白细胞分化抗原表达规律

一、粒系和单核系细胞抗原表达规律粒系和单核系细胞起源于共同的祖细胞，随着细胞的分化，出现髓系祖细胞及单核系祖细胞。但在这个阶段两系造血祖细胞的抗原表达是相同的，没有区别。进一步分化则出现一些抗原表达的不同。通过对正常造血细胞的研究将粒细胞发育分为5期，将单核细胞发育分为3期。(一)粒细胞抗原表达规律第I期:粒细胞表达CD34、HLA-DR、CD13、CD45、较高水平的CD33，此时不表达其他成熟标志。FSC中等大小,SSC较小。分选出这部分细胞为原粒细胞。第II期:CD34、HLA-DR表达下调，变为阴性。CD15出现高表达，CD33表达水平轻度减低。CD13、CD45荧光强度不变。SSC值增大。此部分细胞为早幼粒细胞第III期:主要变化为出现中等水平的CDllb,CD13表达减弱，CD33表达与II期相同,CD45阳性。此期细胞为中幼粒细胞。第Ⅳ期:CD13表达再次增强，并出现CD16的表达，CD33表达进一步减低。CDllb和CD15表达增强。此期细胞形态上为晚幼粒细胞。第V期:CDllb、CD13、CD45表达最强，CD15阳性，CD33弱阳性。此期细胞代表中性分叶核粒细胞。根据对CD64的检测，CD64在原粒细胞为阴性，在早幼粒细胞开始出现，荧光强度在102左右。在成熟期(V)期，强度减低到10左右。在原粒至早幼粒细胞阶段，CD117为阳性，在中幼粒阶段变为阴性。(二)单核细胞抗原表达规律第I期:原单核细胞，表达中等程度的CD45、CD34、CD33、CD13和HLA-DR。与原粒细胞不能区分。第II期:幼单核细胞，CDllb表达快速上调，CD13、CD33表达有所增加，CD45仍保持中等水平。HLA-DR表达减弱，但仍为阳性。第Ⅲ期:成熟单核细胞，CD14表达快速上调，CD45表达水平也增加。CD13、CD33、HLA-DR阳性。注意，成熟中性粒细胞与成熟单核细胞HLA-DR表达明显不同，前者为阴性，后者为阳性;CD14在成熟单核细胞为阳性，而粒细胞为阴性。而CD64、CD33表达强度也明显不同。(一)B淋巴细胞抗原表达规律分为4期。第I期:原始B淋巴细胞，表达CD34、HLA-DR、TdT,CDlO高表达，CD19、CD45、CD22表达较弱。第II期:CD19、CD45量增加,CDlO量减少。CD34、TdT变为阴性。CD20开始表达，CD22强度不变，仍较弱。胞质IgM阳性。第Ⅲ期:CD20、CD45的强度继续增加达到最大值。CDlO减少至阴性。此期CD5为阳性。可以表现为CD5与CDlO同时阳性。FMC7及表面IgM也在此期出现。第Ⅳ期:出现CD23、CD22的强度明显增加。CD5消失，CD19、CD45保持高水平表达，CD20强度轻度减低。(二)T淋巴细胞抗原表达规律T淋巴细胞在胸腺内分化发育，分为4期。第I期:CD7、CD10高水平表达，但CD3阴性。CDla量逐渐增加。只有1/3细胞表达CD34，并表达CD2、CD5。CD2表达水平在整个成熟过程中保持不变。第II期:抗原表达与第III期相似，但细胞体积较第III期大。在小鼠胸腺内，相当于皮质淋巴细胞。CDla、CD45表达量增加，出现CD4+/CD8+细胞，CD7强度减低。第III期:出现CD3表达，其他抗原同第II期，但细胞体积变小。第Ⅳ期:CD3、CD7表达强度达到最大，CDla变为阴性。CD4与CD8变为单阳细胞。CD2、CD5持续阳性。在T淋巴细胞、B淋巴细胞、髓细胞的发育过程中，CD3、CD22、CDl3抗原在胞质的出现早于胞膜。在发育的早期阶段，胞膜为阴性时，胞质可为阳性。CD79a是B淋巴细胞的特异性标志，只表达于胞质，不表达于胞膜。MPO为髓系最特异的标志，以往利用细胞组化检测该酶的活性(POX染色)，而免疫标记MPO，是检测该酶的蛋白成分，因此可以在MPO表现出酶的活性前，用抗体检测MPO的蛋白前体，故其灵敏度比组化染色高。胞质CD3、CD79a(CD22)、MPO是T淋巴细胞、B淋巴细胞、髓系特异性较高的标志，常用于鉴别不同系列的白血病细胞。白血病分类中免疫标记技术的应用与意义应用免疫标记技术对细胞的属性、分化阶段或变异进行鉴别，有助于白血病的诊断和分类。其特点是特异性强、灵敏性高，并可在原位直接进行定性和半定量的形态学观察，也可进行定量测定和分选，为疾病的诊断和发病机制的研究提供强有力的手段。[4]1．AMLMO：其特征为T、B细胞标记的阴性，主要是CD19、CD20、CD22与CD3、CD5、CD7。虽然现在CD10已不作为B细胞的特异性标记，但CD10也必须阴性。作为干、祖细胞标记的CD34、CD38和HLA-DR均为阳性，具有特征性的TdT标记应有至少30%的原始细胞会呈阳性表达。而髓系特征不能过多，通常是CD13、CD33、CD117中的任何一项呈阳性表达；CD68、MPO大多阴性。若髓系有两个以上标记呈阳性，应考虑未成熟的急性髓细胞白血病。流式上有低的SSC和FSC。在CD45－SSC图上出现在淋巴细胞位置上，至少表达一个特异性标志，如CD13或CD116，但MPO比CD13与CD33更灵敏。一般淋系标志阴性，但也可表达CD7或CD4，一般HLA－DR、CD34阳性。有些研究表明CD7与CD34共表达在AML，预后差。M1：骨髓中原始粒细胞（Ⅰ型+Ⅱ型）≥90%（NEC），并伴形态学异常。早幼粒细胞很少，中幼粒细胞以下阶段不见或罕见。流式上M1与M0相似不易区分，M1一般CD13＋、CD33＋、HLA-DR－，但CD34表达少于M0，可能表达部分CD15。M2：骨髓粒系明显增生，原始细胞明显增多，但可30%，以异常的中性中幼粒细胞增生为主，其胞核常有1-2个大核仁，核质发育显著不平衡。M3：骨髓中以颗粒增多的异常早幼粒细胞增生为主，早幼粒与原粒之比应在3：1以上。异常早幼粒细胞其胞核大小不一，胞质中有大小不等的颗粒，可见束状的Auer小体，也可逸出胞体之外。依颗粒粗细分为粗颗粒和细颗粒两个亚型。免疫标记具有髓系特征而HLA-DR阴性。流式上显示高颗粒性，具较高的SSC，多数情况HLA-DR（-）或表达减少，CD34少于M2，一般CD13弱（＋），可有CD2表达。M4与M5：两型表型相似，但M4较M5表达更多的CD34（＋），较之M0、M1，M4与M5有更大的FSS和SSC，CD45－SSC图上，成熟细胞出现在单核区，重要的表型为CD13、CD33、HLA－DR、CD14和CD15，CD33可表达强于CD13，CD33（＋）、CD13（－）、CD34（－）很可能为M5，但只出现在少数病人中，部分M5可见CD56（＋）。M6：较少见并且特征不明显，一般HLA－DR、CD34、CD13、CD33阳性，CD45－SSC图显示主要为红系成份。M7：少于1％，一般CD61（GpⅢa）和/或CD41（GpⅡb-Ⅲa）阳性，可以用流式双色分析在EDTA存在下测GpⅡb/Ⅲa与CD34，以减少激活血小板的粘附。2．ALLB祖细胞型ALL：一般TdT(+)、HLA-DR(+)、CD19(+)，此型又分为2个亚型，CD10＋和CD10－，前者预后好。多数病例CD24＋、CD34＋、CD20表达随成熟度增加而增加。前B细胞型ALL：一般为细胞CD19＋、CD24+、HLA－DR＋，胞浆CD22＋、CD10＋、TdT随CD20变化，CD34多为阴性，比B祖细胞型预后更差。B细胞型ALL：比B祖细胞型ALL有更大的FSC和SSC，在CD45－SSC图上出现在淋巴和单核细胞区域，表型为CD19、CD20、CD22、CD24，多数病例CD10＋。T细胞型ALL：多数病例有大的FSC、SSC，在CD45－SSC图上可能出现在淋系未成熟细胞和髓系未成熟细胞或单核细胞区。最常见亚型为皮质晚期表达，CD1、CD2、CD5、CD7、CD4/CD8双阳与极少膜表面CD3、TdT多为阳性，另一常见亚型为皮质早期表达，CD2、CD5、CD7、TdT强表达。3．CML由于慢性期显著的细胞分化，在CD45－SSC图上除了髓系细胞占主导外，只显示一个正常骨髓像，CML可确诊。流式细胞术对急变期的诊断具有极高价值，直接影响到治疗效果。急变期CML主要表现为髓系，偶为淋系。髓性急变可表现出多种形态包括未分化细胞，淋性急变具典型形态特征，为CD10＋。4．CLL免疫分型主要为：B系抗原CD19、CD20、CD43、CD79a与CD5共表达，CD23表达使得CLL区别于毛细胞淋巴癌MCL。CD10－、CD23－、CD11c和CD25、CD20常弱表达。B型前淋巴细胞白血病B－DLL较CLL更为严重，流式细胞术在区分B－DLL和CLL上发挥很大作用，B－DLL多为CD5－、CD22＋。[5]活着就是痛苦的根源，痛苦是什么？一种情绪而已！就像喜怒哀乐愁就像黄绿青蓝紫都只是生活中的色彩之一