第八章中药及其制剂分析

1第八章中药及其制剂分析第一节概述（一）中药及其制剂定义1．中药：以中医药学理论体系的术语表述其性能、功效和使用规律，并且只有当按中医药学理论（包括中药的四气[寒，热，温，凉]五味[辛，甘，酸，苦，咸]，升降浮沉[药物进入人体后，分别产生上升，下降，发散和泻利的作用趋向]，补泻归经[药物对人体不同部位疾病的选择性治疗作用]及其配伍[按病情的需要和药物性能，选择两种以上的药物配合使用]禁忌等方面）指导其临床应用的传统药物，才可称之谓中药；或传统使用的植物，动物，矿物药及其成药（制剂）。2．中药制剂（中成药）：用中药为原料，按中医药学理论谴药、配伍和组方，以一定制备工艺和方法制成一定剂型的药物制剂。（西药：有机化学药品，无机化学药品和生物制品）（二）中药制剂分析的任务、目的—全面保证中药制剂质量稳定、疗效可靠和使用安全。（1）运用现代分析手段和方法（物理学、化学、生物学和微生物学等），对中药制剂的各个环节（原料、半成品及成品）进行质量分析。（2）用现代科技手段，寻找测定复方制剂中的有效物质，研究符合中药分析要求的定性、定量用对照品，采用更加灵敏、准确、专属和快速的分析仪器和方法，制定科学、规范的原料药材及中药制剂的质量标准。(三)、中药制剂分析的特点有效←→无效1、中药制剂化学成分的多样性与复杂性（1）、同一成分在不同药材中的药理作用不同；鞣质地榆（止血）（2）、各种有效成分在中药中含量相差悬殊。其他（无药效）五倍子：鞣质（＞70%），长春花：长春新碱（百万分之一）。2、中药制剂原料药材质量的差别（1）中药市场混乱（同物异名，同名异物）；贯众：30多种，鳞毛蕨科、蹄盖蕨科、紫萁科、乌毛蕨科等。（2）中药材质量的不稳定性；生长环境、采收季节及部位差异（GAP:中药材生产质量管理规范)。3、以中医药理论为指导原则，评价中药制剂质量按照中医理论的组方原则（君、臣、佐、使-主治者，君也。辅治者，臣也。与君相反而相助者，佐也。引经及治病之药至于病所者，使也），选取起主要治疗作用的药物建立含量测定项目。同时也应考虑对贵重药、毒性药的质量控制。4、中药制剂工艺及辅料的特殊性（1）制剂工艺不同，有效成分的量也不同（2）剂型繁多，辅料干扰大丸、散、片、锭、合、酒、酊、膏、露、茶、栓、颗粒、糖浆等5、中药制剂杂质来源的多途径性杂质来源包括：药材中非药用部位、泥砂、重金属、残留农药及霉变、虫蛀、走油等产生的杂质。6、中药制剂有效成分的非单一性成分复杂，而且大多数中药的有效成分尚不十分清楚。中药药效的发挥是多种成分协同作用的结果，因此应从整体上来控制中药的质量。（四）中药及其制剂的分类与质量分析要点1．分类中药材及其炮制品（中药材经过炮制[修制、水制、火制、水火共制等]加工后的成品成为中药炮制品，中药炮制的目的在于降低毒性，缓和或改变药性，洁净药物，提高疗效）液体制剂：合剂与口服液、酒剂和酊剂、注射剂;半固体制剂：煎膏剂、浸膏剂和流浸膏剂;固体制剂：丸剂、散剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂.2．质量分析要点注射剂：为了确保中药注射剂的质量稳定、可控，中药注射剂在固体中药材品种、产地和采收期的前提下，需制订中药材、有效部位或中间体、注射剂的指纹图谱。中药指纹图谱：色谱指纹图谱（HPLC、GC、TLC）、光谱指纹图谱、脱氧核糖核酸指纹图谱。2中药指纹图谱；表达植物药物代谢产物化学特征的指纹图谱，是被国际认可的中药生产质量的一种新型标准，能全面反映中药品所含化学成份的种类与数量，进而反映中药材及产品的质量。第二节中药及其制剂的提取、分离与纯化方法☆中药浸提、分离与精制的目的：尽量提出有效成分或有效部位，最低限度的浸出无效甚至有害的物质；减少服用量；增加制剂的稳定性；提高疗效。（一）提取方法1．萃取法：将溶剂加入固相或另一液相混合物中，其中所含的一种或几种组分溶出从而使混合物得到完全或部分分离的过程。2．冷浸法:药材用适当溶剂在常温、温热条件下浸泡，浸渍出有效成分。适用于提取遇热易被破坏的物质及含淀粉、树胶、果胶、黏液质的样品，从含淀粉较多的苦豆子种子中提取生物碱，就是在冷的稀盐酸水浸出生物碱。3．回流提取法：样品置有机溶剂中加热回流的提取方法。4．连续回流提取法：使用索氏提取器连续进行提取，提取效率高。5．水蒸气蒸馏法：适用于挥发性组分的提取。组分对热应稳定。6．超声提取法：超声波具有助溶作用，提取较冷浸法速度快，一般仅需数十分钟浸出即可达到平衡。由于超声提取过程中溶剂可能会有一定的损失，所以用作含量测定时，应于超声振荡前先称定重量，提取完毕后，放冷至室温，再称重，并补足减失的重量，滤过后，取续滤液备用。用于药材粉末的提取时，由于组分是由细胞内逐步扩散出来，速度较慢，加溶剂后宜先放置一段时间，再超声振荡提取7．超临界流体萃取法1）超临界流体：是指当压力和温度物质的临界点时，所形成的单一相态。2）超临界流体特点：①具有与液体相似的密度：具有与液体相似的较强的溶解能力；②溶质在其中扩散系数与气体相似：具有传质快，提取时间短的优点，提取完全一般仅需数十分钟；③表面张力为零：很容易渗透到样品的里面，带走测定组分；④选择性强：通过改变萃取的条件，如温度、压力等，可以选择性的萃取某些组分；⑤在通常状态下即成为气体：萃取后溶剂立即变为气体而逸出，容易达到浓集的目的。影响因素：压力、温度、改性剂、提取时间。温度：恒压下温度升高，可提高萃取效率；压力：恒温下提高压力，有利于极性组分和高分子量组分的提取；压力降低，有利于非极性组分的提取；改性剂：甲醇、氯仿。（二）纯化（精制）萃取的方法不仅用于测定组分的提取，也可用于纯化。例如二次萃取和柱色谱法。精制方法：水提醇沉法，醇提水沉法，超滤法，盐析法，酸碱法，澄清剂法，透析法，萃取法，大孔树脂吸附法等。如：水提醇沉法：含义：先以水为溶剂提取药材有效成分，再用不同浓度乙醇沉淀除去提取液中杂质的方法。原理：利用中药中的大多数成分易溶于水和醇的特性，用水提出，并将提取液浓缩，加入适当的乙醇或水反复数次沉降，除去其不溶解的物质，最后制得澄明的液体。第三节中药及其制剂分析的一般程序中药及其制剂分析的一般程序包括：取样、检验依据和分析方法准备、样品的真伪鉴别试验、样品的杂质检查、样品中主药的含量测定和检验记录等。（一）取样取样原则：供试品要具有一定的代表性;必须严格按照规定的取样方法进行取样。取样有科学性、真实性和代表性，符合均匀、合理的原则。中药材取样法:从同批药材包件中抽取样品，混合均匀后采用“四分法”得到检验样品。中药制剂取样法:各类中药制剂取3样量至少够3次检测的用量，贵重药酌情取样。（二）鉴别试验1．鉴别试验的重要性：中药及其制剂的鉴别可以通过确认其中所含药味的存在或某些特征成分的检出而达到鉴别的目的。目前部分中药尚无含量测定项目，因此，鉴别就成为中药制剂质量控制的一个非常重要的环节。2．鉴别方法性状鉴别:，显微鉴别：显微化学反应鉴别法，理化法鉴别：微量升华法，荧光与光谱鉴别法，颜色反应及沉淀反应鉴别法，色谱鉴别：纸色谱法、毛细管分析法、TLC、GC、HPLC1）显微鉴别(光学显微镜或电子显微镜鉴别)：该法通常在下列情况中应用：药材及炮制品的外形鉴别特征不明显或外形相似难于鉴别而组织构造不同时；药材破碎或呈粉末不易用肉眼辨认或区分时；含原药材粉末的中药制剂；处方中主要药味及化学成分不清楚或尚无化学鉴别法。注：处方中多味药物共同具有的显微特征不能作为鉴别特征。多来源药材应选择其共有的显微特征。显微化学反应鉴别法：一般可取药材切片或粉末，中成药取粉末，置载玻片上，滴加各种试剂，加盖玻片，在显微镜下观察产生的结晶、沉淀物，以及特殊的颜色变化，作为鉴别特征。该法可以确定基础品种中特殊化学成分的存在及在组织中的分布。2）TLC法薄层板：最多的是硅胶G板，也可另加0.2%～0.5%的CMC作为黏合剂，可用软铝笔在板上做标记；能经受一般的化学试剂处理，如用含浓硫酸的显色剂处理后，可将酸在水中洗去，然后烘干保存。一般通用的展开剂：无水乙醇-苯（1：4）；苯-氯仿（1：3）；丙酮-甲醇（1：1）显色方法：紫外灯下观察荧光斑点;选用显色剂.阴、阳对照法阳性对照:将要鉴别的药材按制剂工艺处理，再按鉴别方法提取的溶液。阴性对照:把制剂中要鉴别的药材除去，用剩下的各味药按制剂工艺处理，再按鉴别方法提取的溶液。3）化学鉴别：抗干扰能力差4）中药鉴别新技术－中药指纹图谱1、定义：中药材或中药制剂经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标定该中药材或中药制剂特性的共有峰的图谱。2、色谱指纹图谱的基本属性：整体性将指纹图谱作为一个整体来分析和比较它的综合特征以达到鉴别的目的；模糊性强调分析、比较指纹图谱的相似性，而不是完全相同；是一种综合的、量化的色谱鉴别手段。指纹图谱研究过程中的注意事项：1、在药效学指导下进行研究，保证指纹图谱反映的化学成分包括中药材中有效部位所含的绝大部分成分或有效成分的全部。2、样品的预处理过程及测定方法应简便、经济、易行，且专属性、准确度与重现性好。三）杂质检查：杂质检查项目：水分、灰分、酸不溶性灰分、砷盐、重金属、农药残留量、浸出物、挥发油、总氮测定等。杂质来源及检查意义：水分——结块、霉变或有效成分水解；灰分——控制药物本身及泥土、沙石等无机杂质；重金属——环境污染和使用农药引入；砷盐——剧毒，常由除草剂、杀虫剂或化肥引入；残留农药——有毒1．水分检查法中国药典（2000年版一部）附录收载以下四种方法：烘干法、甲苯法69.3℃、减压干燥法、GC法。2．总灰分和酸不溶性灰分总灰分：是指药材或制剂经加热炽灼灰化遗留的无机物，包括药物本身所含无机盐（称为生理灰分）、泥土、砂石等药材外表黏附的无机杂质。4酸不溶性灰分：主要是外来杂质，如泥土、砂石.3．砷盐与重金属检查(P50-55）与化学合成药物不同的是，检查前必须对样品进行有机破坏，破坏方法有干法和湿法两种。重金属检查方法：二硫腙比色法、原子吸收分光光度法砷盐检查方法：古蔡法、Ag-DDC法、原子吸收分光光度法4.农药残留量农药的来源：常用的农药：有机氯类：艾氏剂、氯丹、六六六等有机磷类：三硫磷、氯硫磷、蝇毒磷等检查原则：农药不明的样品测定总氯量、总磷量，已知农药的样品可采用GC法测定某个农药的量。测定有机氯时，使用电子捕获检测器（ECD）；测定有机磷时，使用火焰光度检测器（FPD）。（四）含量测定含量测定方法主要有：化学分析法、分光光度法、薄层扫描法和HPLC法。1．薄层扫描法：测定薄层板上斑点对单色光的吸收或反射的强度而进行定量的方法.1）对色谱条件的要求：选择性好，组分能完全分离，斑点对称、均匀、不拖尾。2)测量方法：多使用反射法。3）扫描方式：单波长:；双波长:测定波长选在被测组分的最大吸收波长，参比波长选在组分无吸收的位置上，若背景有均匀污染时，可选择背景光谱中与测定波长的等吸收处。4）散射参数SX：由于薄层板对光的散射，其吸收度和浓度之间的关系不服从比尔定律，二者不呈直线，但符合K-M方程，可以进行校正，使其成为直线。薄层扫描仪均装有线性化器，测定时需输入SX值，因为吸收度-浓度曲线的形状与SX值有关。Kubelka-Munk方程:其反射率（i,j）和固相层厚度（X）、单位厚度的光吸收系数（K）及固相反应层的散射系数（S）有关，当X与S固定时，反射率仅与K相关，K大小同待测物浓度成正比，通过测定反射率大小，推算得到待测物浓度。5）定量方法：外标法若曲线经过原点，可用一点法校正；若曲线不经过原点，用二点法校正；必要时，可采用多点法校正。内标法将内标加入供试液中，以组分与内标峰面积比值作为定量依据。特点:A、分离效果好B、适用于无法用UV、HPLC法测定的组分C、准确度、精密度低于HPLC2.化学分析法：重量分析法容量分析法特点A、准确度、精密度高B、抗干扰能力差（五）检验记录1．要求：原始资料真实、详细、整洁。2．内容：送检单位、送检日期、检品名称与规格、批号、检验项目、检验方法、检验者、审核者及检验日期。对用显微镜或电镜检验所得的图象，应真实描绘，注明放大倍数或附相片及说