动物细胞融合与单克隆抗体导学案

龙江一中2014-15学年度(上)高二年级生物必修二《问题导学、探究发现》导学案编号2编制人:徐桂云审核人:徐桂云使用时间:2015.03.3班级:姓名:教师评价:课前完成导学案,掌握基本题型,要求独立完成，坚决杜绝抄袭现象。实验班学生完成所有内容，普通班学生完成带*号以外的内容。11学习流程【知识回顾】1、简要说明植物体细胞杂交的过程。2、人工诱导植物原生质体融合的方法有哪些？3、植物原生质体融合的原理是。4、植物体细胞杂交的意义是。【问题导学】一、动物细胞融合1、概念：也称细胞杂交，是指_______或_______动物细胞结合形成一个细胞的过程。2、结果：形成___________。3、杂交细胞：融合后形成的具有原来或细胞遗传信息的细胞。4、常用的诱导因素有：、、等。5、灭活的病毒诱导动物细胞融合的原理是什么？不灭活的病毒可以诱导动物细胞融合吗？5、意义：突破了的局限，使远缘杂交成为可能；6、应用：动物细胞融合技术最重要的用途是。【合作探究】1.动物细胞的融合最有价值的应用是什么?细胞融合完成的标志是什么？2.动物细胞的融合与受精作用中精、卵细胞的融合有什么不同？3.动物细胞融合与植物体细胞杂交有何异同？二、单克隆抗体【问题导学】1、抗体：由淋巴细胞（浆细胞）产生，能与发生特异性结合的，具有功能的球蛋白。2、长期以来人们是如何获得抗体的？这种方法的缺点是什么？3、制备原理：①B淋巴细胞（浆细胞）：。骨髓瘤细胞：。②利用使两种细胞融合。4、单克隆抗体的确切定义是。5、制备过程：6、杂交瘤细胞的特点：既能，又能产生。【合作探究】1.不用抗原刺激能否制备单克隆抗体？2.制备单克隆抗体时，为什么要选用B淋巴细胞（浆细胞）和骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞？在融合的过程中你可以找出几种类型的细胞？3.制备单克隆抗体的过程有两次筛选，两次筛选的目的是什么？第一次筛选是。第二次筛选是。4、单克隆抗体的特点：、、。三、单克隆抗体的应用1、作为诊断试剂：由于单克隆抗体、，所以能，并。具有__________、__________、__________、__________的优点。2、用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗，可制成___________。课题动物细胞融合与单克隆抗体课时2学习目标举例说出动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用重点单克隆抗体的制备和应用难点单克隆抗体的制备过程考纲要求2013年考纲中“细胞融合与单克隆抗体”要求为Ⅱ。（Ⅱ：理解所列知识和其他相关知识之间的联系和区别，并能在较复杂的情景中综合运用其进行分析、判断、推理和评价）比较项目细胞融合的原理细胞融合的方法诱导手段用途植物体细胞杂交动物细胞融合体外培养瘤细胞诱导融合给小鼠注射特定的抗原蛋白质从中分离出B淋巴细胞培养的骨髓瘤细胞细胞细胞细胞选择性培养基克隆化培养专一抗体检验阳性足够数量的能分泌所需要抗体的细胞抗体龙江一中2014-15学年度(上)高二年级生物必修二《问题导学、探究发现》导学案编号2编制人:徐桂云审核人:徐桂云使用时间:2015.03.3班级:姓名:教师评价:课前完成导学案,掌握基本题型,要求独立完成，坚决杜绝抄袭现象。实验班学生完成所有内容，普通班学生完成带*号以外的内容。22三.拓展达标【达标训练】1、动物细胞融合的目的中最重要的是（）A.克服远源杂交不亲和B.制备单克隆抗体C.培育新物种D.生产杂种细胞2、能使动物细胞融合的特有的诱导因子是（）A.离心B.灭活的病毒C.电刺激D.振动3、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（）A.经过免疫的B淋巴细胞B.不经过免疫的T淋巴细胞C.经过免疫的T淋巴细胞D.不经过免疫的B淋巴细胞4、单克隆抗体是指（）A．单个骨髓瘤细胞增殖产生的抗体B．单个淋巴细胞增殖产生的抗体C．单个杂交瘤细胞增殖产生的高度单一的抗体D．单个抗体通过克隆，产生大量抗体5、细胞合成DNA有D和S两种途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。骨髓瘤细胞尽管没有S途径，但能不断的分裂增殖，将这两种细胞在试管的培养液中混合，加聚乙二醇促融，再加入氨基嘌呤可筛选出某种细胞。在培养液中存在的细胞种类及筛选出的细胞(细胞融合仅考虑两个细胞的融合)分别是（）A．三种杂交瘤细胞B．五种骨髓瘤细胞C．五种杂交瘤细胞D．一种杂交瘤细胞6单克隆抗体和血清抗体相比，其优越性在于()A、单克隆抗体能够制成“生物导弹”B、单克隆抗体能够在体外制备C、单克隆抗体比血清抗体的特异性强、免疫活性高D、单克隆抗体制备过程简单7单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，错误的是()A．特异性强、灵敏度高B．与抗癌药物结合可制成“生物导弹”C．体外培养B淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体D．由效应B细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌8“生物导弹”是指()A、单克隆抗体B、带有特定药物的单克隆抗体C、杂交细胞D、B淋巴细胞9下图是单克隆抗体制备流程示意图。（1）技术是单克隆抗体技术的基础。（2）根据培养基的用途分类，图中HAT培养基属于培养基。（3）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是。（4）动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外，还可以采用。（5）选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的特点，又具备淋巴细胞的特点。（6）淋巴细胞是由动物体骨髓中的细胞分化、发育而来。（7）杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是。【提高练习】1、基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞混合，用灭活的仙台病毒处理后，不可能获得下列哪种基因型的细胞()A．AAaaB．AaBbC．AabbD．BBbb2.动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是()①诱导融合的方法完全相同②所用的技术手段不相同③所采用的原理完全相同④都能形成杂种细胞A.①②B.①③C.②④D.③④3.关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是()A、可以制成诊断盒．用于疾病的珍断B、可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗C、可以利用基因工程技术生产D、可以在生物体内生产，不能体外生产4.物细胞融合和植物原生质体融合比较，在动物细胞融合中有特殊性的是()A、融合的原理B、融合的优点C、融合的诱导手段D、融合的过程5.图是单克隆抗体制备过程示意图，其中1过程注射的物质和A细胞的名称为()A、抗体、T淋巴细胞B、抗原、T淋巴细胞C、抗体、B淋巴细胞D、抗原、效应B淋巴细胞6.同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你认为有几处是不正确的()A．0B．1C．2D．37.列关于细胞工程的有关叙述，不正确的是()A．利用花药离体培养得到单倍体植株，从紫草的愈伤组织中提取紫草素，利用细胞工程培育“番茄-马铃薯”杂种植株，都利用了植物组织培养技术，而利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗得到多倍体植株没有采用植物组织培养技术B．在进行组织培养时，由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，可能会发生细胞脱分化，染色体变异或基因突变，而不可能发生细胞分化和基因重组C．动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法，所用的技术手段，所依据的原理均相同，都能形成杂种细胞和杂种个体D．“试管婴儿”实质上就是“体外受精”和“胚胎移植”的“产物”，不能使不能产生精子或卵细胞的夫妇能得到自己的孩子；单克隆抗体的制备采用了动物细胞融合技术和动物细胞培养技术植物细胞工程动物细胞工程技术手段植物组织培养，植物体细胞杂交动物细胞培养和融合，单克隆抗体的制备特殊处理机械法去除细胞壁胰蛋白酶处理，制细胞悬浮液融合方法物理方法，化学方法物理方法，化学方法，生物方法典型应用人工种子，杂种植物单克隆抗体的制备培养液区别蔗糖是离体组织赖以生长的成分动物血清不可缺少龙江一中2014-15学年度(上)高二年级生物必修二《问题导学、探究发现》导学案编号2编制人:徐桂云审核人:徐桂云使用时间:2015.03.3班级:姓名:教师评价:课前完成导学案,掌握基本题型,要求独立完成，坚决杜绝抄袭现象。实验班学生完成所有内容，普通班学生完成带*号以外的内容。33【知识拓展】1、如何进行杂交瘤细胞的专一抗体检测及克隆化培养？融合后的细胞经选择性培养基培养后，能存活的细胞就是杂交瘤细胞，但这些杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞，通常用“有限稀释法”来选择。将杂交瘤细胞稀释，用多孔细胞培养板培养，使每孔不超过一个细胞，通过培养让其增殖。然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体，那么上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。阳性孔中的细胞还不能保证是来自单个细胞，挑选阳性孔的细胞继续进行有限稀释，一般需进行3～4次，直至确信每个孔中增殖的细胞为单克隆细胞。该过程即为杂交瘤细胞的克隆化培养。