临床检验仪器

1、2、常用的离心方法：差速离心法、密度梯度离心法、分析性超速离心法。3、离心机的分类：①低速离心机：10000r/min,15000×g②高速离心机：20000~25000r/min，89000×g。③超速离心机：50000~80000r/min，510000×g4、离心机的主要技术参数及性能指标：4.光学显微镜①结构：光学系统和机械系统②工作原理：光学显微镜是利用光学原理，把人眼所不能分辨的微小物体放大成像，供人们提取物质微细结构信息的光学仪器。显微镜是由两组会聚透镜组成的光学折射成像系统。把焦距较短、靠近观察物、成实像的透镜组称为物镜，而焦距较长，靠近眼睛、成虚像的透镜组称为目镜。而相对于物镜的成像条件及最后二次成像于观察者的明视距离等条件的满足是通过仪器的机械调焦系统来实现的。被观察物体位于物镜的前方，被物镜作第一级放大后成一倒立的实像，然后此实像再被目镜作第二级放大，得到最大放大效果的倒立的虚像，位于人眼的明视距离处。目前，各类光学显微镜都是二次放大图像的复式显微镜，结构基本定型。5.荧光显微镜是由光源、滤色系统和光学系统（包括反光镜、聚光镜、物镜、目镜、照明系统）等主要部件组成。主要区别在于光源和滤光片不同。①光源：通常用高压汞灯作为光源，可发出紫外线和短波长的可见光。②滤光片：第一组称激发滤片，位于光源和标本之间，仅允许能激发标本产生荧光的光通过（如紫外线）；第二组是阻断滤片，位于标本与目镜之间，可把剩余的紫外线吸收掉，只让激发出的荧光通过，这样既有利于增强反差，又可保护眼睛免受紫外线的损伤。6.电子显微镜的基本结构：光学系统、真空系统、供电系统、机械系统和观察显示系统。7.物质的吸收光谱：在连续光谱中某些波长的光被物质吸收后产生的光谱被称作吸收光谱。8.物质的发射光谱：物质吸收能量后激发所发射的光被光谱仪器分析成光谱，称为发射光谱。物质的发射光谱有三种：线状光谱、带状光谱及连续光谱。9.紫外-可见分光光度计的基本结构：光源,单色器,吸收池,检测器,信号显示系统10.血细胞分析仪（BCA)是指对一定体积全血内血细胞数量和异质性进行自动分析的常规检验仪器，其主要功能是血细胞计数、白细胞分类、血红蛋白测定、相关参数计算等。11.电阻抗法血细胞检测原理：血细胞与等渗的电解质溶液相比为相对的不良导体，其电阻值比稀释液的大；当血细胞经过检测器微孔的孔径感受区时，检测器内外电极之间的恒流源电路上，电阻值瞬间增大，产生一个电压脉冲信号；产生的脉冲信号数，等于通过的细胞数，脉冲信号幅度大小与细胞体积大小成正比。根据欧姆定律，在恒电流电路上，电压变化与电阻变化成正比。电阻值又同细胞体积成正比，血细胞体积越大，电压越高，在甄别器的脉冲幅度就越大，各种大小不同细胞产生的脉冲信号分别送入仪器内电脑的各个通道，经运算得出各种细胞参数。电阻抗型BCA以此计数白细胞、红细胞、血小板及相关参数。12.联合检测型血细胞分析仪的原理:容量,电导,光散射;多角度激光散射,电阻抗;光散射,细胞化学;电阻抗,射频,细胞化学13.血红蛋白测定原理：除干式、无创型外，各型BCA对血红蛋白测定都采用光电比色原理。血细胞悬液中加入溶血剂后，红细胞溶解释放出血红蛋白，后者与溶血剂中有关成分结合形成血红蛋白衍生物，进入血红蛋白测试系统。在特定波长（多位530~550nm）下进行光电比色，吸光度值与所含血红蛋白含量成正比，经仪器计算显示出血红蛋白浓度。14.因为国际ICSH推荐的氢化高铁（HICN）法的最大吸收峰在540nm，仪器血红蛋白的校正必须以HICN值为准。01651仪器分析、检验仪器原理及维护2015年01月10日(星期六)09:00-11:30临床检验仪器人民卫生出版社，2012年第2版曾照芳等15.血细胞检测系统：①电阻抗检测系统：由检测器、放大器、甄别器、阈值调节器、检测计数系统和自动补偿装置组成。这类检测系统将主要应用于“二分群、三分群”仪器中。②流式光散射检测系统：由激光光源、检测装置和检测器、放大器、甄别器、阈值调节器、检测计数系统和自动补偿装置组成。16.血细胞分析仪的性能指标：实际测试参数WBC、HGB、RBC、HCT,PLT、PCT和计算参数MCV、MCH、MCHC等。17.血细胞分析仪的评价：精密度,携带污染率,总重复性,线性范围,白细胞分类的评价18.常见堵孔原因与处理方法：①仪器长时间不用，试剂中的水分蒸发、盐类结晶堵孔，可用去离子水浸泡，待完全溶解后，按CLEAN键清洗；②末梢采血不顺或用棉球擦拭微量取血管；③抗凝剂量与全血不匹配或静脉采血不顺，有小凝块；④小孔管微孔蛋白沉积多，需清洗；⑤样本杯未盖好，空气中的灰尘落入杯中。后四种原因，一般按CLEAN键清洗，若不行，需小心卸下检测器按仪器说明书进行清理。19.血凝仪（ACA）检测方法主要有：凝固法、底物显色法、免疫学法、干化学法等。其中凝固法是ACA使用的最基本、最常用的方法。20.血凝仪的基本结构：半自动凝血仪：主要由样本和试剂预温槽、加样器、检测系统（光学、磁场）及微机组成。全自动凝血仪：包括样本传送及处理装置、试剂冷藏位、样本及试剂分配系统、检测系统、计算机控制系统及附件等。全自动血凝检测流水线21.尿液分析仪检测项目包括尿蛋白、尿葡萄糖、尿PH、尿酮体、尿胆红素、尿胆原、尿潜血、亚硝酸盐、尿白细胞、尿比重、维生素C,尿液颜色与浊度。22空白块是为了消除尿液本身的颜色及试剂块分布的状态不均等产生出的测试误差，提高测量准确度而设置的。23.尿液分析仪的检测原理：把试剂带浸入尿液中后，除了空白块外，其余的试剂块都因和尿液发生了化学反应而产生了颜色的变化。试剂块的颜色深浅与光的吸收和反射程度有关，颜色越深，相应某种成分浓度越高，吸收光量值越大，反射光量值越小，反射率也越小；反之，反射率越大。因为颜色的深浅又与尿液中各种成分的浓度成比例关系，所以只要测得光的反射率即可求得尿液中各种成分的浓度。24尿液分析仪一般由机械系统、光学及检测系统（光源、单色处理、关电转换）、电路系统（将转换后的电信号放大,经模/数转换后送给CPU处理）25尿液分析仪的安装条件：①应安装在清洁、通风处，避免潮湿。②安装在稳定的水平实验台上（最好是水泥台）。③应安装在大小适宜、有足够空间便于操作的地方。④要求仪器接地良好，电源电压稳定。26尿沉渣分析仪一类是通过尿沉渣直接镜检再进行影像分析，得出相应的技术资料与实验结果；另一类是流式细胞术分析。27流式细胞术尿沉渣分析仪的基本组成：光学检测系统、液流系统、电路系统和自动进样装置。28流式细胞术尿沉渣分析仪原理：尿样品经稀释染色后进入鞘液流动池，样品被无粒子颗粒包围，以单个纵列形式通过流动池中心轴线被氩激光照射，染色尿液细胞发出的荧光反应细胞的定量特性，前向散射光强度，它成比例的反应细胞的大小和电阻抗的大小，仪器将这种光信号转换成电信号，分析后得到直方图和散射图。29流式细胞术尿沉渣分析仪的检测项目：红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、细菌、其他检测和导电率的测定。30自动生化分析技术是将生物化学分析过程中的取样、加试剂、去干扰、混合、保温反应、自动检测、结果计算、数据处理、打印报告以及实验后清洗等步骤自动化的技术。应用这一类仪器一般都具有灵敏、准确、快速、节约和标准化等优点。31自动生化分析仪可分为连续流动式、离心式、分立式和干化学式。32分立式原理：按手工操作的方式编排程序，以有序的机械操作代替手工操作，用加样探针将样品加入各自的反应杯中，试剂探针按一定时间自动定量加入试剂，经搅拌器充分混匀后反应，反应杯同时作为比色杯进行测定。结构：样品处理系统，检测系统，计算机系统。33目前自动生化分析仪多采用后分光，即光源光线直接透过样品，通过光栅，再进行吸光度的检测。使用后分光技术，可以在同一体系中检测多种成分。如果比色池中有多种吸收特征不同的组成物质，当复色光通过后，各物质分别对各自的特征性光波产生吸收，之后再分成光谱对不同的波长进行测定，可以在同一体系中同时得到多组分结果，无需移动仪器的任何部分，稳定性好，速度快，噪声低，分析精确度和准确度高，故障少。光栅使用寿命长，无需任何保养。34自动生化分析仪性能指标：检测准确度，自动化程度，分析效率，应用范围，节省开支降低成本。日常维护：仪器工作环境，流动比色池，单色器和检测器，仪器管道系统，日常维护与保养。35微生物自动鉴定及药敏分析系统的鉴定原理：采用微生物数码鉴定原理。数码鉴定是指通过数学的编码技术将细菌的生化反应模式转换成数学模式，给每种细菌的反应模式赋予一组数码，建立数据库或编成检索本。通过对未知菌进行有关生化实验并将生化反应结果转换成数字（编码），查阅检索本或数据库，得到细菌名称。36微生物自动鉴定及药敏分析系统的基本结构：测试卡、菌液接种器、培养和监测系统、数据管理系统。37酶标法性能指标：滤光片波长精度检查及其峰值测定，灵敏度和准确度，通道差和孔间差检测，零点漂移，精密度评价，线性测定，双波长评价38由酶标仪和普通光电比色计的不同之处：塑料微孔板，垂直光束39免疫浊度检测是将液相内的沉淀试验与现代光学仪器和自动分析技术相结合的一项分析技术。40时间分辨荧光免疫检测原理：用镧系三价稀土离子及其螯合物（如Eu3+螯合物）作为示踪物标记抗原、抗体、核酸探针等物质，当免疫反应发生后，根据稀土离子螯合物的荧光光谱的特点（特异性强，巨大Stokes位移、荧光寿命长），用时间分辨荧光分析仪延缓测量时间，排除标本中非特异性荧光的干扰，所得信号完全是稀土元素螯合物发射的特异荧光，测定免疫反应最后产物的特异性荧光信号。根据荧光强度判断反应体系中分析物的浓度，达到定量分析的目的。41即时检测POCT是指在患者旁边由非专业人员（临床人员或患者）利用便携式仪器快速分析患者标本并准确获取结果的分析技术。43PCR技术的原理：PCR技术的本质是核酸扩增技术，通过加热使双链DNA解开螺旋，在退火温度条件下引物同模板DNA杂交，在TaqDNA聚合酶、dNTPs、Mg2+和合适PH缓冲液存在条件下延伸引物，重复上述“变性—退火—引物—延伸”过程至25~40个循环，呈指数级扩大待测样本中的核酸拷贝数，达到体外扩增核酸序列的目的。43实时荧光定量PCR（RQ-PCR）技术是在PCR反应体系中加入特异性的荧光染料或探针，荧光信号的变化真实的反应了体系中模板的增加，通过检测荧光信号，可以实时监测整个PCR反应过程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析。44PCR性能指标：温度控制准确性，均一性，升降温的速度，不同模式下相同温度的特性，热盖温度荧光检测Ct重复性误差，荧光检测范围，仪器的检测通道范围45电泳（EP)：是指带电荷的溶质或粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的现象。46影响电泳的外界因素：①电场强度②溶液的PH值③溶液的离子强度④电渗作用⑤离子的迁移率⑥吸附作用47生物安全柜的基本工作原理：生物安全柜是防止操作处理过程中某些含有危险性或未知性生物微粒发生气溶胶散逸的箱形空气净化负压安全装置。气溶胶是指悬浮于气体介质中、粒径一般为0.001~100um的固态、液态微粒所形成的胶溶态分散体系。48生物安全柜领域最重要的标准是欧洲EN12469：2000标准和美国NSF49标准。49生物安全柜一般由箱体和支架两部分组成。