牛乳中酪蛋白的制备

实验七牛乳中酪蛋白的制备目的要求学习从牛乳中分离纯化酪蛋白的原理和方法。实验原理牛乳中主要的蛋白质是酪蛋白，含量约为35g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白质的混合物，等电点为4.7。利用等电点时溶解度最低的原理，将牛乳的pH调至4.7时，酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物，乙醚除去脂类杂质后便可得到纯的酪蛋白。试剂和器材•试剂：95%乙醇；乙醇—乙醚混合液(V/V=1∶1);无水乙醚0.2mol/LpH4.7醋酸—醋酸钠缓冲液•材料纯牛奶(蒙牛)1．将25mL牛奶加热至40℃。在搅拌下慢慢加入预热至40℃、pH4.7醋酸缓冲液25mL。用精密试纸调pH值至4.7。2.将上述悬浮液冷却至室温。离心10min(3000r/min)弃去上清液，得酪蛋白粗制品。3．用水洗沉淀两次，离心5min(3000r/min)，弃去上清液。操作方法3．用乙醇洗沉淀1次，离心5min(3000r/min)，弃去上清液。用乙醇—乙醚混合液洗沉淀1次。最后用乙醚洗沉淀1次，各离心5min(3000r/min)。4．将沉淀摊开在表面皿上，风干；得酪蛋白纯品。5．准确称重，计算含量酪蛋白g/100mL牛乳（g%）,并和理论含量为3.5g/100mL牛乳相比较，求出实际得率。1．制备高产率纯酪蛋白的关键是什么？思考题