免疫学SOP写作参考手册

1目录标本采集与管理_____________________________________________11血液标本_______________________________________________________12尿液标本_______________________________________________________2特种蛋白测定_______________________________________________51ARRAY分析系统_________________________________________________52BNP蛋白分析系统________________________________________________83免疫分析的质量控制____________________________________________104特种蛋白检测的注意事项________________________________________134特种蛋白的临床意义____________________________________________145特种蛋白检测后事务处理________________________________________23自动化电泳技术____________________________________________241血清蛋白电泳__________________________________________________242血清免疫固定电泳______________________________________________283尿蛋白电泳技术________________________________________________334自动化电泳技术的质量控制______________________________________375蛋白电泳检测后事务处理________________________________________402T淋巴细胞Ag-NORs检测____________________________________421Ag-NORs测定的基本原理_________________________________________422测定方法______________________________________________________423T淋巴细胞Ag-NORs检测的临床意义_______________________________434注意事项与影响因素____________________________________________445Ag-NORs检测结果及报告时间_____________________________________45淋巴细胞亚群分析__________________________________________461检测原理(流式细胞术)___________________________________________462淋巴细胞亚群分析试剂__________________________________________463淋巴细胞亚群分析操作步骤______________________________________464淋巴细胞亚群检测注意事项______________________________________484淋巴细胞亚群分析临床意义______________________________________495淋巴细胞亚群检测时间及报告____________________________________501标本采集与管理1血液标本1.1采血标本的选择1.1.1生物钟周期的影响人体内有许多系列化指标在一日内会出现周期性变化，因此采用适当时段的血标本对特种蛋白的检测是至关重要的。1.1.2饮食、饥饿饮食对生化指标的影响取决于饮食中的成分及进食与采血时间的间隔，如果禁食时间太长又可引起部分特种蛋白指标偏低如补体C3、前白蛋白及转铁蛋白等。1.1.3运动运动后由于出汗和呼吸加快，体液的量及分布发生改变，使部分生化指标偏高。1.1.4某些诊断手段的影响有些诊断和治疗手段也可对检验结果产生影响，主要包括：外科手术，输液或输血，穿刺或活检等。患者在外科手术后可使C反应蛋白升高及白蛋白下降。1.2.5体位人的体位改变可引起血液中许多指标发生变化。例如，从仰卧到直立时，由于血浆容积的重新分布，大多数生化物质从仰卧到直立增高5～15%如免疫球蛋白。1.2标本处理1.2.1血清和血浆由于一些技术性和生理方面的原因，血清和血浆中某些生化指标会有所不同。一般来说，作特种蛋白分析的血液标本多数都采用血清标本如作蛋白电泳分析时血浆中常因纤维蛋白原出现在γ-球蛋白区带而干扰实验结果。1.2.2标本的保存标本采集后应立即送检，不能送检的标本应在合适的环境下保存。一般血液标本应首先分离血清，分离的血清常存放在4℃环境中。血液标本放置时间过长，C-反应蛋白测定结果偏低。一般情况下，血液标本从采集到送检不能超过1小时，实验室则应对送2检的标本及时检验，免疫学检验标本应在冰箱保存2天。1.3实验室验收血液标本的标准1实验申请单(化验报告单)应清楚填写下列内容：病人姓名、性别、年龄、科别、床号、病案号、住院号、申请序号、标本类型、临床诊断或主要症状、采集标本时间、实验室接收时间及申请检查的实验项目。2血液标本容器标签填写内容应与实验申请单的内容完全一致。3不同检测技术需要不同的血液标本种类，血液标本量不能少于最低检测量。4血液标本特殊检测应在规定的时间内送检。1.4实验室拒收血液标本的标准1实验申请单(化验报告单)填写的内容需与标本标签填写内容完全一致，否则拒收。2实验申请单(化验报告单)与标本标签应填写清晰，易于辨认和识别，否则拒收。3重度脂血、溶血的血标本，标本含量不足2.5ml者，拒收。4实验申请单(化验报告单)和标本容器受标本玷污者，拒收。5T淋巴细胞Ag-NORs检测标本应采用肝素抗凝，标本凝固、标本量不足1.0ml或溶血者，拒收。淋巴细胞亚群检测标本应采用EDTA抗凝，送检时间每周三上午8:00～9:00，标本凝固、溶血和标本采集超过2小时者，拒收。2尿液标本2.1收集尿液容器收集尿液标本的容器多种多样，留取标本最基本的要求是使用清洁、干燥、方便的容器。无论采用何种容器，都必须满足下列要求：1送检尿标本容器上应用标签，并注明病人的姓名、科别、床号、收集标本的时间及检测项目。2容器只限一次性使用、清洁，不含有干扰实验的物质，如做细菌培养应使用无菌瓶。3所用容器至少可容纳50ml尿液，开口应大于4cm，底部要宽，以防止尿液溅出。4容器应方便运输，便于保存。5对于儿科患者，特别是新生儿，可使用小型、特殊的容器。32.2尿液标本的种类2.2.1首次晨尿标本、随机尿标本收集早晨起床后的第一次和随机留取任何一个时间的尿液标本，不受条件的限制，此类标本容易获得，适合尿液常规检查和β2-微球蛋白检测。2.2.212小时尿标本即患者正常进食，晚上8点排空膀胱的尿液，再收集以后12小时内所有尿液标本，用于微量白蛋白排泄率测定。2.3.324小时尿标本病人于早晨8点排空膀胱的尿液，再收集以后24小时内所有尿液标本。此标本用于体内代谢产物的定量检测，如各种蛋白定量检查。2.3收集尿标本的注意事项1临床医护人员和实验室工作人员应指导病人正确留取尿标本的方法。2容器应清洁干燥。3女性病人应避免在月经期留取尿标本，防止混入阴道分泌物；男性则要避免前列腺或精液混入，必要时冲洗外阴后留取中段尿或导尿。4新生儿及婴幼儿收集尿标本时，应注意用0.1%新洁尔灭消毒尿道口、会阴部，然后将洁净的标本瓶紧贴尿道口收集尿标本或采取特殊留尿方式。5标本留取后应立即送检，不能立即送检的标本应妥善保存。6应根据不同实验要求，留取不同种类的尿液标本及采用不同的取样方式。每次收集尿标本量应不小于50ml，以备标本的重复检测。7注意防腐剂使用的种类、使用的方式，并嘱咐病人注意防腐剂对自已的伤害。2.4实验室验收尿液标本的标准1实验申请单(化验报告单)应清楚填写下列内容：病人姓名、性别、年龄、科别、床号、病案号、住院号、申请序号、标本类型、临床诊断或主要症状、应用的药物、收集标本时间、实验室接收时间及申请检查的实验项目。2尿标本容器标签填写内容应与实验申请单的内容是否完全一致。3尿液标本种类、尿量，符合所申请实验的要求。4尿液及时送检并实施了相应的正确防腐措施。5收集尿标本的容器、收集尿标本的过程，符合实验要求。42.5实验室拒收尿液标本的标准1实验申请单(化验报告单)填写的内容必须与尿液标本容器标签填写内容完全一致，否则拒收。2尿液特种蛋白检查的标本必须在留取标本后2小时之内送到，否则拒收。3申请尿液特种蛋白排泄率检查的标本必须是规定时间内全部尿液的混合液，并准确记录尿量，否则拒收。4特种蛋白检测的尿液量应大于5ml，否则拒收。5送检的申请单和容器应清洁卫生，送检的申请单和容器不能溅有标本，否则拒收。5特种蛋白测定1ARRAY分析系统1.1测定原理ARRAY360特种蛋白分析系统采用激光速率散射比浊法：它是将抗原抗体的沉淀反应与散射比浊分析技术相结合，对单位时间内抗原与抗体的速度进行动力学测定。当抗体的浓度固定于一定范围内时，速度峰值的高低与抗原的含量成正比，随着时间的延长，免疫复合物的量逐渐增多，抗原抗体结合的峰值在一定时间出现。不同抗原含量的样本其速率峰值是不同的，通过微机处理可得到待测蛋白成分的含量。速率散射免疫比浊法测定最大优点在于快速，检测过程中不必去掉本底散射值的干扰，也不受本底散射值的影响，这无颖增加了准确性，扩大了免疫学检测范围。1.2操作方法1.2.1仪器的开机1在开机之前，先检查各种试剂量及废液瓶。2依次打开主机、电脑、显示器、打印机电源开关。3当电脑屏幕出现“CONTIUNE”信息时，按[F1]键，屏幕出现“PLACESYSTEMDISK1INDRIVEANDPRESSTHEENTERKEY”插入第一张系统盘，按[ENTER]确认，仪器将程序装入系统内存(大约需时1分钟)，屏幕再次出现“PLACESYSTEMDISK2INDRIVEANDPRESSTHEENTERKEY”请取出第一张系统盘，插入第二张系统盘，按[ENTER]确认，仪器将程序装入系统内存(大约需时1分钟)，程序装载完毕后，仪器开始启动，完成初始化，打印出各种试剂定标信息。1.2.2仪器光路的检查在每天进行测试之前，应该对仪器的左、右外光路进行检查，其左光路检查方法如下：1在“MASTERSCREENS”屏下按[F4](SYSTEMSETUP)键，再按[F2](OPTICSUPDATE)键，再按[F1](LIFTOPTICS)键；屏幕出现“Drainingopticsflowcell”信息时，仪器自动排空流动池内的液体；2屏幕出现“Removetheflowcellandreplacewiththe120cell，press[ENTER]tocontinue”信息时，用120校正单元替代流动池，按[ENTER]确认；3屏幕出现“Readingscatterstandard”信息，仪器正在读取散射光120单元校准，6当读取完毕后，仪器屏幕出现“Replacethe120cellwiththeblackcell，press[ENTER]tocontinue”信息时，用黑棒替代120校正单元，按[ENTER]确认，仪器正在读取散射光；4屏幕出现“Removetheblackcellwithflowcell，press[ENTER]”信息时，用流动池替代黑棒，按[ENTER]确认。5检测完毕后，仪器屏幕会出现左光路外光路散射读取的结果(FILTEEDR