总结的方法

香菇多糖的提取方法香菇是我国传统的药食两用食品，含有多种有效药用成分尤其是香菇多糖,是一种宿主免疫增强剂,具有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等功能医学研究证明,它是通过刺激机体的免疫系统使机体的免疫功能得到恢复和提高,由机体本身的抵抗力去杀死肿瘤细胞它的作用是间接的，毒副作用小,在临床上具有很好的应用前景。目前香菇多糖制成针剂已在日本生产并外销,但一直以来工艺复杂,收率低,成本较高。本文对香菇多糖的提取方法进行了总结比较，旨在为香菇多糖及其他真菌多糖的深入研究和开发利用提供理论参考。提取方法：1热水浸提法热水浸提法是最主要的传统提取多糖的方法，将香菇子实体或菌丝体破碎,放于100℃的热水中,4h后进行过滤,滤渣再反复提取2~3次。取滤液加入3倍体积的95%乙醇处理4h,经离心、过滤、去除沉淀物、将滤液浓缩、烘干,即成为粗多糖。但是它通常需要更长的时间和更高的温度但是提取效率却很低。由此分析可知用水提不但工艺比较复杂，多糖得率低，而且纯化过程复杂且纯化精度低，故不宜选用此方法来提取香菇多糖。2动态高压微流化（DHPM）技术辅助提取香菇多糖（Dynamichighpressuremicrofluidization-assistedextration）DHPM是一个新兴的动态高压技术。不同于高的净水压力，此方法联合了高速冲击,高频振动,瞬时压力下降,强烈的剪切、气蚀和达到200mpa超高压力。有研究小组第一次用DHPM提取玉米花粉多糖,而且发现DHPM辅助提取可以有效地提高玉米花粉多糖的产量显示了它在提取多糖上巨大的潜力。动态高压微流化技术(DHPM)已经应用于辅助香菇多糖的提取。相对于传统的热水浸提法，DHPM辅助提取法对羟基自由基、超氧化物阴离子自由基、DPPH(二苯基苦基苯肼)自由基和亚硝酸盐有着更好的清除能力。可以得出结论，DHPM是一个很有前景的方法,在提取香菇多糖时可以提高它的抗氧化活性也可以提高产量。提取工艺：香菇子实体→放在50℃的烘箱中烘干两天→打碎过100目筛→5克的干粉末→沉浸在有500毫升蒸馏水的烧杯中→在30Mpa的压力下用普通的均质机均质一次→乳浊液在微流化均质器中在一个选定的压力下均质两次→热水浴提取一定时间→冷却→4000r的转速下离心10min→收集上清液→加入三倍体积的无水乙醇→4℃下放置一晚沉淀多糖→沉淀再溶解在蒸馏水中→相同体积的75%(v/v)乙醇添加到重新溶解溶液(去除低聚糖)→离心→收集上清液→加入三倍体积的无水乙醇沉淀→离心→过程重复一次→沉淀物用无水乙醇洗两次→用醚洗一次→然后溶解在蒸馏水中→10000r离心30min→提取上清液→加入等体积的丙酮→离心(4000r,10min）→溶液冻干和存储基于响应面曲线的响应面分析方法，优化DHPM辅助提取香菇多糖的条件。在此需要考虑三个主要的独立变量（DHPM压力，水与原材料的比例，提取温度）。通过已建好的预测模型得到得提取率最高的且最优的提取香菇多糖的条件是：水与原材料比率为65.0ml/g；压力为147.44MPa,提取温度为82.5℃。在这些条件下预测的香菇多糖的提取率为7.234％。之后在提取条件为147Mpa，65.0ml/g,83℃的条件下香菇多糖的提取率为7.2％，这与预测的结果相一致。比较于热水提取法，它显著提高了香菇多糖的提取率。在80度条件下处理1h，DHPM相关的提取产量是6.76%，然而热水提取的产量是3.27%。可能是由于DHPM通过它的结合剪切力，冲击力和高频率的震动来增加了质量的转化率和细胞破碎的程度。在DHPM处理的时候，细胞内外的压力差将会增加。针对增加的压力差，溶剂的流量将会增加，这样就能使溶剂渗入细胞，增加提取效率。而且，由于空穴作用导致的细胞分解可能也是提取率增加的另一个主要原因。DHPME和HWE的分子质量分别为913329和965361Da（苯酚硫酸法）。DHPME的分子质量显著低于HWE的分子重量，这可能是由于机械力和DHPM的空穴作用导致的香菇多糖的降解。最近的报导显示DHPM处理可以使高甲氧基果胶分解成小分子。DHPME和HWE的糖含量分别为91.79%和90.64%。扫描电镜图像显示使用DHPM处理香菇果肉后变得更小，同时果肉的表皮与未处理的相比变得更松散，这表示DHPM的处理已经损害了香菇果肉的细胞结构，从而导致传质阻力降低。因此，溶剂的扩散率将会增加，从而引起提取产量的增加。3酶法提取香菇多糖采用纤维素酶和蛋白酶来提取多糖，考察了影响酶制剂提取的条件，即酶制剂作用时间、料液比和原料粒度对提取物产率的影响。酶解提取方法：原料称重→烘干→粉碎→称重→酶水解→灭酶→过滤→浓缩→阴阳离子交换柱（去除蛋白质）→葡聚糖凝胶柱→氧化铝凝胶柱→醇沉→真空冷冻干燥→香菇多糖经过验证实验，得出最佳实验条件为酶浓度0.2%、时间6h、温度45℃、pH7.0。进行复合酶实验，采用纤维素酶和木瓜蛋白酶、纤维素酶和中性蛋白酶在各自最佳的提取条件下进行复合酶提取实验。用复合酶的提取率明显高于单酶提取，这是因为香菇细胞壁由蛋白质、几丁质和纤维素等构成、很坚固，通常食用时，人体只能消化吸收20%～40%，使用纤维素酶和蛋白酶先后水解，共同作用于香菇的细胞壁，使其破裂，多糖易从胞内释放，比单一酶作用提高了香菇多糖的提取率，但是如果蛋白酶和纤维素酶同时使用，由于各自的最适条件不同，不能达到最佳水解效果，同时蛋白酶对纤维素酶的水解作用，导致某些文献报道双酶水解比纤维素酶水解效果没有明显提高。水提醇沉的多糖得率低于以上三种酶的多糖得率。在酶解的过程中，木瓜蛋白酶的提取率明显高于纤维素酶和中性蛋白酶。4微波辅助法提取香菇多糖微波辅助法提取香菇多糖并用离子交换树脂去除杂质蛋白的工艺方法。提取工艺为：干香菇粉碎→加水浸泡20min→微波辐射→热水浸提30min→离心取上清液→浓缩→加乙醇沉淀多糖→离心分离多糖→多糖粗品制成溶液→上树脂柱去除杂蛋白→流出液真空干燥得香菇多糖产物试验结果表明最佳提取工艺条件为:固液比1g∶20mL,微波辐射功率为280W，辐射时间5min，乙醇与多糖提取液体积比为4∶1，香菇多糖提取率可达到9.46%；采用LX-67阴离子交换树脂在料液pH9时可有效去除蛋白质杂质，多糖纯度可达到85%。5超声波法提取香菇多糖利用超声波法提取香菇多糖,既节省时间,又降低能量消耗,在实际生产中是可行的。张海岚等用超声法提取香菇多糖,设计正交实验,对香菇的超声提取工艺进行了研究,得出最佳工艺为用1～2mm粒度药材,95%乙醇沉淀,超声80min。用超声法提取香菇多糖是一种简单、快捷、高效的提取方法。念保义等用超声提取、超滤分离香菇多糖,结果表明,超声提取能提高香菇多糖的提取率,缩短提取时间,减少料液比和降低提取液的粘度,而提取液粘度的降低有利于超滤分离降低浓差极化的影响,提高处理量。其主要指标是水浸提2h,料液比为1:15(体积比),超声功率为80W,处理时间为13min,多糖的提取率达到6.62%。6超滤法提取分离香菇多糖李志洲研究了以香菇为原料,利用超滤膜分离装置进行香菇多糖的提取分离,并建立了香菇多糖提取液超滤过程修正凝胶极化模型,这种工艺香菇多糖的提取率可达6.10%,多糖粗品含量在9.0%以上。研究表明,膜分离技术在香菇多糖的提取中具有很大的优越性。采用超滤膜装置,不仅工艺流程简单,工序少,提取时间短,且多糖得率高。苯酚-硫酸法测定香菇多糖含量,得出香菇多糖的提取率为5.7%,这充分说明利用超滤方法提取分离香菇多糖是有效的工艺手段。郑宗昆等采用螺旋卷式超滤器对香菇多糖进行提取研究。结果表明,在此试验范围内,用微滤作预处理较离心法处理好,超滤温度25℃,pH值接近浸提介质的pH值,超滤压力为0.15～0.18MPa,制得香菇多糖的纯度为74.4%,回收率为79.6%,是以D-葡萄糖为主的混合多糖。