目前禽病的流行状况与禽胚毒灭活疫苗的生产要点

目前禽病的流行状况与禽胚毒灭活疫苗的生产要点李永红目录一、养禽业在畜牧生产中的地位和贡献二、目前我国禽病的流行状况与特点三、禽胚毒灭活疫苗的生产工艺与质量控制要点一、养禽业在畜牧生产中的地位和贡献改革开放30年来我国畜牧业持续增长，世界瞩目，已成为世界畜产大国。1985年以来，我国禽蛋产量稳居世界首位，1992年开始我国禽肉产量一直位居世界第二。2006年我国禽蛋产量2950万吨，占世界禽蛋总产量43％左右，禽肉产量约1500万吨，占世界禽肉总产量18％左右。一、养禽业在畜牧生产中的地位和贡献据农业部统计，2007年我国肉、蛋、奶产量：肉类总产量8130万吨，同比去年1.0%禽蛋总产量3030万吨，比去年增长10.5%奶类总产量3056万吨，比去年增长2.9%一、养禽业在畜牧生产中的地位和贡献•2007年我国畜牧业产值达1.5万亿元，比去年增长10％左右，“十五”期间年均增长率超过10％，占农业总产值的比重达34％，比2000年的29.7%提高约5％，平均每年提高约1％。•与发达国家相比，我国畜牧业占农业总产值的比重还不高，仅占34％（建国初期11％～12％），一般发达国家畜牧业占农业总产值的比重在50％以上，欧洲和北美一些国家达到60％～70％，高的可达80％，表明畜牧业有较大的发展空间。一、养禽业在畜牧生产中的地位和贡献猪禽生产占我国畜牧业总产值85%，从肉类消耗结构来看，禽肉占20%。我国人均禽蛋和禽肉消费量在过去10年里分别增长51%和60%，禽蛋人均消费量已超过世界平均水平。可见，禽蛋、禽肉是老百姓重要的消费品，养禽业仍有良好的发展前景。二、目前我国禽病的流行状况与特点•家禽疫病的发生和流行制约养禽业的健康发展饲养方式有集约饲养也家庭散养、重大动物疫病复杂、畜产品质量安全水平低、疫病种类多而发病频繁、防控疫病水平较低、致使抵御动物疫病风险能力不强，畜禽的发病和死亡率居高不下。•据初步统计，每年我国因动物疫病造成的直接经济损失高达300多亿元。二、目前我国禽病的流行状况与特点•家禽传染病种类多而复杂，旧病未除，新病不断出现，死亡率高，防控难度度大。农业部1986~1990年全国普查表明，我国畜禽传染病202种、寄生虫病23种、普通病14种，共239种。20世纪80年代新发生传染病15种、寄生虫病2种，其中禽传染病有：鸡传染性鼻炎、禽白色念珠菌病、EDS-76、鸡病毒性关节炎、禽大肠杆菌病。20世纪90年代以来，又新出现传染病10种，其中家禽传染病有：禽流感、鸡传染性贫血、网状内皮细胞增生症、J亚型淋巴白血病、鹅副粘病毒感染等。二、目前我国禽病的流行状况与特点•据不完全统计，禽类约有80多种疾病，其中以传染性疾病最多，约占禽病总数的75%，又以病毒性传染病为主，造成的损失最大，每年因禽病死亡率高达20%左右。二、目前我国禽病的流行状况与特点•发病非典型化和病原出现新变化ND非典型化发生是一典型例证MDV和法氏囊病毒毒力增强，出现超强毒株如：Witter博士1996年报道60~70年代为标准化强毒vMDV70年代末~80年代毒力增强，称超强毒株vvMDV90年代出现更强的超强毒株，称特超强毒株vv+MDV二、目前我国禽病的流行状况与特点多病原共感染：继发感染、混合感染和出现复合症，使病情复杂化，诊断难度加大，发病和死亡率高。多重感染：病毒与病毒、细菌与细菌、病毒与细菌、病毒或细菌与寄生虫、病原性与非传染性疾病混合感染。常见病例：新城疫与禽流感，新城疫与大肠杆菌、沙门氏菌病、慢性呼吸道病等二、目前我国禽病的流行状况与特点•家禽呼吸道疾病突出，危害严重。禽呼吸道病已是养禽生产中危害最严重和最棘手的问题，疾病造成饲料转化率低、肉鸡增重慢、蛋鸡产蛋率不高、用药成本加大。二、目前我国禽病的流行状况与特点•免疫抑制性疫病危害严重主要有：传染性法氏囊病病毒（IBDV）、马立克病病毒（MDV）、鸡传染性贫血病病毒（CAV）、禽网状内皮细胞增生症病病毒（REV）、J亚型淋巴白血病（ALV-J）、呼肠孤病病毒（REOV）。主要损害免疫器官和免疫系统，造成体液免疫和细胞免疫抑制，以及对其他疫病易感性增高。二、目前我国禽病的流行状况与特点•细菌性疾病防治效果差，耐药菌株增多，危害加大。有报道，从田间分离的鸡毒支原体对链霉素耐药性提高了1000倍，对泰乐菌素耐药性提高100倍，红霉素无治疗效果。二、目前我国禽病的流行状况与特点针对禽病的流行特点，研发和生产禽用疫苗的趋势开发新毒株提高针对性多联又多价一针防多病纯化加浓缩延长免疫期二、目前我国禽病的流行状况与特点易邦三H战略：高科技（HighTeach）、高标准（HighStandard）、高效能（HighEfficiency）战略。二、目前我国禽病的流行状况与特点•易邦集团特供系列疫苗：重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-5株）重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（H5N1,Re-5株+Re-4株）禽流感（H5+H9）二价灭活疫苗（H5N1Re-5+H9N2Re-2株）禽流感灭活疫苗（H9亚型）鸡毒支原体灭活疫苗鸡新城疫灭活疫苗鸡新城疫、禽流感（H9亚型）二联灭活疫苗鸡新城疫、传染性法氏囊病二联灭活疫苗（ND-rVP2）鸡新城疫、病毒性关节炎二联灭活疫苗鸡新城疫、传染性支气管炎二联灭活疫苗鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征三联灭活疫苗鸡传染性法氏囊病基因工程亚单位疫苗（rVP2）二、目前我国禽病的流行状况与特点•普莱柯的禽用疫苗产品（1）鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征、禽流感H9亚型四联灭活疫苗(LaSota株+M41株+AV127株+HL株)（2）鸡新城疫病毒(LaSota株)、传染性支气管炎病毒(M41株)、禽流感病毒(H9亚型，HL株)三联灭活疫苗（3）鸡新城疫病毒(Lasota株)、传染性支气管炎病毒(M41株)、减蛋综合征病毒(AV127株)三联灭活疫苗（4）鸡新城疫病毒(Lasota株)、传染性支气管炎病毒(M41株)二联灭活疫苗（5）鸡新城疫、产蛋下降综合征二联灭活疫苗（6）鸡新城疫灭活疫苗（7）鸡产蛋下降综合征灭活疫苗三、禽胚毒灭活疫苗的生产要点生产流程轧盖贴签入库待检成品种蛋洗涤消毒前孵化接毒后孵化收毒纯化或浓缩检验合格后灌装加塞乳化灭活病毒液灭活活病毒液白油和乳化剂优检验合格出厂三、禽胚毒灭活疫苗的生产要点■种蛋的质量种蛋应是非免疫蛋，如用于生产禽流感H5亚型疫苗的种蛋，蛋黄的H5-HI抗体应是0log2；种蛋新鲜：产蛋时间不超过1周；种毒表面洁净、无畸形、无沙壳、大小均匀（55±5克）；种蛋存放：入孵前应在16~25℃存放保存。三、禽胚毒灭活疫苗的生产要点■种蛋入孵前的消毒：熏蒸消毒：福尔马林毫升数与高锰酸钾克数之比为2：1计算用量。喷雾消毒：复合醛、百毒杀掌握好消毒剂配制的浓度和消毒的时间三、禽胚毒灭活疫苗的生产要点■前孵化：孵化温度：夏天38℃、冬天38.3~38.5℃；孵化湿度：65~68%；翻蛋：翻一次/1.5h。三、禽胚毒灭活疫苗的生产要点■接毒：种毒的选育：从基础种毒到生产种毒批的建立有一个复壮、传代和筛选的过程。建立稳定、纯净、高效价的生产种毒批是生产高效价疫苗的根本。三、禽胚毒灭活疫苗的生产要点■接毒：确保不接错种毒，如禽流感Re-5株与Re-4株的种毒绝不能配错、接错。合适的种毒稀释倍数。配制种毒严格的无菌操作。接毒量、接毒时间、接毒准确率的控制。接毒过程的防污染。三、禽胚毒灭活疫苗的生产要点■后孵化：孵育时间：每种病毒都有其最佳的孵育时间。禽流感病毒H5N2（N28株）孵育96h重组禽流感病毒（Re-5株）和（Re-4株）孵育72h后孵化的温度：每种病毒都有其最适宜的孵育温度。猪流感病毒适宜35℃、重组禽流感病毒（Re-5株）和（Re-4株）适宜36℃禽流感病毒H5N2（N28株）、新城疫病毒适宜37℃三、禽胚毒灭活疫苗的生产要点■冻蛋：鸡胚气室向上直立冻蛋温度：2～8℃冻蛋时间：12小时（应根据要冻的蛋多少具体而定）三、禽胚毒灭活疫苗的生产要点■收获：效价要达到要求：胎儿腐败、胚液混浊及有任何污染可疑者，弃去不收。收获过程的防污染：收获时鸡胚的消毒、用具的消毒、操作人员的口罩佩戴、手消毒等务必要做到位。不同消毒液，不同浓度、不同作用时间消毒鸡胚的效果测试消毒液名称浓度作用时间肉汤培养72h的菌检结果惠福星1：5002~3min+++++3~4min+++++复合醛1：30002~3min+++++3~4min+++++百毒杀1：6002~3min+++++3~4min+++++碘酒3%2~3min+++++3~4min+++－+阳性对照+++//空白对照--///三、禽胚毒灭活疫苗的生产要点■收获：收获抗原的过程中减少污染对提高产品质量有重要意义减少细菌内毒素的产生细菌污染的抗原经灭活后虽然菌检结果或呈阴性，但细菌的内毒素仍然遗留在抗原液中，制成疫苗成品后注射动物可能会出现副作用，有些疫苗注射动物后肉芽增生严重。减少灭活剂的用量三、禽胚毒灭活疫苗的生产要点■抗原纯化与浓缩：连续高速离心超滤浓缩超滤膜中空纤维三、禽胚毒灭活疫苗的生产要点■灭活：灭活温度：37℃灭活时间：温度达到37℃开始计时，灭活24小时。灭活温差的控制：灭活时应避免温差过大（尽量控制在37±0.2℃），在确保病毒灭活完全的同时，减少灭活过程中对病毒免疫原性的破坏。三、禽胚毒灭活疫苗的生产要点■灭活：灭活剂的种类：甲醛、β-丙内酯等灭活剂浓度要适宜：•AIV-H5N4:0.1%的甲醛溶液37℃48h或0.2%的甲醛溶液37℃24h可使病毒完全灭活;•AIV-H7N3:0.05%的甲醛溶液37℃36h或0.1%的甲醛溶液37℃24h可使病毒完全灭活;•AIV-H5N1,Re-1、Re-5、Re-4，0.1%的甲醛溶液37℃24h均可使病毒完全灭活;•AIV-H5N1,Re-1、Re-5、Re-4,用1:5000终浓度的β-丙内酯在4℃作用24h可使病毒完全灭活。三、禽胚毒灭活疫苗的生产要点■灭活：灭活剂浓度切忌随意加大。按AIV-H5N1,Re-5单价苗和（Re-5+Re-4）二价苗的制苗规程要求：灭活时，甲醛溶液终浓度为0.2％。甲醛超标的危害之一：抗原免疫原性的破坏例如：一次禽流感病毒的灭活试验，本应加0.2%的甲醛溶液，结果操作失误加多了，最后实际测定甲醛用量为1.35%、1.36%，HA效价本应是10log2,结果为0log2。三、禽胚毒灭活疫苗的生产要点■灭活：甲醛超标的危害之二：制成疫苗成品的副反应明显加大。据报道：检测了6个疫苗生产企业的21批疫苗，甲醛超过国际规定的1.4至8倍，致使产蛋鸡体内雌二醇减量，由此影响卵子及子宫发育，产蛋率下降21～22.5%。免疫8倍甲醛含量超标的疫苗的鸡可见鸡冠萎缩、苍白。剖检可见：卵泡数量少、卵子及子宫腔体积萎缩等。三、禽胚毒灭活疫苗的生产要点■乳化：选择优质的油佐剂2005年底开始选用进口白油Marcol52生产禽流感灭活疫苗，使我们的疫苗质量开始稳步提高。不断优化乳化配方2008年，通过进一步优化乳化配方，使我们的重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1，Re-1株）效力检验结果名列第一，重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1，Re-5株）全国效力会检结果排名第一。三、禽胚毒灭活疫苗的生产要点■乳化：乳化配比要精准抗原、乳化剂和白油的用量和配比一定计算准确并经复核无误才可进行生产。尤其是禽流感二价苗，Re-5株和Re-4株的抗原要配比准确，才能保证两者都达到合格的水平。乳化操作要规范目前的乳化操作规程是适合我们目前的乳化设备的，保证每一次乳化都操作到位，才能发挥我们设备的特长，确保质量的稳定。不同油苗的比较永顺公司进口佐剂油苗、国产佐剂油苗及进口油苗理化特性的比较油苗项目永顺公司Marcol52进口佐剂油苗国产佐剂油苗进口油苗25℃粘稠度(0.4ml／1ml)3.0～3.5秒，稀薄，易注射6～8秒，粘稠，注射困难3.5～4.0秒，稀