文献检索与利用综述作业

文献检索与利用综述作业生物技术1201于凤川1020512129检索课题名称：代谢工程改造酿酒酵母合成青蒿素一、检索目的：青蒿素（artemisine）是从中药黄花蒿中提取的有过氧基团的倍半萜内酯抗疟新药。被WTO批准为世界范围内治疗脑型疟疾和恶性疟疾的首选药物。但目前青蒿素的生物合成途径仍未清晰。二、文献检索范围及检索策略序号所检索数据库名称检索的数据库收录时间检索结果（篇）1中国期刊全文数据库（CNKI）1994-现在122中文科技期刊数据库（重庆维普）1989-现在123中国学位论文全文数据库（万方）1977-现在154Calis外文期刊网CCC-3检索词：中文：1、酵母2、青蒿素3、代谢4、生物合成5、基因工程6、中间体英文：1、Yeast2、artemisinin3、metabolism4、biosynthesis5、geneticengineering6、midbody检索式：中文：酵母*青蒿素*（生物合成+代谢）（基因工程菌+酵母）*青蒿素*中间体英文：（Yeastorgeneticengineering)andartemisinin三、检索结果1、篇名：酵母中青蒿素作用靶点的探索作者：黄倩;周兵;文献来源：清华大学学报(自然科学版),JournalofTsinghuaUniversity(ScienceandTechnology),编辑部邮箱2008年03期摘要：为了验证前人提出的青蒿素在疟原虫中靶点蛋白的可信性并寻找其直接作用的靶点,用酵母作为模式生物,对候选靶点在酵母中的同源蛋白进行基因改造,研究其对青蒿素抑制作用的影响,并利用与琼脂糖偶联的二氢青蒿素(DHA)寻找与之特异性紧密结合的酵母蛋白。研究发现酵母中的同源蛋白似乎没有在青蒿素抑制中起关健作用;并且未找到能与DHA特异性紧密结合的酵母蛋白。结果表明:过去提出的青蒿素作用靶点可能不正确,并暗示青蒿素可能没有特异专一的蛋白靶点或同时作用于多个靶点。2、篇名：青蒿素生物合成研究进展作者：静一;罗安才;文献来源：安徽农业科学,JournalofAnhuiAgriculturalSciences,编辑部邮箱2010年04期摘要：综述了青蒿素生物合成途径及其关键酶3-羟基-3-甲基戊二酰CoA还原酶、法呢基焦磷酸合酶、紫穗槐-4,11-二烯合酶、紫穗槐-4,11-二烯P450单加氧酶。3、篇名：酵母代谢工程菌生产青蒿素中间体的研究作者：孔建强、王丽娜、朱平、程克棣、王伟文献来源：2008全国药用真菌学术研讨会论文集摘要：青蒿素是重要的抗疟药物,紫穗槐-4,11-二烯是其中间体。本论文构建了两种能生产紫穗槐-4,11-二烯的酿酒酵母工程菌:整合体型和质粒型.以朱栾倍半萜为标准品,对这两种酿酒酵母的代谢产物进行GC-MS检测,发现都能产生紫穗槐-4,11-二烯,而且整合体型酵母工程菌紫穗槐-4,11-二烯的产量要高于质粒型,达到117mg·L-1朱栾倍半萜当量。4、篇名：基因工程酵母全合成青蒿素的策略作者：曾丽香、冯丽玲、ZENGLi-xiang、FENGLi-ling文献来源：中外医学研究201008(14)摘要：目的构建青蒿细胞色素P450单加氧酶(CYP71AV1)和青蒿醛△11(13)双键还原酶(DBR2)基因酵母表达载体,为在微生物体内重建青蒿素合成途径打下基础.方法采用PCR扩增、片段连接表达载体、转化大肠杆菌、双酶切和序列分析鉴定重组子,并将CYP71AV1-DBR2双基因表达载体导入酵母菌中.结果分别获得1488bp的CYP71AV1基因和1246bp的DBR2基因,构建了重组子pESC-CYP-DBR2,测序结果与GenBank上已登录的相应基因序列吻合,将其导入酵母菌后,已检测到它们的表达.结论成功构建了青蒿素前体合成基因的酵母表达载体,为下一步培育青蒿素全合成酵母工程菌打下了基础。5、篇名：紫穗槐-4,11-二烯合酶及其代谢工程研究进展作者：孔建强;黄勇;沈君豪;王伟;程克棣;朱平;文献来源：药学学报,ActaPharmaceuticaSinica,编辑部邮箱2009年12期摘要：紫穗槐-4,11-二烯合酶催化FPP(farnesylpyrophosphate,法尼基焦磷酸)生成青蒿素前体紫穗槐-4,11-二烯,是青蒿素生物合成途径中的关键酶。本文对紫穗槐-4,11-二烯合酶的分子生物学和代谢工程研究进行了综述。紫穗槐-4,11-二烯合酶编码基因及其相关核酸序列已经得到了克隆。紫穗槐-4,11-二烯合酶cDNA全长1641bp,编码546aa。紫穗槐-4,11-二烯合酶最适pH范围较宽,但需要二价金属离子作为辅酶才能发挥作用,其产物和底物的特异性不高。在紫穗槐-4,11-二烯合酶作用下,FPP首先进行的是1,6-合环,然后是1,10-合环,形成紫穗槐-4,11-二烯。由于紫穗槐-4,11-二烯合酶在青蒿素生物合成中具有重要的意义,自从其基因被克隆测序后,先后被导入E.coli、S.cereviseae、烟草、拟南芥和A.nidulans,获得了能产生紫穗槐-4,11-二烯的各种工程菌或细胞,研究通过不同方式提高工程菌中紫穗槐-4,11-二烯产量的方法。6、篇名：酵母工程菌制备紫穗槐-4,11-二烯的研究作者：孔建强;沈君豪;黄勇;王伟;程克棣;朱平;文献来源：药学学报,ActaPharmaceuticaSinica,编辑部邮箱2009年11期摘要：构建了两种能产生紫穗槐-4,11-二烯的酿酒酵母工程菌,其中附加体型工程菌W303-1B[pYeDP60/G/ADS]含有表达载体pYeDP60/G/ADS。整合体型工程菌W303-1B[rDNA:ADS]是将ADS基因的表达盒序列通过同源重组的方式整合到酿酒酵母W303-1B基因组中。GC-MS检测发酵产物,结果表明这两种工程菌均能产生紫穗槐-4,11-二烯,但附加体型工程菌产生的紫穗槐-4,11-二烯的产量要高于整合体型工程菌的产量。Southern杂交检测表明,ADS基因以单拷贝的形式整合到W303-1B基因组中,低于附加体型工程酵母中的ADS基因拷贝数。这些结果表明,ADS基因的拷贝数与酵母工程菌中紫穗槐-4,11-二烯的产量呈正相关。7、篇名：Productionoftheantimalarialdrugprecursorartemisinicacidinengineeredyeast(酵母工程菌生产抗疟药物青蒿素的前体青蒿酸)作者：Ro,DK;Paradise,EM;Ouellet,M;文献来源：Nature440,940-943(13April2006)摘要：Malariaisaglobalhealthproblemthatthreatens300–500millionpeopleandkillsmorethanonemillionpeopleannually1.Diseasecontrolishamperedbytheoccurrenceofmulti-drug-resistantstrainsofthemalariaparasitePlasmodiumfalciparum2,3.Syntheticantimalarialdrugsandmalarialvaccinesarecurrentlybeingdeveloped,buttheirefficacyagainstmalariaawaitsrigorousclinicaltesting4,5.Artemisinin,asesquiterpenelactoneendoperoxideextractedfromArtemisiaannuaL(familyAsteraceae;commonlyknownassweetwormwood),ishighlyeffectiveagainstmulti-drug-resistantPlasmodiumspp.,butisinshortsupplyandunaffordabletomostmalariasufferers6.Althoughtotalsynthesisofartemisininisdifficultandcostly7,thesemi-synthesisofartemisininoranyderivativefrommicrobiallysourcedartemisinicacid,itsimmediateprecursor,couldbeacost-effective,environmentallyfriendly,high-qualityandreliablesourceofartemisinin8,9.HerewereporttheengineeringofSaccharomycescerevisiaetoproducehightitres(upto100 mg l-1)ofartemisinicacidusinganengineeredmevalonatepathway,amorphadienesynthase,andanovelcytochromeP450monooxygenase(CYP71AV1)fromA.annuathatperformsathree-stepoxidationofamorpha-4,11-dienetoartemisinicacid.Thesynthesizedartemisinicacidistransportedoutandretainedontheoutsideoftheengineeredyeast,meaningthatasimpleandinexpensivepurificationprocesscanbeusedtoobtainthedesiredproduct.AlthoughtheengineeredyeastisalreadycapableofproducingartemisinicacidatasignificantlyhigherspecificproductivitythanA.annua,yieldoptimizationandindustrialscale-upwillberequiredtoraiseartemisinicacidproductiontoalevelhighenoughtoreduceartemisinincombinationtherapiestosignificantlybelowtheircurrentprices.疟疾是一种全球性的健康问题，威胁到300–500000000人，造成一百万多人死亡疾病控制是由多重耐药菌株的疟疾寄生虫恶性疟原虫引起的。目前正在开发的合成抗疟药和疟疾疫苗，预防疟疾的疗效有待严格的临床鉴定。从黄花蒿中青蒿素.L提取的倍半萜内酯过氧化物（菊科；俗称青蒿），是非常有效的抗多药耐药疟原虫药物，但供不应求。虽然青蒿素的全合成很困难，但青蒿素的合成中间体现在确实已经实现的。我们在这里报告工程酵母菌 使用一个精心设计的甲羟戊酸途径，紫穗槐二烯合成酶青蒿酸，和一种新的细胞色素P450单加氧酶（cyp71av1）从青蒿执行三氧化紫穗槐-4,11-二烯为青蒿酸。这意味着一个简单的和廉价的净化过程可以用来获得所需的产品。虽然酵母工程已经能够生产青蒿酸，但产量优化和产业规模将需要提高将青蒿酸生产到足够高的水平，降低青蒿素联合疗法的成本价格。8、篇名：酵母工程菌制备抗疟药物青蒿素前体的研究作者：孔建强、王伟、朱平、程克棣文献来源：2008年生物产业技术研讨会论文集摘要：克隆了青蒿素生物合成途径的酶基因:紫穗槐-4,11-二烯合酶基因和紫穗槐-4,11-二烯氧化酶基因,将这两个基因以及酵母的HMG-CoA还原酶基因,FPP合酶基因导入酿酒酵母WHT,构建分别能合成紫穗槐-4,11-二烯和青蒿酸的酵母代谢工程菌.通过GC-MS,在紫穗槐-4,11-二烯酵母工程菌中检测到了紫穗槐-4,11-二烯,产量达13.1688·L-1朱栾倍半萜当量；通过傅立叶回旋共振质谱,在青蒿酸酵母工程