比较几种免疫检测的异同

免疫学课后作业比较几种免疫标记技术的异同。答：根据标记物种类的不同，免疫标记技术可以分为放射免疫分析、酶标记免疫分析、荧光标记免疫分析、化学发光标记免疫分析、胶体金标记免疫分析技术，它们之间具有相同点，也有不同之处，现将其归纳如下。一、相同点主要包括以下几个方面：1、均具有高特异性。五种免疫标记技术的免疫技术都是采用抗原抗体反应，而抗原与抗体的结合是一一对应、特异性结合的，故它们都具有非常高的特异性。2、均具有高灵敏性。由于五种免疫标记技术的标记技术均采用示踪物标记，例如酶、放色性核素、荧光素、胶体金以及致密物质等，当与标本中的相应抗体或抗原反应后，可以不必测定抗原抗体复合物本身，只需测定复合物中的标记物，通过化学或物理的手段使不见的反应放大，转化为可见的、可测知的光、色、电、脉冲等信号，并可借助仪器精密测定，从而间接测出微量的抗原或抗体。3、检测对象相同。除了放射免疫技术只能检测抗原外，其他四种免疫标记技术均可检测抗原或者抗体，即通过已知抗原(或抗体)特异性结合待测抗体（或抗原），从而定性或定量地测出抗体或抗原。4、免疫标记的程序基本相同。其包括纯化抗原或抗体、确定标记物质（即决定了最终的检测方式）、进行标记、对标记产物分离纯化和分析鉴定等一系列程序。二、不同点主要包括以下几个方面：1、检测原理不一样。首先，酶免疫技术是以酶标记的抗体（或抗原）作为主要试剂，将抗原-抗体反应的特异性和酶催化底物反应高效性和专一性结合起来的一种免疫方法，其对作为标记用的酶具有特定的要求，如活性高、纯度高等；放射免疫标记技术是以放射性同位素作为示踪物的标记免疫测定方法；免疫荧光技术是以荧光素作为标记物与已知的抗体或抗原结合，然后将荧光素标记的抗体作为标准试剂，用于检测和坚定未知的抗原，其对用于标记的荧光素也有特定的要求，如荧光效率高，与蛋白质结合稳定，易于保存等；发光免疫分析技术是将发光分析与免疫反应相结合而建立的一种新型超微量分析技术，它是使用发光剂标记抗体（或抗原），通过发光检测抗原（或抗体）反应的免疫分析方法；免疫胶体金标记技术则是以胶体金作为示踪标记物，而胶体金在碱性环境中带负电荷，与抗体蛋白质分子的正电荷基团因静电而形成牢固结合应用于抗原抗体反应的一种新型免疫检测方法。2、所采用的标记物不同。由于彼此间免疫标记的原理不一样，故采用的标记物必然存在差异性。荧光免疫技术的标记物为荧光素，一般采用四乙基罗丹明、异硫氨酸荧光素及藻红蛋白等；酶免疫技术的标记物为酶，一般采用辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶（AP）；放射免疫技术的采用放射性核素标记，一般有131I、125I、14C和3H；发光免疫技术采用化学发光物质来进行标记，常用的化学发光剂有鲁米诺、异鲁米诺以及鲁米诺的衍生物；免疫胶体金技术的标记物为胶体金，，是由金盐被还原成原金后形成的金颗粒悬液，胶体金颗粒大小多在1—100nm。3、检测所需仪器或方法不同。酶免疫技术通过加酶的底物显色，然后通过酶标检测仪比色来进行检测；放射免疫技术是采用液体闪烁计数仪、晶体闪烁计数仪或X胶片来进行免疫检测；免疫荧光技术则是采用荧光比色计或荧光显微镜来进行分析；发光免疫技术所需仪器为发光分析仪；免疫胶体金技术是通过免疫电竞或斑点免疫金染色法进行检。