实验蛙心脏灌流蛙心起搏点的观察收缩与代偿间歇

实验四蛙心脏灌流蛙心起搏点的观察期前收缩与代偿间歇[目的要求]1.学习暴露蛙类心脏的方法，熟悉心脏的结构。2.观察心脏起搏点以及各部分的自律性高低和心脏的兴奋性传导顺序。[实验原理]1.两栖类动物的心脏解剖2.stannius结扎[实验器材]动物：蟾蜍仪器及药品：蛙类手术器械，丝线，任式液。一、蛙心起搏点的观察[方法步骤]1.破坏脑脊髓。2.仰卧位固定于蛙板上。3.打开胸腔暴露心脏，观察心脏的结构。4.斯氏结扎，记录结果。[实验结果及理论分析]静脉窦心房心室对照第一扎第二扎斯氏结扎记录表（次/分钟）[实验目的]1．学习在体蟾蜍心跳曲线的记录方法。2．观察心脏在兴奋过程中兴奋性的变化。[实验原理]心肌的有效不应期（收缩期，舒张早期）[实验器材]动物：蟾蜍仪器及药品：生物信号采集处理系统，刺激电极，蛙心夹，张力换能器，蛙类手术器械，任式液。二、蟾蜍心室的期前收缩与代偿间歇[方法步骤]1.破坏脑脊髓2.仰卧位固定于蛙板上。3.打开胸腔暴露心脏4.蛙心夹于心脏舒张期夹住心尖5.连接张力换能器和刺激器6.选择合适的刺激强度；分别在心室舒张的早期、中期和晚期给予单个刺激，观察心跳曲线的变化。[实验结果][讨论][结论]1.蟾蜍毁髓时要彻底。2.实验过程中，应经常用任氏液湿润心脏。3.刺激电极要与心室肌接触良好，应避免短路。4.心跳曲线的上升支应代表心室收缩，下降支代表心室舒张，如相反则应将换能器倒向。5.先用刺激电极刺激蟾蜍的腹壁肌肉，以检测强度是否适宜。[注意事项][思考题]1.正常情况下，为什么静脉窦是蟾蜍心脏的起搏点？它对潜在起搏点如何控制？2.每次结扎后会出现什么现象，为什么？3.如何证实心肌有较长的不应期？心肌的较长不应期有何生理意义？4.期前收缩后一定出现代偿间歇吗？为什么？5.代偿间歇是怎样产生的？6.为何期前收缩幅度有时比正常心缩幅度高，有时比正常心缩幅度低？7.为何心肌有期前收缩而骨骼肌不会出现？三、蛙心灌流[实验目的]学习离体蛙心的灌流方法。观察灌流液中几种离子浓度的改变,相应受体激动剂和阻断剂对心脏收缩活动的影响。[实验原理]两栖类动物的离体心脏，在用与其内环境相似的任氏液灌流时，能维持节律性收缩和舒张。改变罐流液中的离子浓度或加入某些受体激动剂和阻断剂，可以观察到心脏舒缩活动的改变。[实验方法]1、标本的制作：（1）将毁损脑脊髓后的蟾蜍固定在蛙板上，从腹上部正中至两前肢剪开皮肤，打开胸腔，暴露心脏。（2）用眼科剪剪开心包膜。（3）用蛙心夹夹住心尖部。（4）插管：在总主动脉下穿一线，打活结。在左主动脉干根部向心脏方向剪一小切口，将装有少量任氏液的蛙心插管从切口处插入主动脉球。将蛙心插管与心尖部呈45度角，并将插管外旋插入心室。见液面上下波动，心室部可触及插管，即插管已进心室，用备用线结扎血管及插管。将插管中的血液冲洗干净。游离心脏，勿伤静脉窦2、仪器设备的安装连接：（1）将蛙心插管用木夹子固定在铁三脚架上。（2）在木夹子的下方，将张力传感器固定在铁三脚架上。（3）将夹在蛙心尖上的蛙心夹上的丝线系在张力传感器的簧片小孔上。线的松紧适度。（4）张力传感器与放大器CH1相连；打开循环实验—蛙心灌流，开始实验。3、观察项目观察以下处理因素对心脏收缩的影响：（1）0.65%Nacl（2）1%Kcl（3）1%Cacl（4）1：10000肾上腺素（5）1：100000乙酰胆碱（6）乳酸（7）NaHCO3[注意事项]1、各药品的滴管分开使用，不能混淆。2、每次给药前要有正常心博曲线,和给药标记3、药效出现后立即将药吸出,并冲洗干净等心脏搏动恢复正常以后再进行下一项实验。4、插管内液平面应保持一致。5、换能器头段保持向下倾斜，防止进水。6、蛙心插管不要插得太深，防止损伤心脏。窦房沟