注射用甲氨蝶呤标准操作规程2005

江苏恒瑞医药股份有限公司JIANGSUHENGRUIMEDICINECO.,LTD.管理文件和管理程序AdministrationDocument&ManagementProcedure标准操作程序StandardOperatingProcedure注射用甲氨蝶呤检验标准操作规程文件号：SOP-QM20301800页号：1/8分发部门：质量部执行日期：2005年07月01日变更记载/History文件名称：FileName：文件号：FileCode:执行日期:implementDate:变更原因:Rationale:注射用甲氨蝶呤检验标准操作规程（1.0g）SOP-QM01007002001.01.06注射用甲氨蝶呤检验标准操作规程（100mg）SOP-QM01008002001.01.06注射用甲氨蝶呤检验标准操作规程（5mg）SOP-QM01009002001.01.06注射用甲氨蝶呤检验标准操作规程SOP-QM203018002005.07.01药典修订起草/日期WrittenBy/Date审核/日期ReviewedBy/Date批准/日期AcceptedBy/DateSOP-QM20301800Page2of8起草/日期WrittenBy/Date审核/日期ReviewedBy/Date批准/日期AcceptedBy/Date1.性状本品应为黄色或棕黄色疏松块状物或粉末.。2.鉴别2.1所用试剂与试液:0.5%碳酸铵溶液:称取碳酸铵0.1g,加水20ml使溶解,摇匀。盐酸溶液(9→1000):取盐酸9ml,加水使成1000ml,搅匀。2.2所用仪器:紫外分光光度计，并已校验2.3操作方法：取供试品适量（应为含甲氨蝶呤5mg），置50ml量瓶中，加0.5%碳酸铵溶液1ml溶解后，加盐酸溶液(9→1000)稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置50ml量瓶中，加盐酸溶液(9→1000)稀释至刻度，摇匀，制成每1ml中含10μg的溶液，在244nm与306nm的波长处有最大吸收，在234nm与262nm波长处有最小吸收。3.检查3.1酸碱度3.1.1所用试剂及试液磷酸盐标准缓冲液：精密称取在115±5℃干燥2~3小时的无水磷酸氢二钠3.55g与磷酸二氢钾3.40g，加水使溶解并稀释至1000ml。硼砂标准缓冲液精密称取硼砂（Na2B4O7·10H2O）3.81g(注意避免风化)，加水使溶解并稀释至1000ml。置聚乙烯塑料瓶中，密塞，避免与空气中二氧化碳接触。3.1.2所用仪器：酸度计，酸度计每年检定一次，使精密度和准确度符合要求。3.1.3原理电位法测定pH值是用饱和甘汞电极为参比电极，玻璃电极作指示电极(或复合电极)，在供试液中组成原电池，测量电池电动势，以测溶液的pH值，借以控制该品的酸碱性。3.1.4操作方法酸度计校正：先用硼砂标准缓冲液和磷酸盐标准缓冲液校正酸度计，在与测定供试液相同的温度下，用磷酸盐标准缓冲液充满测定池，将温度钮调到与溶液温度一致，斜率调节至100%,再调节定位控制钮，使测得的pH值与此温度时磷酸盐标准缓冲液标准值一致，用硼砂标准缓冲液充满测定池，在测定供试液相同的温度下测定pH值，硼砂标准缓冲液测得pH值与此温度时标准值之差应≤±0.07pH单位.若偏差大于0.07pH,应检查电极,如果电极不合格,应更换之.调节斜率或定位钮使测得值与标准值一致,用二种标准缓冲液重新校正,直到不再调节控制钮而二种标定用缓冲液与表中值之差不超过0.02pH单位.取供试品5mg与100mg为5瓶，1.0g为1瓶，各加水5mg为2ml，100mg为2ml，1.0g为400ml溶解后，合并，摇匀，测定pH,应为7.0～9.0。每次更换标准缓冲液或供试液前，应用纯化水充分洗涤电极，然后将水吸尽，也可用所换的标准缓冲液或供试液洗涤。3.2干燥失重3.2.1原理:药品的干燥失重，系指药品在规定的条件下干燥后所减失重量的百分率。主要指水分、结晶水及其SOP-QM20301800Page3of8起草/日期WrittenBy/Date审核/日期ReviewedBy/Date批准/日期AcceptedBy/Date它挥发性物质如乙醇等，从减失的重量和取样量计算供试品的干燥失重。3.2.2仪器与用具万分之一电子天平；真空减压干燥箱；并已校验扁形称量瓶收干燥器（普通）3.2.3试药与试液干燥剂为五氧化二磷。干燥剂应保持在有效状态。3.2.4操作方法:取本品约1.0g，平铺于100℃减压干燥至恒重后的扁形称量瓶中，精密称定，在100℃减压干燥,以五氧化二磷为干燥剂，干燥时应将瓶盖取下,置于称量瓶旁,或将瓶盖半开,取出时须将瓶盖盖好,干燥后取出称量瓶,置干燥器中放冷至室温(约需30~60分钟),精密称定重量,重复操作,直至恒重，按下式计算干燥失重:A-B干燥失重=------------×100%A-W式中A为干燥前称量瓶与供试品重；gB为干燥后称量瓶与供试品重；gW为恒重的称量瓶重；g3.2.5结果判断:干燥失重应不得过5.0%3.2.6注意事项:a)结果按有效数字修约规则进行修约，有效位数应与标准中的规定相一致。b)恒重，除另有规定外，系指连续两次干燥后的重量差异在0.3mg以下的重量。干燥至恒重的第二次及以后多次称重，均应在规定条件下继续干燥1小时后进行。c)当用减压干燥器或恒温减压干燥箱,除另有规定外,压力应在2.67kPa(20mmHg)以下;打开恒温减压干燥箱时,缓缓旋开活塞,以免造成气流,吹散供试品;称量瓶宜选用单层玻璃盖;供试品应置于临近温度计部位,以免因箱内温度不均匀造成的误差。3.3含量均匀度（5mg）3.3.1所用仪器；紫外分光光度计3.3.2所用试液：盐酸溶液（9→1000）3.4.3操作方法：取供试品10瓶,分别加水1ml使内容物溶解，移置50ml量瓶中，用盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，精密量取上述溶液1ml置10ml的量瓶中，用盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，制成每1ml中约含甲氨蝶呤10ug的溶液，供为供试品溶液，用盐酸溶液（9→1000）作空白，在306nm的波长处分别测定吸收度A，，计算平均吸光度以及各瓶的吸光度与平均吸光度的差异值。3.3.4结果与判断：SOP-QM20301800Page4of8起草/日期WrittenBy/Date审核/日期ReviewedBy/Date批准/日期AcceptedBy/Date每瓶的吸光度与10瓶的平均吸光度相比较，差异大于±15%的不得多于1瓶，并不得超过±25%。3.4装量差异3.4.1所用仪器:分析天平:万分之一;电热烘箱并已校验3.4.2操作方法:取供试品5瓶,去铝塑复合盖和瓶签后,容器外壁用乙醇洗净,置干燥器内放置1~2小时,干燥后,分别编号,依次放于固定位置。轻扣橡皮塞,使其上附着的粉末全部落下,开启容器(注意避免玻璃屑等异物落入容器中),分别迅速精密称定每瓶的重量,倾出内容物,容器用水、乙醇洗净，依次放回原固定位置，称重,加水溶去内容物后,冲洗干净，置烘箱内烘干,放冷至室温，或在干燥器内干燥较长时间，分别精密称定每一容器的重量，即可求出每1瓶的装量和平均装量。3.4.3结果判断:100mg规格的限度为±7％，1.0g规格的限度为±5％。3.5可见异物检查3.5.1检查装置及条件：澄明度检查仪光源：采用日光灯，于光照度2000～3000lx的位置，背景为不反光白色，在避光室或暗处用目检视。层流工作台3.5.2操作方法：在层流净化台下，取供试品5瓶,擦净容器外壁及橡皮塞表面，分别注入适量不溶性微粒检查用水，振摇溶解，将供试品至人眼距离25cm。照可见异物检查法检查。3.5.3结果判断：每瓶不得检出金属屑、玻璃屑、长度或最大粒径超过2mm纤毛和块状物等明显外来的可见异物，并在旋转时不得检出烟雾状微粒柱，如有一支发现其他可见异物（如2mm以下的短纤毛及点、块等）不多于3个，另取10瓶复检，均应符合规定.3.6不溶性微粒3.6.1所用仪器：不溶性微粒检测仪；层流净化台3.6.2试验环境及检测：先取约50ml微粒检查用水，照注射剂中不溶性微粒检查法（SOP-QM102-4000）采用光阻法检查,每10ml中含l0μm以上的不溶性微粒应在10粒以下，含25μm以上的不溶性微粒应在2粒以下。否则表明微粒检查用水、玻璃仪器或试验环境不适于进行微粒检查，应重新处理，检测符合规定后方可进行供试品检查。3.6.3操作方法及结果判断取本品3瓶，各在净化工作台上精密加入适量微粒检查用水溶解及冲洗内容物于取样瓶中，总体积不得少于20ml，照注射剂中不溶性微粒检查法（SOP-QM102-4000）采用光阻法检查，计算每个容器所含的微粒数，每个供试品容器中含10m以上的微粒不得超过6000粒，含25m以上的微粒不得超过600粒。3.7无菌检查无菌检查应在环境洁净度10000级和局部100级、单向流空气区域内进行。3.7.1所用仪器及用具:SOP-QM20301800Page5of8起草/日期WrittenBy/Date审核/日期ReviewedBy/Date批准/日期AcceptedBy/Datea)培养箱恒温培养箱（30～35℃）、霉菌培养箱（23～28℃）b)灭菌器电热干燥箱（温度能达250℃）、高压灭菌器c)净化工作台、酒精灯、真空泵、无菌过滤器、注射器等3.7.2所用试剂及试液:a)消毒剂1%新洁尔灭溶液、75%酒精、甲酚皂液等。b)金黄色葡萄球菌菌液取金黄色葡萄球菌[CMCC（B）26003]的营养琼脂斜面新鲜培养物1白金耳，接种至营养肉汤培养基内，在30～35℃培养18~24小时后，用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至每1ml中含10～100个菌。c)稀释剂：0.9%无菌氯化钠溶液d）冲洗液：pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液e)培养基：硫乙醇酸盐流体培养基、改良马丁培养基3.7.3培养基的准备按无菌检查法进行培养基的适用性检查：无菌检查和灵敏度检查应符合规定。3.7.4操作方法取供试品(规格1.0g的为20瓶,100mg的为30瓶,5mg的为60瓶)各加入灭菌水制成2.5mg/ml溶液备用，取全封闭集菌过滤器5管，加pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液30ml浸泡，将供试液平均吸入其中3管，过滤，每管加入800ml的pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗滤膜，最后在两管中加入硫乙醇酸盐流体培养基100ml，其中一管加入菌量小于100CFU的1ml的金黄色葡萄球菌菌液作为阳性对照杯，金黄色葡萄球菌的对照菌液的加入选择在阳性对照室进行，第三管加入改良马丁培养基100ml。阴性对照同法操作，硫乙醇酸盐流体培养基置30～35℃培养，改良马丁培养基在23～28℃培养，阴性对照应置相应的培养条件培养，培养14天，逐日观察结果。阳性对照置30～35℃培养48~72小时。3.7.5结果判断当阳性对照管48~72小时显浑浊并确有细菌生长，阴性对照管呈阴性时，可根据观察所得的结果判定：硫乙醇酸盐流体培养基及改良马丁培养基均为澄清，或虽显浑浊但经证明并非有菌生长，判供试品符合规定；硫乙醇酸盐流体培养基及改良马丁培养基任何一管显浑浊并确证有菌生长，判供试品不符合规定当满足下列任何一个条件时，判断试验结果无效：1.对无菌检查试验相关设施的微生物监控数据表明其不符合规定。2.对无菌试验过程的回顾，揭示了本操作程序是错误的。3.阴性对照管有菌生长。4.供试品管中生长的微生物经鉴定后，确证微生物生长是因为无菌试验中所使用的物品和（或）无菌操作技术不当引起的。试验若经确认无效，应重试。重试时，重新取同量供试品，依法重试，若无菌生长，判供试品符合SOP-QM20301800Page6of8起草/日期WrittenBy/Date审核/日期ReviewedBy/Date批准/日期AcceptedBy/Date规定；若有菌生长，判供试品不符合规定。3.8细菌内毒素检查3.8.1试剂与试液:a)细菌内毒素工作标准品中国药品生物制品检定所生产，规格：10~200EU/支，贮藏：遮光，2~8℃保存。