植物生理学实验-实验一植物组织渗透势的测定(质壁分离法)

实验一植物组织渗透势的测定(质壁分离法)[实验目的]：观察植物组织在不同浓度溶液中细胞质壁分离的产生过程及其用于测定植物组织渗透势的方法。[实验原理]：当植物组织细胞内的汁液与其周围某种溶液处于渗透平衡状态，植物细胞内的压力势为零时，细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势，这种渗透势相等的溶液称为等渗溶液。该溶液的浓度称为等渗浓度。当用一系列梯度浓度溶液观察细胞质壁分离时，细胞的等渗浓度将界于刚刚引起初始质壁分离的浓度和尚不能引起质壁分离的浓度之间的溶液浓度。代入公式即可计算出其渗透势。[器材与试剂]：实验仪器：显微镜，载玻片及盖玻片，镊子，刀片；实验试剂：100ml浓度为1mol/L蔗糖溶液：用蒸馏水配成0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50mol/L的蔗糖溶液各50mL；实验材料：洋葱鳞茎[实验步骤]：1.取带有色素的洋葱鳞茎，迅速投入各种浓度的蔗糖溶液中，使其完全浸入，约5—10min。2.从0.50mol/L开始依次取出表皮薄片放在滴有同样溶液的载玻片上，盖上盖玻片，于低倍显微镜下观察，并记录质壁分离的相对程度。3.在实验中确定一个引起半数以上细胞原生质刚刚从细胞壁的角隅上分离的浓度，和不引起质壁分离的最高浓度。4.在找到上述浓度极限时，用新的溶液和新鲜的叶片重复进行几次，直到有把握确定为止。在此条件下，细胞的渗透势与两个极限溶液浓度之平均值的渗透势相等。将结果记录于表中。测出引起质壁分离刚开始的蔗糖溶液最低浓度和不能引起质壁分离的最高浓度平均值之后，可按下列各式计算在常压下该组织细胞质液的渗透势。-Φs=RTiC1式中：-Φs为细胞渗透势；R为气体常数=0.083×105L·Pa/mol·K；T为热力学温度，单位K；i为解离常数，蔗糖为1；C1为等渗溶液的质量摩尔浓度，单位是mol/kg；则-Φs==0.083×105×(273+t)×1×C由于实验用的蔗糖溶液浓度单位为mol/L，因此需要按下式对其浓度进行修正。质量摩尔浓度(mol/kg)=2210001000CMCB式中：C2为溶质分子的物质的量浓度(原称摩尔数)，即等渗的蔗糖浓度，单位是mol/L;ρ为蔗糖溶液的密度。单位是g/ml；MB为蔗糖的摩尔质量，即342.3g/mol。[注意事项]：撕下的表皮组织必须完全浸没于溶液中。[实验作业]：复习细胞渗透作用的原理。