大豆中磷含量的测定(化本用)

邯郸学院化学系综合性、设计性实验报告题目大豆中磷含量的测定学生指导教师刘卫洁年级专业邯郸学院化学系2014年7月大豆中磷含量的测定一、前言：大豆(soybean)，是豆类中营养价值最高的品种。在百种天然的食品中，它名列榜首，含有大量的不饱和脂肪酸、多种微量元素、维生素及优质蛋白质。大豆内含40%蛋白质，脂肪含量丰富高达25%。并且其含蛋白质比牛肉多，钙含量比牛奶高。卵磷脂含量比鸡蛋高，还含有丰富的矿物质、维生素。磷是体内许多重要物质（如核酸、磷蛋白、磷脂等）的组成成分，它主要以磷酸根的形式在体内发挥生理作用。大豆中磷含量丰富，对人体有许多好处。本实验采用分光光度法测定大豆中磷的含量。二、实验目的1、掌握钼蓝分光光度法测定磷含量的方法2、熟练分光光度计的使用。3、掌握马弗炉灰化的基本方法。三、实验原理大豆中的有机物经酸氧化，使磷在酸性条件下与钼酸铵结合生成磷钼酸铵。此化合物被对苯二酚、亚硫酸钠还原成蓝色化合物——钼蓝。用分光光度计在波长660nm处测定钼蓝的吸光度值，以定量分析磷含量。四、实验材料1、仪器托盘天平、分析天平、电磁炉、容量瓶（50mL,100mL,1000mL）、721分光光度计及一些实验室的常用仪器等2、主要试剂①盐酸②氧化锌，氢氧化钠③15％硫酸溶液：取15mL浓硫酸徐徐加入到80mL水中混匀。冷却后用水稀释至100mL。④对苯二酚溶液：称取0.5g对苯二酚于100mL水中，使其溶解，并加人一滴浓硫酸(减缓氧化作用)。⑤钼酸铵溶液：称取O．5g钼酸铵[(NH4)6Mo7O24·4H2O]用15％硫酸稀释至100mL⑥亚硫酸钠溶液配制：称取20g无水亚硫酸钠于100mL的水中，使其溶解（此溶液需于实验前临时配制，否则可使钼蓝溶液发生混浊）。⑦磷标准储备液(100ug/mL)：精确称取在105摄氏度下干燥的磷酸二氢钾(优级纯)O.4394g，置于1000mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度。此溶液每毫升含100ug磷。⑧磷标准使用液(10ug/mL)：吸取磷标准储备液10ml，加水稀释至100ml。五、实验步骤1、样品的制备先将大豆用粉碎机粉碎后待用。取三个坩埚放在马弗炉（温度约600摄氏度）中进行恒重，两次相差在0.2mg-0.4mg之间，用分析天平称取试样约6g放入恒重的坩埚中，再在坩埚中加入氧化锌0.5g，先在电炉上炭化，然后放入550摄氏度的马弗炉中灼烧至灰白，灼烧时间约2小时，取出坩埚放在干燥器中冷却至室温，，用热盐酸（1：1）10mL溶解灰分，并加热微沸5，分钟，将溶解液过滤，注入100mL容量瓶中，用热水冲洗坩埚和滤纸，待滤液冷却至室温后，用50%的氢氧化钠溶液中和至出现浑浊，缓慢滴加盐酸使氢氧化锌沉淀全部溶解后，再滴2滴，最后用水稀释至刻度，摇匀。2、标准曲线的绘制准确吸取磷标准使用液O、2、4、6、8、10mL，分别置于50mL容量瓶中，加入10mL钼酸溶液摇匀，静置几秒钟。加入5mL亚硫酸钠溶液，5mL对苯二酚溶液，摇匀。加水至刻度，混匀。静置0.5h以后，在分光光度计660nm波长处测定吸光度,绘制标准曲线。3、样品的测定准确吸取试样测定液5ml及同量的空白溶液,分别置于50mL容量瓶中，以下操作步骤同第二步“标准曲线的绘制”,以测出的吸光度在标准曲线上查得试样液中的磷含量。六、数据记录及处理1、坩埚的恒重2、加入大豆质量3、标准溶液的吸光度序号123456磷标液浓度（ug/mL）吸光度4、未知液的吸光度5、磷测定标准曲线6、计算大豆中磷的含量：七、实验结果讨论八、注意事项1、该实验所接触的试剂均为腐蚀性强或具有一定的毒性，因此在实验过程中要注意安全。2、亚硫酸钠溶液一定要现配现用，不然会影响实验的进行。3、亚硫酸钠一定要是干燥、未过期的。九、实验心得