC方法进行分析时，从不同来源的聚山梨酯（吐温）80会影响它的适用性。反离子或pH值可能会影响表面活性剂溶液的溶解性或稳定性。例如，当含有SDS的磷酸盐缓冲液中钾盐浓度为0.5mol/L时，就形成了沉淀析出，但是使用磷酸钠制备含有SDS的介质时，可以避免这种现象发生。表1常见表面活性剂的临界胶束浓度表面活性剂CMC（%重量/体积）参考文献十二烷基硫酸钠（SDS,SLS）0.18%-0.23%2-4牛磺胆酸钠0.2%3胆酸钠0.16%3阳离子脱氧胆酸钠0.12%3十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）0.033%-0.036%（0.92-1.0mM）5,6阴离子苄索氯铵（季铵盐1622）0.18%(4mM)2聚山梨酯20（吐温20）0.07%-0.09%3,7非离子聚山梨酯80（吐温80）0.02%-0.08%3.7辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯（Labrasol）0.01%4聚氧乙烯蓖麻油35（CremophorEL）0.02%8聚氧乙烯月桂醇醚（Brij35）0.013%9辛苯聚醇（TritonX-100）0.01%-0.03%3,10两性离子月桂基二甲基胺N-氧化物（LDAO）0.023%11通常，溶出介质为缓冲盐溶液，但是，对于非pH值依赖性的产品可以使用纯化水作为溶出介质。不推荐使用纯化水作为溶出介质的原因：水的质量取决于它的来源，而水的pH值不像缓冲溶液能够严格控制。此外，水的pH每天都变化在运行期间也会改变取决于原料药和辅料。另外使用水性有机溶剂混合物作为溶出介质是不推荐的，但是，特殊情况下（有充分适当的理由），也是可以接受的。必要时，应该对原料药的稳定性进行考察，在所选择的溶出介质中加入辅料，在37℃条件下进行考察。这种升高的温度潜在的降低溶液的稳定性（降解）。稳定性应允许有足够的时间来完成或重复分析过程。当沉淀发生时，物理稳定性也需要关注，因为室温或冷藏贮存时会降低药物的溶解度。1.3溶出介质和体积选择当开发一个溶出试验方法时，一个目标是满足漏槽条件，漏槽条件定义为溶出介质体积至少为体积药物饱和溶液的所需体积的三倍。当满足漏槽条件后，溶出度结果能够更好的反映药物制剂的质量。在适当条件下，介质不满足漏槽条件也是可以接受的。溶解介质的组成和体积取决于药物溶解性试验的结果。例如，表面活性剂的选择和浓度选择，需要根据药物溶解度数据和溶出度曲线进行判断。当交联明胶胶囊或明胶包衣的制剂溶出失败时，在溶出介质中允许使用酶，这同溶出度（711）指导原则一致，。在Capsules–DissolutionTestingandRelatedQualityAttributes（1094）中可以找到发生交联现象和采用酶进行方法开发的研究。其验证应根据第5节规定的所使用酶作为溶出度测定的方法验证要求进行验证。另一种选择是使用胃液和人工胃液或者人工肠液。这些溶出介质可能包含生理表面活性成分，如牛黄胆酸。这些溶出介质也可能含有乳化剂（卵磷脂）和增加渗透压的组分，比如生理盐水溶液。同时，缓冲液的离子强度或体积摩尔浓度是可以操作的。设计的溶出介质代表了胃和小肠的进食和空腹状态。这些溶出介质在速释制剂（IR）建立体内溶解行为建模方面是非常有用的，特别是这些速释制剂含有脂溶性的原料药，并可能有助于理解与消化液的生理构成相关的制剂的溶出动力学。溶解动力学的成功模型已经发表，主要用于速释制剂。在缓释剂型减少药物溶解行为的影响，使用的这些溶出介质的不同需要进行评估。体外性能测试并不一定需要空腹和餐后状态的媒体建模。对于肠溶制剂，酸中释放度是溶出度的一部分（（711）方法A或者方法B）。制药针对于药物标签中说明在酸中释放度不得过标示量的10%或者在酸液中降解而包有抗酸包衣的药物。根究具体情况进行解决，可能的解决方案包括：酸性介质中添加表面活性剂或者调整质量标准）在选择溶解介质时，应注意通过分析确保原料药在整个过程中的稳定性适当。在某些情况下，如抗坏血酸的抗氧化剂，可用于在溶出介质中，以保证药物的稳定性。有些时候这些是不够的。化合物快速降解形成稳定的降解物，单独监测降解物或与原料药联合监控可能比只分析原料药更适合。采用高效液相色谱分析（包括超高效液相色谱等液相色谱法）替代光谱分析相比对降解的影响较小。对于药典装置1（篮法）和装置2（桨法），溶出介质的体积可以从500到1000毫升不同。通常情况下，溶出介质的体积应当满足漏槽条件。在某些情况下，根据药物的浓度和漏槽条件，体积可以增加到2到4升之间，使用较大的溶出杯（这种方法的必须有充分的理由）。实际上，溶出介质的体积通常保持在上述法定范围内。或者，可能选用其他药典装置比较合适，如往复式气缸（装置3），往复架（装置7），或流通池（装置4）。某些装置可能需要较少体积的溶解介质（例如，100-200毫升），优选使用的桨法或蓝法。在这些情况下，非药典仪器装置（例如，体积小的设备）也可以选择使用。1.4选择溶出设备（桨法和篮法以及其他方法）装置的选择是根据对处方设计的认知和体外试验剂型的实际特点。一般来说，首选药典装置。对于固体口服制剂，装置2和装置1使用昀多。