分子生物学试题库

第2章染色体与DNA名词解释原癌基因：细胞内与细胞增殖相关的正常基因，是维持机体正常生命活动所必须的，在进化上高等保守。当原癌基因的结构或调控区发生变异，基因产物增多或活性增强时，使细胞过度增殖，从而形成肿瘤。复制：以亲代DNA或RNA为模板，根据碱基配对的原则，在一系列酶的作用下，生成与亲代相同的子代DNA或RNA的过程。转座子(transposon或transposableelement)：位于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。包括插入序列和复合转座子。半保留复制：以亲代DNA双链为模板以碱基互补方式合成子代DNA，这样新形成的子代DNA中，一条链来自亲代DNA，而另一条链则是新合成的，这种复制方式叫半保留复制。染色体：染色体是遗传信息的载体，由DNA、RNA和蛋白质构成，其形态和数目具有种系的特性。在细胞间期核中，以染色质形式存在。在细胞分裂时，染色质丝经过螺旋化、折叠、包装成为染色体，为显微镜下可见的具不同形状的小体。核小体：是构成真核生物染色体的基本单位，是DNA和蛋白质构成的紧密结构形式，包括200bp左右的DNA和9个组蛋白分子构成的致密结构。填空题1.真核细胞核小体的组成是DNA和蛋白2.天然染色体末端不能与其他染色体断裂片段发生连接，这是因为天然染色体末端存在端粒结构。3.在聚合酶链反应中，除了需要模板DNA外，还需加入引物、DNA聚合酶、dNTP和镁离子。4.引起DNA损伤的因素有自发因素、物理因素、化学因素。5.DNA复制时与DNA解链有关的酶和蛋白质有拓扑异构酶Ⅱ、解螺旋酶、单链DNA结合蛋白。6.参与DNA切除修复的酶有DNA聚合酶Ⅰ、DNA连接酶、特异的核酸内切酶。7.在真核生物中DNA复制的主要酶是DNA聚合酶δ。在原核生物中是DNA聚合酶Ⅲ。8.端粒酶是端粒酶是含一段RNA的逆转录酶。9.DNA的修复方式有错配修复、碱基切除修复、核苷酸切除修复、DNA的直接修复。选择题1.真核生物复制起点的特征包括（B）A.富含G-C区B.富含A-T区C.Z-DNAD.无明显特征2.插入序列（IS）编码（A）A.转座酶B.逆转录酶C.DNA合成酶D.核糖核酸酶3.紫外线照射对DNA分子的损伤主要是(D)A.碱基替换B.磷酸脂键断裂C。碱基丢失D.形成共价连接的嘧啶二聚体4.自然界中以DNA为遗传物质的大多数生物DNA的复制方式（C）A.环式B.D环式C.半保留D.全保留5.原核生物基因组中没有（A）A.内含子B.外显子C.转录因子D.插入序列6.关于组蛋白下列说法正确的是(D)A.为中性蛋白B.为酸性蛋白C.进化上不具保守性D.染色体结合蛋白7.DNA聚合酶Ⅰ（C）A.是复制酶，但不是修复酶B.没有模板依赖性C.有5′→3′外切酶活性D.5′→3′聚合酶活性极强简述DNA复制的过程DNA的复制过程可被分为3个阶段，即复制的起始、延伸和终止。每个DNA复制的独立单元主要包括复制起始位点和终止位点。DNA复制的起始包括预引发和引发两个阶段。在预引发阶段，DNA解旋解链，形成复制叉，引发体组装；在引发阶段，在引发酶的催化下以DNA链为模板合成一段短的RNA引物。复制时DNA链的延伸由DNA聚合酶催化，以亲代DNA链为模板，引发体移动，从5′→3′方向聚合子代DNA链。当子链延伸到达终止位点是，DNA复制就终止了，切除RNA引物，填补缺口，在DNA连接酶的催化下将相邻的冈崎片段连接起来形成完整的DNA长链。试述真原核生物的DNA复制的特点的不同之处①真核生物染色体有多个复制起点，多复制眼，呈双向复制，多复制子。原核生物的染色体只有一个复制起点，单复制子也呈双向复制。②真核生物冈崎片段长约200bp比原核生物略短。真核生物DNA复制速度比原核慢，速度为1000～3000bp/min(仅为原核生物的1/20～1/50）。③真核生物复制的终止在端粒处，原核生物的复制叉相遇时即终止。④真核生物染色体在全部复制完之前起点不再重新开始复制；而在快速生长的原核生物染色体DNA复制中，起点可以连续发动复制。真核生物快速生长时，往往采用更多的复制起点。⑤真核生物有多种DNA聚合酶，DNA聚合酶δ是真正的复制酶，在PCNA存在下有持续的合成能力。PCNA称为增殖细胞核抗原，相当于大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ的β-夹子，RFC蛋白相当于夹子装配器。原核生物的DNA聚合酶有三种DNA聚合酶ⅢDNA的真正复制酶：多亚基酶，含十种亚基，该酶DNA合成的持续能力强。⑥真核生物线性染色体两端有端粒结构，它是由许多成串的重短复序列组成，端粒功能是稳定染色体末段结构，防止染色体间的末端连接，并可补偿滞后链5’-末段在消除RNA引物后造成的空缺，使染色体保持一定长度。端粒酶是含一段RNA的逆转录酶。⑦RPA：真核生物的单链结合蛋白；RNaseH1和MF-1切除RNA引物，DNA聚合酶ε填补缺口。简述半保留复制的生物学意义DNA的复制过程（以大肠杆菌为例）复制起始：（1）、拓扑异构酶解开超螺旋。（2）、DnaA蛋白识别并在ATP存在下结合于四个9bp的重复序列。（3）、在类组蛋白（HU、ATP参与下,DanA蛋白变性13个bp的重复序列,形成开链复合物。（4）、DnaB借助于水解ATP产生的能量在DnaC的帮助下沿5’→3’方向移动，解开DNA双链，形成前引发复合物。（5）、单链结合蛋白结合于单链。（6）、引物合成酶（DnaG蛋白）开始合成RNA引物。链的延长（冈崎片段的合成）：在DNA聚合酶Ш的催化下，以四种5’-脱氧核苷三磷酸为底物，在RNA引物的3’端以磷酸二酯键连接上脱氧核糖核苷酸并释放出焦磷酸。DNA链的延伸同时进行前导链和滞后链的合成。两条链方向相反。6、PCR的基本原理？PCR是在试管中进行的DNA复制反应，基本原理是依据细胞内DNA半保留复制的机理，以及体外DNA分子于不同温度下双链和单链可以互相转变的性质，人为地控制体外合成系统的温度，以促使双链DNA变成单链，单链DNA与人工合成的引物退火，然后耐热DNA聚合酶以dNTP为原料使引物沿着单链模板延伸为双链DNA。PCR全过程每一步的转换是通过温度的改变来控制的。需要重复进行DNA模板解链、引物与模板DNA结合、DNA聚合酶催化新生DNA的合成，即高温变性、低温退火、中温延伸３个步骤构成PCR反应的一个循环，此循环的反复进行，就可使目的DNA得以迅速扩增。DNA模板变性：模板双链DNA?单链DNA，94℃。退火：引物＋单链DNA?杂交链，引物的Tm值。引物的延伸：温度至70℃左右，TaqDNA聚合酶以４种dNTP为原料，以目的DNA为模板，催化以引物３’末端为起点的5’→3’DNA链延伸反应，形成新生DNA链。新合成的引物延伸链经过变性后又可作为下一轮循环反应的模板PCR，就是如此反复循环，使目的DNA得到高效快速扩增。第三章启动子：是一段位于结构基因5，端上游区的DNA序列，能活化RNA聚合酶，使之与模板DNA准确地相结合并具有转录起始的特异性。指RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段特定的DNA序列。增强子：能强化转录起始的序列称为增强子。转录：以DNA为模板，按照碱基配对原则合成RNA，即将DNA所含的遗传信息传给RNA，形成一条与DNA链互补的RNA的过程。RNA的编辑：是某些RNA，特别是mRNA的一种加工方式，它导致了DNA所编码的遗传信息的改变。外显子(Exon)：真核细胞基因DNA中的编码序列，这些序列被转录成RNA并进而翻译为蛋白质。内含子(Intron)：真核细胞基因DNA中的间插序列，这些序列被转录成RNA，但随即被剪除而不翻译。复制子：生物体的复制单位称为复制子（replicon)，是在同一个复制起点控制下的一段DNA序列。转录单元：是一段启动子开始至终止子结束的DNA序列。转录起点：是与新生RNA链的第一个核苷酸相对应的DNA链上的碱基，通常为一个嘌呤。转录开始时模板上的第一个碱基，在原核中常为A或G，而且位置固定。填空1转录的基本过程包括：模板识别，转录起始，转录的延伸，转录的终止。2基因表达包括：转录和翻译两个阶段。3RNA的编辑方式：碱基突变，尿甘酸的缺失和添加。4在原核生物中，-35区与-10区之间的距离大约是16~19bp5帽子结构的功能：〔1〕在翻译中起识别作用〔2〕使mRNA免遭核苷酸的破坏6原核生物只有一种RNA聚合酶而真核生物有三种，每一种都有其特定的功能。聚合酶Ⅰ合成rRNA,聚合酶Ⅱ合成mRNA，聚合酶Ⅲ合成tRNA和5srRNA。三种聚合酶都是具有多亚基的大的蛋白复合体。7转录因子通常具有两个独立的结构域：一个结合DNA，一个激活转录。8在真核细胞mRNA的修饰中，“帽子”结构由甲基组成，“尾”由多聚腺嘌呤组成。9原核生物的绝大部分起启动子都存在共同的序列，即位于-10bp处的区和-35bp处的区，他们都是RNA聚合酶与启动子结合的位点，能与σ因子相互识别而具高度亲和性。真核生物中，在转录起始位点上游-25—-35bp处有区和位于-70--80bp处的区。选择题1δ因子的结合依靠（A）A对启动子共有序列的长度和间隔的识别B与核心酶的相互作用C翻译起始密码子的距离D转录单位的长度2下列哪一项是对三元转录复合物的正确描述（C）Aδ因子、核心酶和双链DNA在启动子形成的复合物B全酶、TFI和解链DNA双链形成的复合物C全酶、模板DNA和新生RNA形成的复合物D三个全酶在转录起始位点形成的复合物3δ因子和DNA之间相互的最佳描述是(C)A游离和与DNA结合的δ因子的数量是一样的，而且δ因子合成的越多，转录起始的机会越大Bδ因子通常与DNA结合，且沿着DNA搜寻，直到在启动子碰到核心酶，他与DNA的结合不需要依靠核心酶Cδ因子通常与DNA结合，且沿着DNA搜寻，直到碰到启动子，再有核心酶存在时与之结合Dδ因子加入三元复合物而启动RNA合成4δ因子专一性表现在（B）Aδ因子修饰酶催化δ因子变构，使其成为可识别应激启动子的δ因子B不同基因编码识别不同启动子的δ因子C不同细菌产生可互换的δ因子Dδ因子参与起始依靠特定的核心酶5在大肠杆菌的热激反应中，某些蛋白质表达的开启和关闭的机制是（C）A温度升高使特定阻抑蛋白失活B编码热敏感蛋白的基因的启动子区域在较高温度下发生变形C在高温时合成新的δ因子，调节热激基因的表达D高温时，已存在的聚合酶δ因子与启动子的结合能力强6真核生物中rRNA包括（D）A28s,23s,5srRNAB23s,16s,5srRNAC23s,16s,5.8srRNAD28s,23s,5.8s,5srRNA7内含子的剪切位点具有的特征（A）A5，—GU，3，—AGB5，—AG，3，—GUC5，—GA，3，—UGD5，—UG，3，—GA8部分原核基因的转录终止子在终止位点前均有（A）A回文序列B多聚T序列CTATA序列D多聚A序列9mRNA5，端帽子结构为（C）ApppmGBGpppGCm7GpppGDGpppmG简答题1增强子的特点〔1〕有远距离效应〔2〕无方向性〔3〕顺势调节〔4〕无物种和基因的特异性〔5〕具有组织的特异性〔6〕有相位性，其作用与DNA的构象有关〔7〕有的增强子可以对外部信号产生反应。2比较DNA复制和转录的异同点相同点：都以DNA链作为模板，合成方向均为5，端到3，端，聚合反应均遵循碱基配对原则，通过核苷酸之间形成的3，，5，—磷酸二酯键使核苷酸键延长。不同点：复制转录模板两条链均被复制模板链转录（不对称转录）原料DntpNTP酶DNA聚合酶RNA聚合酶产物子代双链DNA（半保留复制）mRNAtRNArRNA配对方式A-TG-CA-UA-TG-C引物RNA引物不需要引物DNA复制与转录的异同相同点：都需要模板都以三磷酸核苷酸为底物（NTP或dNTP）合成方向都是5→’3’不同点转录不需引物；只转录DNA分子中的一个片段（称为转录单位或操纵子,operon)；双链DNA中只有一条链具有转录活性（称为模板链）；哪个基因被转录与特定的时间、空间、生理状态有关。RNA聚合酶无校对功能。原核生物与真核生物mRNA