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武汉大学2001年攻读硕士学位研究生入学考试试题科目名称:分子生物学科目代码:477一、解释概念(20分,每个4分)1卫星DNA2复制体(复制体是指参与DNA复制的蛋白质复合物,其中至少含有DNA聚合酶及引发体(primosome,引发酶与其他分子的复合物),SSB,解旋体等,复制体位于每个复制叉处进行细菌染色体DNA复制的聚合反应)3逆转座子(在基因组内存在着通过DNA转录为RNA后,再经逆转录成为cDNA并插入到基因组的新位点上的因子,被称为逆转座子)4反式激活因子5衰减子与衰减作用二、填空(30分,每空1分,请将答案写在答卷上)1.从病毒到高等生物的研究表明,遗传物质是。2.冈崎片段的发现证实了双链DNA的复制,在复制过程中,一条新生链的合成是的,称为链;而另一条链的合成是的,称为链。3.大肠菌中有三种DNA聚合酶,其中的polI的作用是,而polIII的作用是。polI和polIII都有的三种活性是。4.由于真核细胞染色体DNA的复制要有一段RNA为引物,因此线状的DNA复制后必须存在着5’端缩短的问题。已发现有一种端粒蛋白称为,它由构成,可以使单链DNA的5’延长。5.对DNA损伤有几种修复系统,其中只有修复系统可以造成DNA变异,与这一系统有关的一套基因平时受到一称为的抑制蛋白所抑制,它发挥抑制作用是结合在一段约20bp长的称为的DNA序列上,当DNA损伤时,另一种蛋白质称为把这种抑制蛋白水解后,修复系统的基因才会被激活。6.真核细胞中有三种依赖于DNA的RNA聚合酶分别合成不同的RNA,RNApolI负责合成,RNApolII负责合成,RNApolIII负责合成。7.大分子互相作用是分子生物学的重要内容,包括蛋白质之间、蛋白质与DNA或RNA之间的互相作用,蛋白质有四种重要的结构花式与大分子互相作用有关,这些结构花式是,,,。8.NO是气体小分子信号,它可由脱氨产生,它的作用方式是直接与酶作用使产生cGMP(环式GMP)。9.真核mRNA的5’端通常有帽子结构,3’端有polyA。在polyA上游有一保守序列称为polyA信号,其序列为。polyA能提高mRNA的翻译水平是由于:(1)(2)。10.G-蛋白关联受体是一类重要的细胞表面受体,它的结构特色是,它发挥信号传递作用的两条途径是途径和途径。三、问答题(50分)1.说出双链DNA复制起始有关的五种重要的酶或蛋白并简述它们的功能。(15分)2.简述增强子的特点和性质及作用机制。(10分)3.简述真核RNA聚合酶II的转录起始复合物装配过程和转录起始(15分)4.DNA限制性内切酶EcoRI是人们熟悉的常用内切酶,它是在大肠杆菌(E.coli)R株中发现的,它被广泛用于分子克隆操作和DNA分析。pUC质粒是常用克隆载体之一,它的多克隆位点上有EcoRI、BamHI、KpnI、HindIII等酶切点。假如要你把一段由EcoRI切割产生的外源DN**段克隆到pUC质粒中,并把重组质粒转化大肠杆菌R株来扩增,已知条件是所用的R菌株中只有EcoRI一种限制性内切酶,你设计如何做才能确保成功?为什么?(10分)武汉大学2002年攻读硕士学位研究生入学考试试题科目名称:分子生物学科目代码:935一、填空每空1分,共40分)1.测定蛋白分子量的主要方法是。而要较准确测定DNA分子量的方法是根据DNA分子量的大小而采取不同的方法,分子量5×106时用,分子量=5-100×106时用,分子量大于100×106时用。2.长度为20um的DNA分子,其长与宽的比是,该DNA分子含有碱基对。3.细菌中,体内DNA重组需要RecA、RecB参加,RecA起作用,RecB起作用。4.许多蛋白质能解开DNA双螺旋,32-prote重要性质和,所以能使DNA变性。5.Meselson-Stahl实验中用的E.coli长时间在15N中培养后转入14N中。转入14N培养基中之后,1/2,1,世代时。总DNA中15N15N,15N14N,14N14N的比例如下:(本题共两分)世代15N15N15N14N14N14N1/216.原核生物转录水平的调控方式主要有①②③和④7.一个plasmid载体含有一个大肠杆菌Lac操纵子的promotor-operator和外源基因,则这个基因的表达可以这样来控制,向培养基加入则转录开始,要使转录停止,可以加入。8.紫外线诱导的胸腺嘧啶二聚体的修复可以通过四种途径进行,它们是、、、和。其中和是对模板进行修复,而修复引起突变。9.在基因表达调控中,常常涉及顺式调控因子和反式调控因子,顺式调控因子是指,反式调控因子是指。10.蛋白负责特定基因的开关。在数百种来源于原核和真核的DNA-结合蛋白中发现以下几种结构花式(motif)。它们是,,和。它们通常以和,深入到DNA双螺旋的大沟中与DNA相互作用。11.逆转病毒即使本身并没有病毒癌基因,也可以致癌,当病毒cDNA整合于时病毒cDNA中能激活细胞的原癌基因的表达。12.P53一种重要的抑癌蛋白,它的两个主要功能是(1)(2)。P53的两个等位基因中只要其中一个变异就可能使癌发生,这是因为P53蛋白是的形式存在和行使功能的。13.细胞快速适应高浓度胞外信号的途径是。二、选择:(每题2分,共20分)1.关于遗传密码的论述,哪些是正确的A、在通用密码中,AUG是唯一的兼职密码生B、生物体可通过选择使用不同的同义密码来调节翻译的速度,从而进行翻译水平上的调控。C、无论病毒、细菌、动物、植物、细胞器,都共用一套遗传密码。D、在体外无细胞合成系统中合成多肽,起始密码子不存在时也能合成多肽。2.关于遗传密码的论述,哪些是正确的A、在通用密码中,AUG是唯一的兼职密码生B、生物体可通过选择使用不同的同义密码来调节翻译的速度,从而进行翻译水平上的调控。C、无论病毒、细菌、动物、植物、细胞器,都共用一套遗传密码。D、在体外无细胞合成系统中合成多肽,起始密码子不存在时也能合成多肽。3.DNApolymerasel的哪个活性是使DNA复制保持忠实性的关链因素A、聚合活性B、5’-3’外切活性C、3’-5’外切活性D、逆转录酶活性4.一个λphage感染它的溶源菌时,下列情况将发生A、进入正常的噬菌体循环产生50个左右的噬菌体粒子B、λ-DNA可以环化但不复制C、细菌细胞将被杀死D、原噬菌体将被割离E、λ-DNA将不能注入5.下面的部分二倍体中,哪些表型是组成型地合成β-半乳糖苷酶AI+o+z+y+Bi+o+z+y-Ci+ocz+y+Di+ocz-y+Ei-ocz-y+I+o+z+y+I-o+z+y+I+ocz+y+I+o+z+y+i-o+z+y+6.关于真核基因表达调控特点的论述哪些是正确的A、真核基因组基因数目多、大多数含内含子、且与组蛋白及非组蛋白结合形成核小体及其超螺旋等结构影响基因活性B、转录在核内、翻译在细胞质中进行,绝大多数mRNA的形成要通过RNA是否被运输来控制基因表达C、真核mRNA寿命长,为翻译水平的调控提供了较大的余地D、真核基因表达调控可在DNA水平的调控(拷贝数、重排)、转录水平、转录后水平(RNA加工和运输)和翻译水平等多层次调控E、原核基因表达调控活动范围比真核更大7.人们为研究某一目的基因的结构,打算用基因工程的办法得此基因,请你在正面载体中选一最合适的载体A、表达载体B、分泌性载体C、克隆载体D、转移载体E、穿梭载体8.当培养基中不存在糖时,正面哪一种是galoperon上结合的蛋白质情况A、结合有CAP-cAMP和RNA聚合酶两种蛋白质B、不结合蛋白质C、结合有阻遇蛋白和CAP-cAMP蛋白9.正面关于真核生物启动子的叙述,哪些是正确的?A、真核生物有三种RNA聚合酶,它们利用同一种启动子B、DNApolymeraseII利用的启动子只有一种类型C、RNApolymeraseI利用的启动子分两部分:40~-+5和-165~-4010.人们打算克隆并鉴定一个分子量为36-45kb的真核单拷贝基因,首先必须使用下边哪套系统,然后再进行鉴定。A、用cosmid为载体建立基因文库B、用pBR322为载体建立基因文库C、用M13为载体建立基因文库D、用λCharon4A为载体建立基因文库11.与细菌中发现的转录调控相比,真核细胞中的转录调控有以下区别,其中哪一项是错误的?A、真核RNApolymerase单独不能起作用B、真核基因在转录前,需多种转录因子(generaltranscriptionfactors)先在启动了上装配成复合物C、起始复合物装配过程包括许多步骤,每个步骤都受到调控信号或调控因子的影响D、在真核中大多数基因调控蛋白不能在离开它们所影响的基因相当远的地方起作用三、问答:1、简述(或绘图说明)真核细胞RNA聚合酶II转录的起始需要哪些基本转录因子及其装配过程(15分)2、简述(或绘图说明)色氨酸操纵子弱化的机制(15分)3、在讨论基因家庭时经常提到胚胎、胎儿和成体形成的蛋白质,这些述语是指什么现象?可用什么术语来描述这一类基因家族(5分)4、你正在进行Southernblot分析,并刚刚完成凝胶电泳部分,下一步是将胶浸泡在NaOH溶液中使DNA变性为单链,为了节约时间,你跳过这一步,直接把DNA从胶上转到硝酸纤维素膜上,你将标记好的探针与膜杂交,却发现放射自显影结果是一片空白,哪里错了呢?(5分)武汉大学2003年攻读硕士学位研究生入学考试试题科目名称:分子生物学科目代码:717注意:所有的答题内容必须答在答题纸上,凡答在试题上的一律无效一、下列名词翻译成中文,并简要解释(共10小题,每题4分,共40分)1.Domainsandmotifs(结构域?结构域是生物大分子中具有特异结构和独立功能的区域,特别指蛋白质中这样的区域)2.Alternativesplicing(选择性剪接)3.Reportergenes()4.ThePCRcycle5.Restrictionmapping(限制性酶切作图)6.Multiplecloningsites(多克隆位点是包含多个(最多20个)限制性酶切位点(restrictionsite)的一段很短的DNA序列)7.DNAlibraries8.Proteomics(蛋白质组,蛋白组学)9.Replicon(复制子)10.Semi-conservativereplication(半保留复制)二、简答题(共5题,每题8分,共40分)1,请列举三种以上蛋白质纯化技术,并说明不同纯化技术的简单原理。2,简述DNA损伤与DNA突变之间的区别与相互关系。3,简述密码的简并性(degeneracy)和同义密码子(synonymouscodon)及其在生物学上的重要性。密码子简并性具有重要的生物学意义,它可以减少有害突变。若每种氨基酸只有一个密码子,61个密码子中只有20个是有意义的,各对应于一种氨基酸。剩下41个密码子都无氨基酸所对应,将导致肽链合成终止。由基因突变而引起肽链合成终止的概率也会大大增加。简并性使得那些即使密码子中碱基被改变,仍然能编码出原氨基酸。密码的简并也使DNA分子上碱基组成有较大余地的变动,例如细菌DNA中G+C含量变动很大,但不同G+C含量的细菌却可以编码出相同的多肽链。所以遗传密码的简并性在物种的稳定上起着重要的作用4,简述原核生物转录起始与转录终止过程中所涉及的主要蛋白质和核酸结构及其具体作用。5,简述cDNA文库的构建过程。三、论述题(共5题,1-4题每题15分,第5题10分,共70分)1.人类基因组计划完成的社会意义和科学意义是什么?HGP的研究内容HGP的主要任务是人类的DNA测序,包括下图所示的四张谱图,遗传,基因,序列,物理图谱HGP对人类的重要意义1、HGP对人类疾病基因研究的贡献2、HGP对医学的贡献3、HGP对生物技术的贡献4、HGP对制药工业的贡献5、HGP对社会经济的重要影响6、HGP对生物进化研究的影响2.什么是操纵子(operon)?试说明色氨酸操纵子(Trpoperon)在原核基因表达调控中的调控机制和重要作用
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